D-Dimer标准操作流程

1、d-dimer标准操作流程 xxxx医院检验科 acl8/9000d-二聚体标准操作流程 文件编号: 生效日期: 仪器序列号： 页码/pages：1/7 版本 / revision: d二聚体 标准操作流程 目录 1 目的 2 检测原理 3 产品信息 4 试剂配制 5 试剂保存和稳定性 6 预防和警告 7 样本收集和准备 8 检测需要但试剂盒中未提供的耗材 9 质量控制 10定标 11定标方法 (如需要) 12操作流程 13结果 14 结果解释 15程序局限性 16 预期结果 17 性能特征 18 参考文献 1 目的 此程序提供在acl? 8000，acl9000上使用hemosil? d-d

2、imer试剂用于d-二聚体检测的指导。 2 测试原理 d-二聚体存在于因子xiiia交联纤维蛋白(xdp)纤溶酶降解过程中形成的可溶性衍生物中。这些可溶性纤维蛋白降解产物包括一种原纤维蛋白原分子中没有 的新抗原（d-二聚体结构），以及它的降解产物和可溶性纤维蛋白。 d-二聚体胶乳试剂是一种大小均一的聚苯乙烯乳胶颗粒悬浊液，这些乳胶颗粒上包被有对纤维蛋白可溶性衍生物中的d-二聚体结构具有高度特异性的单克隆抗体。当含有d-二聚体的血浆与d-二聚体试剂盒中的乳胶试剂和反应缓冲液 起草人: 日期： 修改人： 日期： xxxx医院检验科 acl8/9000d-二聚体标准操作流程 文件编号: 生效日期:

3、仪器序列号： 页码/pages：2/7 版本 / revision: 反应时，包被的乳胶颗粒会发生凝集。凝集的程度与样本中d-二聚体浓度成正比，仪器通过检测405 nm 波长处，由凝集引起的透射光的减少进行测定（透射免疫比浊法）。 3 产品信息 d-二聚体试剂盒（p/n 20008500）内含： r 胶乳试剂：4 瓶x 3 ml包被有鼠单克隆抗体 (ma-8d3)聚苯乙烯乳胶颗粒冻干悬浊液，内含牛血清白蛋白，缓冲液，稳定剂和防腐剂。 b 反应缓冲液：3瓶x9ml磷酸盐缓冲液，内含牛血清白蛋白，稳定剂和防腐剂。 c d-二聚体定标液：2 瓶x 1 ml冻干溶液，为从人纤溶酶降解的纤维蛋白中 部分

4、纯化的d-二聚体。内含牛血清白蛋白，缓冲液，稳定剂和防腐剂。 d-二聚体质控（p/n 20008610）试剂盒内含： l 低值质控： 5 瓶x 1 ml冻干溶液，为从人纤溶酶降解的纤维蛋白中部分纯化的d-二聚体。内含牛血清白蛋白，缓冲液，稳定剂和防腐剂。 h 高值质控：5 瓶x 1 ml冻干溶液，为从人纤溶酶降解的纤维蛋白中部分纯化的d-二聚体。内含牛血清白蛋白，缓冲液，稳定剂和防腐剂。 4 试剂配制 胶乳试剂:用3 ml nccls ii型或相同质量要求的去离子水复溶。盖上盖子，轻轻混匀。确保充分溶解。置15-25oc 平衡30分钟，用前混匀。请勿用力振摇。防止产生气泡。 反应缓冲液:直接使

5、用，用前颠倒混匀。 d-二聚体定标液:每瓶用1 ml nccls ii型或相同质量要求的去离子水复溶。 o 盖上盖子，轻轻混匀。确保充分溶解。置15-25c 平衡30分钟，用前混匀。请勿用力振摇。防止产生气泡。 d-二聚体质控：每瓶用1 ml nccls ii型或相同质量要求的去离子水复溶。 盖上盖子，轻轻混匀。确保充分溶解。置15-25oc 平衡30分钟，用前混匀。请勿用力振摇。防止产生气泡。 5 试剂保存和稳定性 未开封的试剂和定标液可稳定至2-8 oc至试剂盒上标注的有效期。 为了最佳试剂保存，建议不使用时，将试剂从仪器系统取出，使用原瓶，保存于 起草人: 日期： 修改人： 日期： xx

6、xx医院检验科 acl8/9000d-二聚体标准操作流程 文件编号: 生效日期: 仪器序列号： 页码/pages：3/7 版本 / revision: 2-8 oc。 胶乳试剂：复溶后于原瓶中2-8 oc稳定一个月，或者在acl 8000-10000上（15oc）稳定1天，不可冻存。 反应缓冲液：开瓶后于原瓶中2-8 oc稳定一个月，或者在acl 8000-10000上（15-25oc）稳定1天。 d-二聚体定标液：复溶后于原瓶中15-25oc稳定3天；2-8oc稳定一个月；20oc 稳定二个月。冷冻的定标液应当在37oc复溶，用前轻轻混匀，不可反复冻溶。 d-二聚体质控：复溶后于原瓶中15-

7、25oc稳定3天；2-8oc稳定一个月；20oc稳定二个月。冷冻的质控液应当在37oc复溶，用前轻轻混匀，不可反复冻溶。 6 预防和警告 潜在传染危险！ 此产品的耗材经fda认证的检测方法检测，不含乙肝表面抗原 (hbsag)，抗hcv和抗 hiv (1 & 2)抗体。应视作潜在传染原处理。 所有试剂均含低于0.1%叠氮钠，在含铅的金属管中可能形成易爆的叠氮化物，请安全处理废弃物。 避免于皮肤和眼睛接触(s 24/25)，不可倒入排水沟(s 29)。需穿着相应的防护服(s 36)。 7 样本收集和准备 9份新鲜静脉血加入1份枸掾酸三钠抗凝剂中混匀。 有关样本采集，处理和贮存的详细说明请参阅临床

8、和实验室标准委员会clsi (原 nccls) h21-a4 文件。 冷冻样本应当在 37oc迅速复溶，检测前必须离心。复溶后2小时内完成检测。 8 检测需要但试剂盒中未提供的耗材 ? nccls ii型或相同质量要求的去离子水 ? d-二聚体质控（p/n 20008610） ? 因子稀释液（p/n 09757600） 9 质量控制 推荐使用两个水平的质控进行完整的质量控制过程。上表中所列低值和高值d-二聚体质控品可用于该质控程序。每个实验室应当建立自己的平均值和标准差，以及整套质控程序用来监测实验测试。 依据良好的实验室规范，质控应当每8小时运行一次。请参阅westgard et al 文献

9、判别质控出控并获得相应的解决办法。 10 定标 起草人: 日期： 修改人： 日期： xxxx医院检验科 acl8/9000d-二聚体标准操作流程 文件编号: 生效日期: 仪器序列号： 页码/pages：4/7 版本 / revision: 要想正确获得d-二聚体测试结果，需要进行定标并保存定标曲线。进行定标时不能同时运行样本。以下情况，需要定标： ? 更换试剂批号 ? 满足当地法规需要 ? 根据实验室内部需要 11 定标方法（如需要） 1. 从主菜单，选择 setup/liquids 。输入测试所需液体的所有试剂信息。 2. 在液体信息屏幕，输入从d-二聚体试剂盒内获得的d-二聚体定标液的靶值

10、。 3. 选择 confirm（） 关闭液体设置屏幕。 4. 从主菜单，选择 calibration/calibrate 。从tests to calibrate列表钟选择 d-dimer。 5. 选择 materials map 图标。查看试剂位置，更新容量，检查批号，反应盘等等。 6. 选择 start 图标。 7. 查看定标结果，如果r 2 定标曲线的相关系数r必须大于0.980。 变异系数cv%值要求： ? 12 操作流程 1、如需要，确认适当的d-dimer和d-d h测试项目已经被活化（操作手册第4章节）。 2、如需要，定义液体设置（操作手册第4章节）。 3、如需要，建立质控文件（

11、操作手册第3章节）。 4、如需要，设置组合，包含d-dimer和d-d h。如使用单测试/组合测试，使用或不使用条码运行样本，请参阅手册（操作手册第4章节）。 5、在样本盘上装载原始试管，样本杯和/或质控。确保条码管上的条码朝向样本盘外壁。 6、选择 analysis，选择 profile session或single test.。 a、如选择 profile session，在当前组合下，下拉选择一个包含 d-dimer和d-d h项目的测试组合，这将利于 在同一次测试内完成d-dimer和d-d h项目测试。 起草人: 日期： 修改人： 日期： xxxx医院检验科 acl8/9000d-二

12、聚体标准操作流程 文件编号: 生效日期: 仪器序列号： 页码/pages：5/7 版本 / revision: b、如选择 single test session，选择d-dimer 项目。需要使用d-d h的样本必须再次选择d-d h 进行另外单独测试 7、选择 read bar codes 图标，不含条码的样本。比如质控样本将会触发样本识别错误报警。选择 ok ，并通过选择 enter/edit sample id 图标输入样本编号，或者选择 add qc 添加质控编号。如需要，请重复以上操作。 8、如果 lis 为非选项，对没有测试请求的样本选择 order test 图标。使用箭头键选

13、择一个测试，选择 program tests 图标添加项目测试请求。按confirm 图标保存设置并关闭窗口。 9、在状态栏内（待测）确保所有测试均提示 “p” 。 10、选择 materials map 图标。检查试剂耗材位置，更新耗材量，检查批号，反应盘等等。 11、选择 start 图标。 12、仪器将确认可用的反应孔，并且提示操作者输入反应盘上第一和最后一个孔的位置。 13 结果计算 d-二聚体结果以ng/ml形式报告。更多详情，请参阅仪器操作手册。 备注：由于没有国际参考标准，一些生产厂家用feu（纤维蛋白原当量单位）表示d-二聚体的结果。这两种单位之间的关系大约为： 2 feu = 1 ng/ml.1 14 结果解释 d-二聚体检测被广泛应用于血栓的诊断和溶栓治疗的监测。 d-二聚体水平升高可见于：深静脉血栓（dvt），肺栓塞(pe) 和弥散性血管内凝血(dic)。d-二聚体水平升高也可见于正常妊娠过程，但是d-二聚体的极度升高提示有并发症的可能。 然而仅仅有d-二聚体结果的升高不足以用来诊断dvt和pe，而阴性的d-二聚体检测结果可用来排除诊断静脉血栓。5许多文献均曾探讨过如何确定临界值用来作为静脉血栓的诊断。 15局限性/干扰 以下情况，d-二聚体结果不受影响： ? 血红