仪器分析作业题--外标法内标法

1、一、外标一点法 【含量测定】芍药苷 照高效液相色谱法（附录 D)测定。色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-0.05molL磷酸二氢钾溶液(40：65)为流动相；检测波长为230nm。理论板数按芍药苷峰计算应不低于3000。对照品溶液的制备 取经五氧化二磷减压干燥器中干燥36小时的芍药苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，即得。供试品溶液的制备 取本品粗粉约0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，称定重量，浸泡4小时，超声处理20分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。测定法 分别精密吸取对

2、照品溶液与供试品溶液各10l，注入液相色谱仪，测定，即得。本品含芍药苷(C23H28O11)不得少于1.8。解：设测得对照品溶液和供试品溶液峰面积为A对= A样=7800已知对照品溶液浓度C对=0.5mg/ml供试品中芍药苷的含量X%=药典规定药材含芍药苷(C23H28O11)不得少于1.8，供试品中芍药苷的含量为35.5%，故供试品药材合格。 二、外标两点法【含量测定】 黄芪甲苷 照高效液相色谱法（附录 D）测定。色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-水(32：68)为流动相；蒸发光散射检测器检测。理论板数按黄芪甲苷峰计算应不低于4000。对照品溶液的制备 取黄芪

3、甲苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，即得。供试品溶液的制备 取本品中粉约4g，精密称定，置索氏提取器中，加甲醇40ml，冷浸过夜，再加甲醇适量，加热回流4小时，提取液回收溶剂并浓缩至干，残渣加水10ml，微热使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取4次，每次40ml，合并正丁醇液，用氨试液充分洗涤2次，每次40ml，弃去氨液，正丁醇液蒸干，残渣加水5ml使溶解，放冷，通过D101型大孔吸附树脂柱(内径为1.5cm，柱高为12cm)，以水50ml洗脱，弃去水液，再用40乙醇30ml洗脱，弃去洗脱液，继用70乙醇80ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇溶解，转移至5ml量瓶中

4、，加甲醇至刻度，摇匀，即得。测定法 分别精密吸取对照品溶液10l、20l，供试品溶液20l，注入液相色谱仪，测定，用外标两点法对数方程计算，即得。本品按干燥品计算，含黄芪甲苷(C41H68O14)不得少于0.040。解：设测得对照品溶液色谱峰面积分别为A1= A2=，测得供试品溶液色谱峰面积A3=2983。已知对照品浓度C对=0.5mg/ml，对照品进样量根据对照品峰面积和进样量可得如下图所示方程即y=2.6e+5x-4125，得a=2.6e-4125，b=5供试品溶液峰面积A3=2983.带入方程，得到供试品溶液进样量m3=1420g=0.00142g供试品中黄芪甲苷含量为药典中规定药材干燥

5、品种含黄芪甲苷(C41H68O14)不得少于0.040，供试品中黄芪甲苷含量为8.875%。故供试品药材合格。三、内标法【含量测定】 照气相色谱法(附录 E)测定。 色谱条件与系统适用性试验 聚乙二醇20000(PEG-20M)毛细管柱(柱长为30m，内径为0.53mm，膜厚度为1.0m)，柱温为160。理论板数按樟脑峰计算应不低于20 000。 校正因子的测定 取萘适量，精密称定，加无水乙醇制成每1ml含4mg的溶液，作为内标溶液。另取樟脑对照品、薄荷脑对照品、冰片对照品各30mg、10mg、20mg，精密称定，置同一50ml量瓶中，精密加入内标溶液5ml，加无水乙醇稀释至刻度，摇匀，吸取l

6、l，注入气相色谱仪，计算校正因子。 测定法 精密量取本品1ml，置50ml量瓶中，精密加入内标溶 液5ml，加无水乙醇稀释至刻度，摇匀，吸取1l，注入气相色谱仪，测定，冰片以龙脑峰、异龙脑峰面积之和计算，即得。本品每1ml中含樟脑(C10H16O)应为25.534.5mg；含薄荷脑(C10H20O)应为8.511.5mg，含冰片(C10H18O)应为17.023.0mg。解：（1）校正因子的测定 设测得萘及樟脑、薄荷脑、冰片对照品溶液的峰面积分别为A萘=，A樟脑=，A薄荷脑=，A冰片=。由题已知萘及各对照品溶液浓度分别为C萘=4mg/ml，C樟脑=0.6mg/ml,C薄荷脑=0.2mg/mlC冰片=0.4mg/ml。据公式可得（2）含量测定 已知C萘=4mg/l，f樟脑=0.17，f薄荷脑=0.45，f冰片=0.22。设测得各物质的峰面积及萘的峰面积分别为A萘=，A樟脑=，A薄荷脑=20780，A冰片=99870据公式可得故每毫升供试品中含有樟脑25.69mg，薄荷脑10.33mg，