GB 5009.35-2016 食品安全国家标准 食品中合成着色剂的测定

中华人民共和国国家标准GB5009352016食品安全国家标准食品中合成着色剂的测定20160831发布20160920实施中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会发布GB5009352016前言本标准代替GB/T5009352003食品中合成着色剂的测定。本标准与GB/T5009352003相比,主要变化如下标准名称修改为“食品安全国家标准食品中合成着色剂的测定”增加了试剂的级别和分子式增加了标准品修改了计算公式修改了色谱图删除第二法薄层色谱法删除第三法示波极谱法。GB50093520161食品安全国家标准食品中合成着色剂的测定1范围本标准规定了饮料、配制酒、硬糖、蜜饯、淀粉软糖、巧克力豆及着色糖衣制品中合成着色剂不含铝色锭的测定方法。本标准适用于饮料、配制酒、硬糖、蜜饯、淀粉软糖、巧克力豆及着色糖衣制品中合成着色剂不含铝色锭的测定。2原理食品中人工合成着色剂用聚酰胺吸附法或液液分配法提取,制成水溶液,注入高效液相色谱仪,经反相色谱分离,根据保留时间定性和与峰面积比较进行定量。3试剂和材料除非另有说明,本方法所用试剂均为分析纯,水为GB/T6682规定的一级水。31试剂311甲醇CH3OH色谱纯。312正己烷C6H14。313盐酸HCL。314冰醋酸CH3COOH。315甲酸HCOOH。316乙酸铵CH3COONH4。317柠檬酸C6H8O7H2O。318硫酸钠NA2SO4。319正丁醇C4H10O。3110三正辛胺C24H51N。3111无水乙醇CH3CH2OH。3112氨水NH3H2O含量2025。3113聚酰胺粉尼龙6过200M目筛。32试剂配制321乙酸铵溶液002MOL/L称取154G乙酸铵,加水至1000ML,溶解,经045M微孔滤膜过滤。322氨水溶液量取氨水2ML,加水至100ML,混匀。323甲醇甲酸溶液64,体积比量取甲醇60ML,甲酸40ML,混匀。GB50093520162324柠檬酸溶液称取20G柠檬酸,加水至100ML,溶解混匀。325无水乙醇氨水水溶液721,体积比量取无水乙醇70ML、氨水溶液32220ML、水10ML,混匀。326三正辛胺正丁醇溶液5量取三正辛胺5ML,加正丁醇至100ML,混匀。327饱和硫酸钠溶液。328PH6的水水加柠檬酸溶液调PH到6。329PH4的水水加柠檬酸溶液调PH到4。33标准品331柠檬黄CAS1934210。332新红CAS220658764。333苋菜红CAS915673。334胭脂红CAS2611827。335日落黄CAS2783940。336亮蓝CAS3844459。337赤藓红CAS16423680。34标准溶液配制341合成着色剂标准贮备液1MG/ML准确称取按其纯度折算为100质量的柠檬黄、日落黄、苋菜红、胭脂红、新红、赤藓红、亮蓝各01G精确至00001G,置100ML容量瓶中,加PH6的水到刻度。配成水溶液100MG/ML。342合成着色剂标准使用液50G/ML临用时将标准贮备液加水稀释20倍,经045M微孔滤膜过滤。配成每毫升相当500G的合成着色剂。4仪器和设备41高效液相色谱仪,带二极管阵列或紫外检测器。42天平感量为0001G和00001G。43恒温水浴锅。44G3垂融漏斗。5分析步骤51试样制备511果汁饮料及果汁、果味碳酸饮料等称取20G40G精确至0001G,放入100ML烧杯中。含二氧化碳样品加热或超声驱除二氧化碳。512配制酒类称取20G40G精确至0001G,放入100ML烧杯中,加小碎瓷片数片,加热驱除乙醇。513硬糖、蜜饯类、淀粉软糖等称取5G10G精确至0001G粉碎样品,放入100ML小烧杯中,加水30ML,温热溶解,若样品溶液PH较高,用柠檬酸溶液调PH到6左右。514巧克力豆及着色糖衣制品称取5G10G精确至0001G,放入100ML小烧杯中,用水反复洗涤色素,到巧克力豆无色素为止,合并色素漂洗液为样品溶液。GB5009352016352色素提取521聚酰胺吸附法样品溶液加柠檬酸溶液调PH到6,加热至60,将1G聚酰胺粉加少许水调成粥状,倒入样品溶液中,搅拌片刻,以G3垂融漏斗抽滤,用60PH为4的水洗涤3次5次,然后用甲醇甲酸混合溶液洗涤3次5次含赤藓红的样品用522法处理,再用水洗至中性,用乙醇氨水水混合溶液解吸3次5次,直至色素完全解吸,收集解吸液,加乙酸中和,蒸发至近干,加水溶解,定容至5ML。经045M微孔滤膜过滤,进高效液相色谱仪分析。522液液分配法适用于含赤藓红的样品将制备好的样品溶液放入分液漏斗中,加2ML盐酸、三正辛胺正丁醇溶液510ML20ML,振摇提取,分取有机相,重复提取,直至有机相无色,合并有机相,用饱和硫酸钠溶液洗2次,每次10ML,分取有机相,放蒸发皿中,水浴加热浓缩至10ML,转移至分液漏斗中,加10ML正己烷,混匀,加氨水溶液提取2次3次,每次5ML,合并氨水溶液层含水溶性酸性色素,用正己烷洗2次,氨水层加乙酸调成中性,水浴加热蒸发至近干,加水定容至5ML。经045M微孔滤膜过滤,进高效液相色谱仪分析。53仪器参考条件531色谱柱C18柱,46MM250MM,5M。532进样量10L。533柱温35。534二极管阵列检测器波长范围400NM800NM,或紫外检测器检测波长254NM。535梯度洗脱表见表1。表1梯度洗脱表时间MIN流速ML/MIN002MOL/L乙酸铵溶液甲醇010955310653571001001010010010110955211095554测定将样品提取液和合成着色剂标准使用液分别注入高效液相色谱仪,根据保留时间定性,外标峰面积法定量。6分析结果的表述试样中着色剂含量按式1计算XCV1000M100010001GB50093520164式中X试样中着色剂的含量,单位为克每千克G/KGC进样液中着色剂的浓度,单位为微克每毫升G/MLV试样稀释总体积,单位为毫升MLM试样质量,单位为克G1000换算系数。计算结果以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示,结果保留两位有效数字。7精密度在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10。8其他方法检出限柠檬黄、新红、苋菜红、胭脂红、日落黄、诱惑红均为05MG/KG,亮蓝、赤藓红均为02MG/KG检测波长254NM时亮蓝检出限为10MG/KG,赤藓红检出限为05MG/KG。GB50093520165附录A着色剂标准色谱图A1着色剂标准色谱图400NM800NM最大值图着色剂标准色谱图400NM800NM最大值图见图A1。说明1柠檬黄2新红