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文档简介

1、第一章 绪论要点难点1必须掌握分子生物学的基本概念;2一般了解分子生物学发展简史,特别是那些与分子生物学发展有密切关系的关键事件;3熟悉分子生物学 (一)分子生物学的基本概念1分子生物学术语2分子生物学的任务(二)分子生物学诞生的背景及发展简史 发展史表1早期的分子生物学发展动态2现代分子生物学的发展(三)分子生物学的研究内容1DNA重组技术2基因表达调控3结构分子生物学4基因组5功能基因组6生物信息学(四)分子生物学发展前景展望、它与其它学科的关系 习题一、名词解释1分子生物学(Molecular biology)2DNA重组技术(Recombinant DNA techniques)3基因

2、(gene)二、填空题1分子生物学是研究核酸等生物大分子的 、 、 及其重要性和规律性的科学,是人类从 水平上真正揭开生物世界的奥秘,由被动地适应自然界转向主动地改造和重组自然界的基础学科。2分子生物学主要研究核酸在细胞生命过程中的作用,包括 的复制、 以及基因的 规律,所以,这门学科其实应该叫做核酸生物学(biology of nucleic acid)。31869年米歇尔(Friedrich Miescher)分离出 。41928年格里菲斯(Frederick Griffith)发现了一种可以在细菌之间转移的 。51953年沃森(James Watson)和克里克(Francis Cric

3、k)在 杂志上发表DNA双螺旋结构的论文。正是由于这个模型,他们获得 年诺贝尔奖。6D.Baltimore;H.Temin,美国科学家。由于他们各自发现了 ,打破了中心法则,该酶能使mRNA反转录成 ,使真核基因的克隆表达成为可能,为病毒学、遗传学、基因工程作出了重大贡献,他们获得 年诺贝尔奖。71972年Paul Berg创造出第一个 分子。81973年Herbert Boyer和Stanley Cohen发展了 技术,发现改造后的DNA分子可在外来细胞中复制。S.Cohen,在质粒的研究中作出了开创性的研究,1973年他又第一个实现了 的转移,创立了 重组模式。科学界把这一年定为_ 诞生之

4、年,以纪念这位基因工程的创始人。91977年Walter Gilbert,Allan M. Maxam和Frederick Sanger开发出 测序技术。F.Sanger,英国剑桥大学教授。由于他在 一级结构和核酸序列分析方面的天才创造和震惊世界的成果,在 年和 年先后两次获得诺贝尔奖。他是生物医学科学领域里唯一两次获得这一最高荣誉的伟大科学家。101978,P.Berg首次用SV40作载体与噬菌体实现了 的重组。由于他在重组DNA技术方面的功绩获得 年诺贝尔奖。111982年 数据库建立。121983年Kary Mullis发明了聚合酶链式反应(PCR)技术,并因此获 年诺贝尔奖。13199

5、8年6月29日美国宣布正式启动 计划,世界各国也开始加大投入,以生物芯片为核心的相关产业正在全球崛起,专家统计:全球目前生物芯片工业产值为10亿美元左右,预计今后5年之内,生物芯片的市场销售可达到200亿美元以上。142001年2月,Nature和Science同时发表了 ,这是人类历史上最伟大的成就之一。152003年人类基因组计划宣布,人类基因组 绘制成功,人类基因组计划的所有目标全部实现。三、选择题(单选或多选)11869年首先分离出核酸的科学家是 ( )(a)Walter Flemming(b)Archibald Garrod(c)Friedrich Miescher(d)Thomas

6、 Hunt Morgan(e)Alfred Henry Sturtevant21944年指出Griffith发现的遗传分子就是DNA的科学家是 ( )(a)Oswald Avery(b)Colin Macleod(c)Maclyn McCarty(d)Rosalind Franklin(e)Linus Pauling31961年根据试验,提出在分子水平上特定基因被激活或抑制的机制乳糖操纵子学说的科学家是 ( )(a)Friedrich Miescher(b)Maclyn McCarty(c)Francois Jacob(d)Jacques Monod(e)Marshall Nirenberg4

7、有位科学家首先发现了逆转录酶,打破了中心法则,该酶能使mRNA反转录成cDNA,使真核基因的克隆表达成为可能,为病毒学、遗传学、基因工程作出了重大贡献,他们获得1965年诺贝尔奖。这位科学家是 ( )(a)Jacques Monod(b)D.Baltimore(c)H.Temin(d)Marshall Nirenberg(e)Robert Holley51973年发展了重组DNA技术,发现改造后的DNA分子可在外来细胞中复制。这位科学家是 ( )(a)Herbert Boyer(b)Stanley Cohen(c)H.Temin(d)Marshall Nirenberg(e)Robert Ho

8、lley答案部分第一章 绪 论一、名词解释1分子生物学(Molecular biology)答:分子生物学是从分子水平上研究生命本质的一门新兴边缘学科,广义的讲,一切从分子水平研究生命奥秘的研究工作都是分子生物学。它是研究核酸等生物大分子的形态、结构、功能、及其在遗传信息和细胞信息传递中的作用为研究对象,是当前生命科学中发展最快并正在与其它学科广泛交叉与渗透的重要前沿领域。2DNA重组技术(Recombinant DNA techniques)答:DNA重组技术(又称基因工程),它是将不同的DNA片段(某个基因或基因的一部分)按照人们的设计定向连接起来,在特定的受体细胞中与载体同时复制并得到表

9、达,产生影响受体细胞的新的遗传性状。严格地说,DNA重组技术并不完全等于基因工程,因为后者还包括其他可能使生物细胞基因组结构得到改进的体系。3基因(gene)答:基因(gene)是DNA(脱氧核糖核酸)分子上具有遗传效应的特定核苷酸序列的总称,是具有遗传效应的DNA分子片段,是合成一种功能蛋白或RNA分子所必须的全部DNA序列。二、填空题1形态;结构;功能;分子 2核酸本身;表达与调控 3核酸 4遗传分子 5自然;1958 6逆转录酶;cDNA;1965 7重组DNA 8重组DNA;细菌间抗药性基因;基因工程;基因工程 9DNA;蛋白质;1958;1980 10两种病毒DNA;1980 11G

10、enBank 12Kary Mullis;1993 13生物芯片 14人类基因组全序列 15序列图三、选择题1c;2a,b,c;3c,d;4b,c;5a,b第二章 染色体与DNA要点难点1必须掌握一些基本概念:DNA的一级结构、高级结构、复制子、组蛋白、非组蛋白、基因组、DNA类型、2熟悉染色体的基本成分和基本结构单位3领会原核生物和真核生物基因组的结构特点4探讨各种各类生物的DNA复制的基本概念和过程;参与工作的酶或蛋白质,真核生物与原核生物DNA复制特点。5分析在DNA复制时出现错误的修复方式;6了解转座子的分类和结构特征以及大肠杆菌的基因.掌握转座机制和转座效应。主要内容(一)染色体染色

11、体概述;1染色体基本成分:组蛋白,非组蛋白,DNA2染色体基本单位:核小体(二)基因与基因组1.基因与基因组的概念2.基因组和C值矛盾3.真核基因组的结构特征(与原核基因组的比较)4.真核基因组DNA类型:(1)重复序列:单拷贝,中度重复,高度重复(卫星DNA,小卫星DNA,微卫星DNA)(2)核外基因组:线粒体基因组、叶绿体基因组5.原核生物基因组特点(三)DNA的结构 1DNA一、二、三级结构 2DNA变性与复性(四)DNA的复制:1DNA在遗传信息贮存和传递中的功能、实验依据2DNA复制:半保留复制、半不连续复制(五)原核和真核生物DNA的复制特点(六)DNA修复1错配修复2碱基切除修复

12、3核苷酸切除修复4DNA的直接修复5SOS修复;(七)DNA转座1转座子概念2转座子的分类和结构特征3转座的机制和遗传学效应习题一、名词解释1染色体(chromosome)2HMG蛋白(high mobility group protein)3DNA结合蛋白(DNA combines protein)4DNA的复制(DNA replication)5核小体(nucleosome)6连接数(linking number)7扭转数(缠绕数、盘绕数:twisting number)8超螺旋数(writhing number)9DNA的半保留复制(DNA semiconservative replic

13、ation)10复制叉(replicating fork)11复制子(replicon)12型复制( type replication)13滚环型复制(rolling circle replication)14D环复制(D circle replication)15单链结合蛋白(single strand binding protein,SSB蛋白)16DNA的半不连续复制(DNA semi-noncontinuous replication)17解螺旋酶(Helicase)18引物和引发酶(Primase)19DNA修复(DNA repairing)20光修复(light repair)21

14、SOS修复(SOS- repair)22转座子(transposon,Tn)23插入序列(insertionsequence,IS)24复合式转座子(compositetransposon)25转座(transposition)26基因组(genome)27C值(C value)28C值矛盾(C-value paradox)29单拷贝序列(single copy segment,又称非重复序列)30轻度重复序列(slightly repeated segments)31中度重复序列(medium repeated segments)32高度重复序列(high repeated segments

15、)33Kpn家族(Kpn family)34DNA的一级结构(DNA primary structure)35DNA的二级结构(DNA secondary structure)36发夹(hairpan)37回文序列(palindromic sequence)38DNA的高级结构(DNA advanced structure)39变性(denaturation)40增色效应(hyperchromatic)41熔解温度(meiting temperature,Tm)42复性(renaturation)43杂交(hybridization)44前导链(leading strand)45滞后链(lag

16、ging strand)46DNA连接酶(DNA ligase)二、填空题1核酸(DNA和RNA)是一种线性 ,它的基本结构单元是 。核苷酸本身由核苷和 组成。而核苷则由 和 形成。2真核生物的染色体在细胞生活周期的大部分时间里都以染色质的形式存在。染色质是一种纤维状结构,称为 。它是由最基本的单位 串联而成的。这里有一系列的结构等级:DNA和组蛋白构成 ,核小体再绕成一个中空的螺线管成为 ,染色质丝再与许多非组蛋白结合进一步螺旋化形成 。3染色体上的蛋白质主要包括 和 。蛋白是染色体的_,它与DNA组成 。4真核生物的染色体一般有5种主要的组蛋白,分别命名为 、 、 、 和 。在5种组蛋白中

17、, 富含赖氨酸, 富含精氨酸。5非组蛋白主要包括与 和 有关的酶类、与细胞分裂有关的 等。66在染色质中可分为 (euchromatin)和 (heteromatin),它们在细胞中凝聚的时期不同,异染色质是包装成2030nm,不具有转录活性的染色质。异染色质又分为 (constitutive heteromatin)和_(facultative heteromatin)。前者是指在各种细胞中,在整个细胞周期内都处于凝聚状态的染色质,如着丝粒、端粒等。后者是指在某些特定的细胞中,或在一定的发育时期和生理条件下 ,由常染色质变成异染色质。这本身也是真核生物的一种表达调控的途径。7真核细胞DNA序

18、列大致上可分为4类,它们是: ,非重复序列,在基因组中只存在一个拷贝。 ,在基因组中只有210个拷贝,主要是组蛋白和tRNA等基因。 _,这类序列的重复次数在数十到数百次之间。_,卫星DNA,这类DNA只在真核生物中发现,占基因组的1060,由6100个碱基组成,在DNA链上有几百到几百万个拷贝。8DNA的一级结构是指DNA分子中多个 的排列顺序。即数目庞大的_ 碱基的排列顺序。9研究细菌质粒DNA(环状双链DNA)时发现,天然状态下,该DNA以 为主,稍被破坏即出现开环结构,两条链均断裂,则呈 。在电场作用下,相同分子质量的DNA结构不同,迁移率也不同: 。10利福平可以抑制RNA的转录,使

19、细菌无法繁殖。用利福平处理发现: 不能合成,而 能合成。11DNA修复包括 、 、 、 和 。12回复修复是较简单的修复方式,一般都能将DNA修复到原样。它包括 、_ 和 。13腺嘌呤-胸腺嘧啶(A-T)间含有 ;鸟嘌呤-胞嘧啶(G-C)间含有 。14通常情况下,DNA的二级结构分为两大类:一类是右手螺旋的,如 、 、_ 等;另一类是局部的左手螺旋,如 。天然状态下的DNA大多为 。15真核细胞DNA的复制调控是通过: ; 和 。16原核生物的转座子,依组成结构分为以下几类:1) ;2) ;3) ;4) 。17DNA的复性对片段有两个要求: 互补序列的_; 碱基的 ,但不需要完全配对,即不需要

20、两条链完全互补。18促使DNA复性(退火)的条件是:1) ;2) ;3)_可以促进DNA复性(退火)。19解链的DNA溶液在260nm处吸光值A260 ,即核苷酸单链DNA双链DNA,称为 ,反之为 。20真核生物基因组中影响C0t1/2值的参数有:1) ;2) ;3) 。21DNA修复包括3个步骤: 对DNA链上不正常碱基的识别与切除; 对已切除区域的重新合成; 对剩下切口的修补。22大肠杆菌中,任何由于DNA损伤造成的DNA复制障碍都会诱导 的信号,即允许跨过障碍进行复制,给细胞一个生存的机会。23修复是由细菌中的 来完成,此酶能特异性识别紫外线造成的核酸链上相邻 共价结合的 ,并与其结合

21、,这步反应不需要光;结合后如受300600nm波长的光照射,则此酶就被激活,将二聚体分解为两个正常的 ,然后酶从DNA链上释放,DNA恢复正常结构。24能使生物中DNA的碱基顺序发生变化的4种方式是: 、 、_ 和 。25在DNA修复中,胸腺嘧啶二聚体往往是由 链上的相邻胸腺嘧啶间形成的。26光复活酶在起作用时需要光,是因为光提供二聚体裂解反应的 。三、判断题1DNA单链断裂是常见的损伤,其中一部分可仅由DNA连接酶(ligase)参与而完全修复。此酶在各类生物各种细胞中都普遍存在,修复反应容易进行。但双链断裂几乎不能修复。2切除修复是修复DNA损伤最为普遍的方式,对多种DNA损伤包括碱基脱落

22、形成的无碱基位点、嘧啶二聚体、碱基烷基化、单链断裂等都能起修复作用。这种修复方式普遍存在于各种生物细胞中,也是人体细胞主要的DNA修复机制。3大部分天然DNA呈正的超螺旋,即DNA变形的方向与双螺旋解旋的方向相同。4大多数生物体内DNA的复制都以双向等速方式进行。5大肠杆菌染色体DNA复制时,DnaB蛋白是复制起始的关键蛋白,可识别复制起点并与之结合。6大肠杆菌染色体DNA的复制调控是通过复制起点与调节蛋白质的作用。7插入序列对插入点后的基因不产生极性效应。8在DNA合成中负责复制和修复的酶是RNA聚合酶。9非组蛋白染色体蛋白负责30nm纤丝高度有序的压缩。10在核酸双螺旋(如DNA)中形成发

23、夹环结构的频率比单链分子低。发夹结构的产生需要回文序列使双链形成对称的发夹,呈十字结构。11在DNA复制的过程中是碱基发生错配的最主要来源。12单链结合蛋白通过与磷酸骨架结合使DNA单链相互分开,它们离开暴露的碱基,所以那些碱基可以作为DNA合成的模板。13模板链或反义链DNA是指在转录过程中被RNA聚合酶识别并合成个互补的mRNA,这一mRNA是蛋白质合成的模板。14在先导链上DNA沿53方向合成,在后随链上则沿35方向合成。15若大肠杆菌DNA聚合酶缺失了35校正外切核酸酶活性时会使DNA合成时的可靠性增加。16大肠杆菌中的错配校正系统是通过子链上甲基化来区别亲本链和子链的,从而对子链上的

24、错误进行校正修复的。17在大肠杆菌中发现了3种DNA聚合酶,DNA修复时需要DNA聚合酶III。18真核DNA聚合酶和具有35外切核酸酶的活性。19单个碱基改变是DNA损伤的一种形式,它可以由UV照射(如嘧啶二聚体)或加成化合物形成(如烷基化)所引起。20错配修复是基于对复制期间产生的错配的识别。假如识别发生在被重新甲基化的半甲基化的DNA之前,那么修复可能偏向野生型序列(Dam甲基化,MutH,MutSL)。21DNA修复的第一步是由专用于修复过程的酶催化的,下面的步骤由DNA代谢过程中的常用酶位化。22大肠杆菌中SOS反应的最主要作用是通过在原始DNA损伤区附近导入补偿突变来提高细胞存活率

25、。23大肠杆菌的单链结合蛋白通过与糖-磷酸骨架结合并使碱基暴露,从而解开单链上的短发夹结构。24无义突变是由于一种氨基酸的密码子转变成终止密码子,结果使蛋白质链变短。25当溴乙锭存在时,超螺旋结构的DNA分子的浮力密度要低于线状分子。26由于溴乙锭的存在而引起的在CsCl中DNA分子浮力密度的降低,会受(G十C)含量的影响。27在DNA合成中,与2-OH和5-P基团之间形成共价键。28在大肠杆菌中主要参与DNA复制的酶是DNA聚合酶I。29已知DNA聚合酶的共同特性是将底物加到3-OH基团上,需要有模板。30多数核酸酶和聚合酶的活性在加入螯合剂如EDTA后会受到抑制,是因为几乎全部核酸酶活性都

26、需要Ca2。31在DNA复制过程中,解旋酶松开螺旋,ssb蛋白阻止重新形成螺旋,阻止分子内发生碱基配对。32在线状DNA分子中会出现D环复制。33如果环状DNA分子在复制开始前有一条链断裂,同样会出现D环复制。34如果将一段供体DNA片段导入到受体细胞中,若不发生整合作用,通常能在受体细胞中复制。四、选择题(单选或多选)1肺炎球菌在小鼠体内的毒性和T2噬菌体感染大肠杆菌实验证明了遗传物质是:( )(a)RNA(b)反义RNA(c)DNA(d)蛋白质(e)噬菌体2双链RNA中的碱基对有 ( )(a)A-U(b)G-T(c)C-G(d)C-A(e)T-A3不同的核酸分子其解链稳定(Tm)不同,关于

27、Tm的正确说法是 ( )(a)DNA中GC对比例愈高,Tm愈高(b)DNA中AT对比例愈高,Tm愈高(c)核酸愈纯,Tm范围愈大(d)核酸分子愈小,Tm范围愈大(e)Tm较高的核酸,常常是RNA4通常不存在RNA中,也不存在DNA中的碱基是 ( )(a)腺嘌呤(b)黄嘌呤(c)鸟嘌呤(d)胸腺嘧啶(e)尿嘧啶5AUC为异亮氨酸的遗传密码,在tRNA中其相应的反密码应为 ( )(a)GAT(b)TAG(c)GAU(d)UAG(e)LAG6核酸中核苷酸之间的连接方式是 ( )(a)2,3磷酸二酯键(b)3,5磷酸二酯键(c)2,5磷酸二酯键(d)1,5糖苷键(e)氢键7下列关于DNA双螺旋结构模型

28、的叙述,不正确的是 ( )。(a)两股脱氧核苷酸链呈反向平行(b)两股链间存在碱基配对关系(c)螺旋每周包含10对碱基(d)螺旋的螺距为3.4nm(e)DNA形成的均是左手螺旋结构8既有内含子又有外显子的RNA是 ( )(a)rRNA(b)mRNA(c)hnRNA(d)tRNA(e)snRNA9下列关于DNA双螺旋结构模型的叙述正确的是 ( )(a)一条链是左手螺旋,另一条链为右手螺旋(b)由两条完全相同的多核苷酸链绕同一中心轴盘旋成双螺旋(c)A+T与G+C的比值为1(d)A+G与C+T的比值为1(e)两条链的碱基间以共价键相连10下列DNA分子的碱基组成各不相同,解链温度(Tm)最低的是

29、( )(a).DNA中A+T含量占15%(b)DNA中G+C含量占25%(c)DNA中G+C含量占40%(d)DNA中A+T含量占60%(e)DNA中G+C含量占70%11紫外线对DNA的损伤主要是 ( )(a)引起碱基置换(b)导致碱基缺失(c)形成嘧啶二聚物(d)发生碱基插入(e)使磷酸二酯键断裂12DNA变性过程中发生的变化主要是 ( )(a)包括双螺旋的解链(b)与温度无关(c)是可逆的过程(d)磷酸二酯键的断裂(e)包括氢键的断裂13在类似RNA等出现的“二级结构”中,发夹结构的形成是由于 ( )(a)仅仅当两配对区段中所有的碱基均互补时就会发生(b)依赖于A-U含量,因为形成的氢键

30、越少则发生碱基配对所需的能量也越少(c)基于各个片段间的互补,形成反向平行双螺旋(d)同样包括有像G-U这样的不规则碱基配对(e)允许存在几个只有提供过量的自由能才能形成碱基对的碱基14DNA在10nm纤丝(螺线管)中被压缩的倍数是(长度) ( )(a)6倍 (b)10倍 (c)40倍 (d)240倍 (e)l 000 倍15DNA在30nm纤丝(超螺线管)中被压缩的倍数是 ( )(a)6倍(b)10倍(c)40倍(d)240倍(e)l 000倍16DNA在染色体的常染色质区被压缩的倍数是 ( )(a)6倍(b)40倍(c)240倍(d)l000倍(e)10000倍17DNA在中期染色体中被压

31、缩的倍数是 ( )(a) 6倍(b) 40倍(c) 240倍(d) 1000倍(e) l0000倍18组蛋白的净电荷是 ( )(a)正 (b)中性 (c)负 (d)未知19核小体的电性是 ( )(a)正 (b)中性 (c)负 (d)未知20当一个基因具有活性时 ( )(a)启动子一般不带有核小体(b)整个基因一般不带有核小体(c)基因被核小体遮盖,但染色质结构已发生改变,以致于整个基因对核酸酶降解更加敏感(d)整个基因组一般不带有核小体(e)基因被核小体遮盖,染色质结构没有变化。21在DNA复制和修复过程中,修补DNA螺旋上缺口的酶为 ( )(a)DNA拓扑异构酶(b)DNA解旋酶(c)DNA

32、连接酶(d)DNA聚合酶(e)DNA酶22DNA后随链合成的起始要一段短的RNA引物,该引物的合成是以核糖核苷酸为底物,合成时所需的酶为 ( )(a)DNA聚合酶(b)DNA连接酶(c)RNA引发酶(d)DNA引发酶(e)RNA连接酶23下述对于DNA复制的说法正确的有 ( )(a)两条链按完全相同的机制进行(b)按35方向进行(c)按53方向进行(d)需要DNA聚合酶I(e)涉及RNA引物的形成24在大肠杆菌中,复制叉以每秒500个碱基对的速度向前移动进行DNA的复制,那么,为满足这种合成速度,复制叉前的DNA的旋转速度为 ( )(a)100rmin(b)500rmin(c)1 000rmi

33、n(d)2 000rmin(e)3 000rmin25在依赖于DNA的DNA聚合酶所进行的DNA复制过程中,要求有个作为引发物的游离3-OH的存在。获得游离的3-OH的途径有 ( )(a)合成一个RNA引物(b)DNA自我引发的(c)一个末端蛋白通过磷酸二酯键共价结合到一个核苷酸(d)内含子的剪切(e)蛋白质的磷酸化26在细菌的光修复过程中,完成修复所需的酶是 ( )(a)DNA连接酶(b)DNA聚合酶(c)DNA光复活酶(d)DNA外切酶(e)DNA内切酶27大肠杆菌的染色体可以联会,而且可使同源双链DNA彼此配对。这需要 ( )(a)RecA蛋白(b)RecB蛋白(c)RecC蛋白(d)R

34、ecD蛋白(e)RecE蛋白28DNA最普遍的修饰是甲基化。在原核生物中这种修饰的作用是 ( )(a)保护它自身的DNA免受核酸内切限制酶的作用(b)复制之后区分链,以确定是否继续复制(c)识别外来的甲基化的DNA,并将其重组到基因组中(d)识别受损的DNA以便于修复(e)识别转录终止位点以便RNA聚合酶起作用29产生单个碱基变化的突变称为 ( )(a)移码突变(b)野生型突变(c)点突变(d)自发突变(e)致死突变30理论上自发突变是随机发生,并均匀分布于基因组中。然而,精细分析表明,DNA中的某些位点较其他位点更易发生突变。这些“热点”突变是由于 ( )(a)DNA的空间结构选择性地使部分

35、DNA暴露在诱变因子的作用下(b)存在可被进一步修饰(如脱氨基)的已修饰碱基(如甲基化),导致碱基转换并通过复制产生突变(c)被修饰(如甲基化)碱基的存在,易于发生错配复制并因此产生突变(d)DNA中富含A-T区域的存在,使得自发解链及错配碱基的掺入(e)对沉默突变的选择压力很低,因此热点多为密码子第三位的碱基31IS元件的特性主要是 ( )(a)所有IS元件全是相同的(b)具有转座酶基因(c)是旁侧重复序列(d)引起宿主DNA整合复制(e)每代每个元件转座104次32组成转座子的旁侧IS元件可以 ( )(a)同向(b)反向(c)两个都有功能(d)两个都没有功能33复制型转座的特性主要是 (

36、)(a)复制转座子,即在原位点上留有一个拷贝(b)移动元件转到一个新的位点,在原位点上不留元件(c)要求有转座酶(d)要求解离酶(e)涉及保守的复制,在这个过程中转座子序列不发生改变34非复制转座的特性主要是 ( )(a)复制转座子,即在原位点上留有一个拷贝(b)移动元件到一个新的位点,在原位点上不留元件(c)要求有转座酶(d)要求解离酶(e)涉及保守的复制,在这个过程中转座子序列不发生改变35关于A1u序列的描述正确是 ( )(a)所有A1u序列都是相同的(b)A1u序列来源于有翻译功能的7SL RNA(c)A1u序列是靠RNA聚合酶II转录的(d)Alu序列永远不会存在于结构基因中(e)这

37、些序列有一个区段与病毒的DNA复制起点同源36如果缺乏下列酶之一,复制叉上一个核苷酸也加不上去。这种酶是 ( )(a)聚合酶I(聚合活性)(b)聚合酶I(53核酸外切酶活性)(c)聚合酶III(d)DNA连接酶第二章 染色体与DNA一、名词解释1答:细胞核中由DNA、蛋白质和少量RNA组成的易被碱性染料着色的一种丝状或杆状物。1888年瓦尔德第一次提出了染色体这一名词。亲代能够将自己的遗传物质DNA以染色体的形式传给了子代,保持了物种的稳定性和连续性。2答:这是一类能用低盐溶液抽提、能溶于2三氯乙酸、相对分子质量在3.0104以下的非组蛋白。因其在凝胶电泳中迁移速度快而得名。现在一般认为这类蛋

38、白可能与DNA的超螺旋结构有关。3答:只有用2mol/L NaCl和5mol/L尿素才能把这些蛋白从DNA上解离下来的非组蛋白。它们是一些分子质量较低的蛋白质,约占非组蛋白的20,染色质的8。它们与DNA结合比较紧密,可能是一些与DNA的复制或转录有关的酶或调节物质。4答:细胞分裂时,每个子代细胞必须含有同样的遗传信息,即DNA分子必须变成两个同样的分子,这个过程就是DNA的复制。5答:指的是200bp长度的DNA与一组组蛋白构成的致密结构,是构成真核生物染色质的基本单位。 图6答:指环形DNA分子中,一条链以右手螺旋绕另一条链缠绕的次数,以L表示。只要不发生链的断裂,L是个常量。7答:扭转数

39、是指DNA分子中Watson-Crick的螺旋数,以T表示。8答:超螺旋数(writhing number)以W表示。L=T+WDNA分子具有相同的结构,但L值不同,所以称它们为拓扑异构体。拓扑异构酶能够催化它们之间的转换。9答:DNA的复制是分别以亲代DNA链为模板合成两条子代DNA链;在子代DNA双链中,一条是新合成的,一条是亲代的,称为DNA的半保留复制。 图10答:复制时,双链DNA要解开两股链分别进行,所以这个复制起点呈现叉子的形式,称为复制叉。复制正在发生的位点叫复制叉。11答:DNA分子上一个独立的复制单位,包含一个复制起始位点和适当的调控序列的一个DNA分子(或片段)。一个复制

40、子只含有一个复制起点(origin,ori)。原核生物的基因组只有一个复制子,真核生物具有多个复制子。12答:环形DNA大多采用型复制,如E.coli。特点是从原点ori开始,通常采用双向等速复制,不断扩大复制泡,形成环。 图13答:某些环形的病毒DNA,如x174、噬菌体都是以这种方式复制。这是一种单向复制类型。 图14答:双链环在固定点解开进行复制。但两条链的合成是高度不对称的,一条链上迅速合成出互补链,另一条链则成为游离的单链环(D-环)。 图15答:SSB蛋白可牢固地结合在单链DNA上,在原核生物中表现出协同效应,如第一个SSB蛋白结合到DNA上去的能力为1,第二个SSB蛋白结合能力则

41、高达103。SSB蛋白的作用是保证被解链酶解开的单链在复制完成前能保持单链结构,它以四聚体形式存在于复制叉处,待单链复制后才掉下,重新循环。所以,SSB蛋白只保持单链的存在,并不起解链的作用。SSB没有催化功能,它可以特异性地结合在单链区,使之免被核酸酶水解,起到保护和维持单链的作用。16答:在DNA的复制过程中,前导链是连续复制的,而滞后链是通过冈崎片段的连接来合成的,是不连续的,称之为DNA的半不连续复制。 图17答:用于把DNA双链解开形成单链。具有ATPase活性,利用水解ATP释放的能量,催化双链DNA解链。dnaB基因的产物dnaB蛋白是一种解链酶,是一个六聚体蛋白。功能为通过AT

42、P水解驱动dnaB蛋白在复制叉上移动使DNA解旋。大部分解链酶可沿滞后链53方向移动,蛋白沿前导链35方向移动18答:引物是由引发酶合成的,是DNA复制所需的一段RNA序列,引物通常是RNA寡核苷酸而不是DNA。引发酶是dnaG基因的产物,是一个单亚基的多肽,它能重新起始一个新核苷酸链的合成。19答:DNA修复是细胞对DNA受损伤后的一种反应,这种反应可能使DNA结构恢复原样,重新能执行它原来的功能。20答:这是最早发现的DNA修复方式。修复是由细菌中的DNA光复活酶来完成,此酶能特异性识别紫外线造成的核酸链上相邻嘧啶共价结合的二聚体,并与其结合,这步反应不需要光;结合后如受300600nm波

43、长的光照射,则此酶就被激活,将二聚体分解为两个正常的嘧啶单体,然后酶从DNA链上释放,DNA恢复正常结构。后来发现类似的修复酶广泛存在于动植物中,人体细胞中也有发现。 图21答:SOS修复是指DNA受到严重损伤、细胞处于危急状态时所诱导的一种DNA修复方式,修复结果只是能维持基因组的完整性,提高细胞的生成率,但留下的错误较多,故又称为错误倾向修复(error prone repair),使细胞有较高的突变率。 图22答:转座子是存在于染色体DNA上可自主复制和位移的基本单位。23答:插入序列是不含宿主基因的最简单的转座子,它们是细菌染色体或质粒DNA的正常组成部分。IS序列都是可以独立存在的单

44、元,带有介导自身移动的蛋白。插入序列对插入点后的基因产生极性效应。IS除带有编码转座酶的基因外,不带任何其它遗传信息。24答:是由两个重复序列夹着一个或多个结构基因组成的转座单位,往往存在于R因子及其它质粒中。有的复合转座子的重复序列就是IS。IS序列插入到某个功能基因两端时就可能产生复合式转座子。 图除了末端带有IS序列的复合式转座子以外,还存在一些没有IS序列、体积庞大的转座子TnA家族,一般长4 500200 000bp。25答:一个转座子由基因组的一个位置移动到另一个位置的过程称为转座。26答:对于原核生物来说就是它的整个染色体;对于真核生物来说就是一个物种的单倍体的染色体数目。 表2

45、727答:单倍体基因组中的DNA含量。28答:C值指单倍体基因组中的DNA含量。不同物种的C值有很大差异:C值矛盾:在结构和功能相似的物种中,甚至在亲缘关系相近的物种中,C值差异大。与预期的编码蛋白质的基因的数量相比,基因组DNA的含量过多。29.答:在基因组中只有一个拷贝。30答:在基因组中只有2-10个拷贝,主要是组蛋白和tRNA等基因。31答:重复次数在数十到数百次之间。又可分为: 长散在重复序列(long interspersed repeated segments)LINES 短散在重复序列(short interspersed repeated segments)SINESSINE

46、S:长度105,如人Alu序列。LINEs:长度1000bp(可达7Kb),拷贝数104105,如人LINEl。32答:有几百到几百万个拷贝。33答:人类和灵长类DNA经Kpn酶解后,产生4个片段(1.2、1.5、1.8、1.9kb),这些就被命名为Kpn家族。人类基因组中的Kpn序列约在3-6%,也是散在分布的。功能尚不清楚。仅次于Alu家族的第二大家族。34答:指的是DNA分子内4种核苷酸的连接及排列顺序。DNA链的方向总是理解为从5-P端到3-OH端。35答:DNA的二级结构指的是由两条DNA链反向平行盘绕所形成的双螺旋结构。36答:当同一个RNA分子的一段碱基序列附近紧接着一段它的互补

47、序列时,核酸链有可能自身回折配对产生一个反平行的双螺旋结构,叫做发夹(hairpan)。发夹结构由叫做茎的碱基互补配对的双螺旋区域和末端不配对的环构成。37答:双链DNA以相反方向排列的完全相同的序列结构叫做反向重复(reverse repaeat)。反向重复中的序列叫做回文序列(回文)。回文序列是双螺旋DNA中的一段序列,如果按确定的方向读双链中的每一条链的序列都是相同的。38答:指双螺旋DNA本身的进一步盘绕成超螺旋的结构,形成特定的空间结构。39答:DNA双螺旋区的氢键断裂,使双螺旋的两条链完全分开变成单链,链分离的过程叫做变性(denaturation)或熔解。40答:在变性过程中,2

48、60nm紫外线吸收值先缓慢上升,当达到某一温度时骤然上升,称为增色效应。41答:通常把DNA双螺旋失去一半时的温度称为该DNA的熔点或熔解温度42答:变性后的DNA用某种方法处理后,使之重新形成天然DNA的过程叫做复性或退火。复性是一个比较慢的过程。43答:不同来源的两个互补核酸序列通过相互退火形成双螺旋结构。44答:以复制叉向前移动的方向为标准,一条模板链是35走向,在其上DNA以53方向连续合成,称为前导链。45答:另一条模板链是53走向,在其上DNA也是以53方向合成,但是与复制叉移动的方向相反,所以随着复制叉的移动,形成许多不连续的片段,最后连接成一条完整的DNA链,该链称为滞后链。4

49、6答:催化双链DNA切口处的5-磷酸基和3-羟基生成磷酸二酯键。T4连接酶需ATP、大肠杆菌连接酶需NAD做为辅助因子。二、填空题1多聚核苷酸;核苷酸;核苷;磷酸;戊糖;碱基2染色质;染色质丝;核小体;核小体;染色质丝;染色体3组蛋白;非组蛋白;结构蛋白;核小体4H1;H2A;H2B;H3;H4;H1;H3、H45复制;转录;蛋白6常染色质;异染色质;组成性异染色质;兼性异染色质;凝聚7单一拷贝;轻度重复序列;中度重复序列;高度重复序列8脱氧核苷酸;四种9负超螺旋;线性结构;双链环状DNA;线状DNA;开环DNA10先导链;后随链11回复修复;错配修复;切除修复;重组修复;SOS修复12光修复;单链断裂的重接;碱基的直接插入13二个氢键;三个氢键14 B-DNA;A-DNA;C

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