立克次体柯克斯体东方体

1、立克次体、柯克斯体、东方体立克次体（Rickettsia）、东方体（Orientia）、柯克斯体（Coxiella）、埃立克体（Ehrlichia）是一类与节肢动物有密切关系的严格细胞内寄生的细菌，是引起斑疹伤寒、恙虫病、Q热等传染病的病原体。这类病原体的分类、所致疾病和流行环节见表20-1。表20-1 常见立克次体的分类、所致疾病和流行环节属群种所致疾病传播媒介储存宿主立克次体属斑疹伤寒群普氏立克次体（R.prowaxekii）流行性斑疹伤寒人虱人斑疹伤寒立克次体（R.typhii）地方性斑疹伤寒鼠蚤鼠加拿大立克次体（R.Canada）加拿大斑疹伤寒蜱兔斑点热群立氏立克次体（R.ricket

2、tsii）洛杉矶斑点热蜱狗和野鼠等西伯利亚立克次体（R.sibirica）北亚蜱传染斑疹伤寒蜱野兽和鸟东方体属恙虫病群恙虫病东方体（O.tsutsugamushi）恙虫病恙螨野鼠等柯克斯体属贝纳柯克斯体（C.burnetii）Q热蜱野生小动物、牛和羊等埃立克体属犬埃立克体群查非埃立克体（E.chaffeensis）人单核细胞埃立克体病蜱啮齿类腺热埃立克体群腺热埃立克体（E.sennetsu）腺热埃立克体病蜱啮齿类嗜吞噬细胞埃立克体群人粒细胞埃立克体（HGE）人粒细胞埃立克体病蜱人、马和狗立克次体、东方体、柯克斯体、埃立克体属的共同特点是：大多数是人畜共患病的病原体；以节肢动物为宿主和传播媒介，

3、引起人类发热出疹性疾病；体积介于细菌与病毒之间，用光学显微镜可见，形态以球杆状或杆状为主，革兰染色阴性；专性细胞内寄生，因酶系统不够完善又缺乏细胞器，故不能独立生活；以二分裂方式繁殖；含有DNA和RNA两种核酸；对多种抗生素敏感。这类病原所致疾病绝大多数为自然疫源性疾病，动物受染后一般不出现症状。人类因生产劳动、资源开发等偶然遭到嗜血节肢动物的侵袭而受染。流行性斑疹伤寒、地方性斑疹伤寒和Q热在世界各地均有发生；斑点热主要流行于北美和西伯利亚等地区；人粒细胞埃立克体病流行于北美；恙虫病主要流行于东南亚和西南太平洋等地区。我国较常见的立克次体病有流行性斑疹伤寒、地方性斑疹伤寒、恙虫病和Q热等。常见

4、立克次体的主要生物学性状见表20-2。表20-2 常见立克次体的主要生物学性状立克次体种类培养特性二分裂生长分布的位置灭活温度()与时间(分钟)外斐反应普氏立克次体活细胞内增殖分散细胞质内5630OX19OX2OXK斑疹伤寒立克次体活细胞内增殖分散细胞内外5630OX19OX2OXK立氏立克次体活细胞内增殖细胞质和核质区5630OX19OX2OXK恙虫病东方体活细胞内增殖近核处成堆5630OX19OX2OXK贝纳柯克斯体活细胞内增殖吞噬溶酶体内10010OX19OX2OXK 普氏立克次体普氏立克次体（R. prowazekii）是流行性斑疹伤寒（虱传斑疹伤寒或称典型斑疹伤寒）的病原体，用为研究

5、斑疹伤寒而献身的捷克科学家Von prowazek的姓氏命名。流行性斑疹伤寒在世界各地均可发生流行。一、生物学性状（一）形态结构与染色普氏立克次体呈多形态性，以短杆形为主，大小为长0.62.0mm，宽0.30.8mm，在胞质内呈单个或短链状存在（图20-1）。革兰染色阴性，着色较淡。常用Gimnez法染色呈鲜红色，效果好；姬姆萨法染色呈紫色或蓝色；Macchiavello法染色呈红色。图20-1 普氏立克次体（二）结构与抗原构造普氏立克次体与其它立克次体的结构均与革兰阴性菌相似，有细胞壁和细胞膜。细胞壁由肽聚糖、蛋白脂质多糖和外膜组成，其脂质含量高于一般细菌。细胞壁外有脂多糖，外表有多糖组成的

6、微荚膜样粘液层，微荚膜样粘液层具有粘附宿主细胞和抗吞噬的作用，与致病性有关。细胞膜由脂质双层构成，含有大量的磷脂。细胞质中的核糖体由50S和30S大小两种亚基组成，双链DNA构成的核质区位于中央。立克次体细胞壁有两类抗原，一类为群特异性的可溶性抗原，可能是细胞壁的脂多糖成分，耐热；另一类为种特异性抗原，为细胞壁外膜蛋白，不耐热。立克次体的脂多糖成分与变形杆菌某些X株菌体抗原有共同成分（有相同或相似的抗原决定簇），可引起交叉反应。根据这一原理，用易于制备的变形杆菌O抗原代替相应立克次体抗原建立一种非特异性直接凝集实验，称外斐反应（Weil-Felix reaction），用于检测患者体内是否有抗

7、立克次体抗体，以辅助诊断斑疹伤寒、斑点热和恙虫病。（三）培养特性普氏立克次体和绝大多数立克次体为专性活细胞内寄生，只有在活的细胞内才能生长，以二分裂方式繁殖，繁殖一代需要6l0小时，生长缓慢。培养立克次体的方法有动物接种、鸡胚接种和细胞培养。动物接种是最常用的方法，可采用豚鼠和小鼠，多种病原性立克次体在豚鼠和小鼠体内生长繁殖良好。鸡胚卵黄囊接种常用于立克次体的传代培养。目前采用鸡胚成纤维细胞、L929细胞和Vero单层细胞进行分离、鉴定、传代和培养，最适温度为37。（四）抵抗力普氏立克次体对理化因素的抵抗力较弱，对热敏感，56 30分钟可杀死（表20-2），在水溶液中424小时失去活性；耐低温

8、和干燥，在干虱粪中能保持活性两个月左右。0.5%石碳酸和来苏5分钟可灭活。对四环素类和氯霉素类抗生素敏感。磺胺可刺激其增殖。二、致病性与免疫性（一）感染途径普氏立克次体的储存宿主是病人，传播媒介是人虱，病人是惟一的传染源。感染方式是虱人虱人。人虱叮咬病人，立克次体进入人虱体内，在肠管上皮细胞内生长繁殖，破坏肠管上皮细胞，并随粪便排出体外，感染710天后死亡。当感染的人虱叮咬健康人时，立克次体随粪便排泄于人的皮肤上，由于瘙痒而抓伤，立克次体便可侵入人体内致病（图20-2）。由于立克次体的感染性在干燥的虱粪中能保持两个月左右，亦有可能通过呼吸道或球结膜发生感染。人虱 人人虱 人图20-2 流行性斑

9、疹伤寒的传播方式（二）致病物质普氏立克次体的致病物质主要有内毒素和磷脂酶A两类。内毒素的化学成分为脂多糖，具有与肠道杆菌内毒素相似的多种生物学活性。可刺激单核巨噬细胞产生IL-1和TNF-a。IL-1具有致热性，引起发热；TNF-a引起血管内皮细胞损伤、微循环障碍、中毒性休克和DIC等。磷脂酶A能溶解宿主细胞膜或吞噬体膜，有利于立克次体穿入宿主细胞内生长繁殖。此外，微荚膜样粘液层有利于粘附于宿主细胞，并具有抗吞噬作用。（三）所致疾病普氏立克次体所致疾病为流行性斑疹伤寒。当普氏立克次体侵入皮肤后，与局部淋巴组织或小血管内皮细胞表面特异性受体结合而被吞入胞内，依靠磷脂酶A溶解吞噬体膜的甘油磷脂进入

10、细胞质内大量增殖，导致细胞中毒破裂，释放出立克次体，引起第一次立克次体血症。立克次体经血流扩散至全身组织器官的小血管内皮细胞，在其中大量增殖释放入血，导致第二次立克次体血症。普氏立克次体通过磷脂酶A和微荚膜样粘液层对抗宿主的免疫作用，大量增殖破坏宿主细胞。立克次体崩解释放内毒素等毒性物质，形成毒血症。损害血管内皮细胞，造成肿胀和坏死，通透性增强，血浆渗出，有效循环血量下降。其主要病理改变为血管内皮细胞增生，血管壁坏死，血栓形成。造成皮肤、心、肺和脑等血管周围的广泛性病变。流行性斑疹伤寒的潜伏期为1014天，发病急、高热、剧烈头痛和周身疼痛，47天出现皮疹。婴幼儿发病率低，多见成年人感染，50岁

11、以上的人发病率高，60岁以上的患者死亡率高。（四）免疫性普氏立克次体严格细胞内寄生，抗感染以细胞免疫为主，体液免疫为辅。CTL细胞溶解杀伤感染立克次体的血管内皮细胞，THl细胞释放细胞因子IFN-g 增强M的吞噬和杀伤功能；B细胞产生的群和种抗体有促进吞噬细胞的吞噬作用，中和立克次体的感染性和毒性物质。同时，免疫作用也增加了对机体的病理性损害。由于二次立克次体血症，病后获得牢固的免疫力，与斑疹伤寒立克次体的感染有交叉免疫力。三、微生物学检查法普氏立克次体的微生物学检查法主要为分离和鉴定，对临床确诊和流行病学调查有意义。（一）标本采集一般在发病期或急性期尚未用抗生素之前无菌采血以提高阳性分离率。

12、流行病学调查则采取野生小动物、家畜脏器或节肢动物的组织悬液。（二）分离培养由于标本中立克次体含量较低，直接镜检意义不大。可将标本尽快接种在雄性豚鼠的腹腔内，接种后若体温40或阴囊有红肿，表示已发生感染；若无阴囊红肿而体温超过40，可取脾组织接种鸡胚卵黄囊，35孵育数日，如卵黄囊膜涂片查见立克次体可能即为普氏立克次体，并根据形态、细胞内部位及免疫荧光法等进行鉴定。（三）血清学检测常用外斐反应和补体结合试验。外斐反应（变形杆菌OXl9抗原）的滴度1160或恢复期抗体滴度比早期增高4倍者可诊断为斑疹伤寒。但要结合临床症状，以排除外斐反应假阳性。用普氏立克次体可溶性（群特异）抗原进行的补体结合试验可区

13、别斑疹伤寒和其他群的立克次体感染，而要区别普氏与斑疹伤寒立克次体还需用种特异性抗原。（四）分子生物学检测可应用PCR检测或核酸探针检测。四、防治原则（一）预防原则流行性斑疹伤寒的预防主要应改善生活条件，讲究个人卫生，消灭体虱，加强个人防护。特异性预防采用由射线辐射或甲醛处理的灭活鼠肺疫苗和鸡胚疫苗等，可使发病率降低7090%，免疫力可持续一年。（二）治疗原则氯霉素和四环素类抗生素对普氏立克次体和其它立克次体均有效，可缩短病程，降低死亡率。但是，抗生素的作用是有限的，增强机体免疫力，提高细胞免疫功能是治疗的关键。禁用磺胺类药物治疗。斑疹伤寒立克次体斑疹伤寒立克次体（R. typhi）或称莫氏立克

14、次体（R. mooseri）是地方性斑疹伤寒（亦称鼠型斑疹伤寒）的病原体。1931年，Mooser等分别从该疾病流行的墨西哥的鼠脑和美国的鼠虱中分离出来。地方性斑疹伤寒可在世界各地散发，而主要发生在非洲和南美洲。一、生物学性状斑疹伤寒立克次体大小形态同普氏立克次体，但链状排列少见。染色性、结构、抗原构造、培养特性、抵抗力以及易感细胞、易感动物方面与普氏立克次体相同，只是斑疹伤寒立克次体所致的豚鼠阴囊反应比普氏立克次体引起的更强。二、致病性和免疫性（一）感染途径斑疹伤寒立克次体的主要储存宿主是鼠，主要传播媒介是鼠蚤和鼠虱，感染的自然周期是鼠蚤鼠。立克次体长期寄生于隐性感染鼠体，鼠蚤吸疫鼠血后，立

15、克次体进入其消化道并在肠上皮细胞内繁殖，细胞破裂后将立克次体释出，混入蚤粪中，在鼠群间传播。鼠蚤只在鼠死亡后才离开鼠转向叮吮人血，而使人受感染。此外，带有立克次体的干燥蚤粪还可经口、鼻及眼结膜进入人体而致病（图20-3）。 鼠 人 鼠蚤 鼠蚤 鼠蚤 鼠 图20-3 斑疹伤寒立克次体的传播方式（二）所致疾病致病物质同普氏立克次体，所致疾病为地方性斑疹伤寒，其临床症状与流行性斑疹伤寒相似，但发病缓慢，常经过812天的潜伏期后出现发热和皮疹，病情较轻，很少累及中枢神经系统和心肌，病死率低于1%。（三）免疫性斑疹伤寒立克次体严格细胞内寄生，以细胞免疫为主，体液免疫为辅。可出现二次立克次体血症，病愈后能

16、获得牢固的免疫力，与普氏立克次体的感染有交叉免疫力。三、微生物学检查法接种雄性豚鼠腹腔，若有斑疹伤寒立克次体的感染可出现发热，同时伴有明显的阴囊红肿和鞘膜反应（Neill-Mooser reaction）。余同普氏立克次体。四、防治原则预防措施主要是要改善居住条件，提高民族素质，讲究个人卫生，灭虱、灭蚤和灭鼠。接种疫苗。治疗原则同流行性斑疹伤寒。 恙虫病东方体恙虫病东方体（O.tsutsugamushi）是恙虫病的病原体。国外最早系日本人于1810年首先描述本病。1927年日本学者绪方规雄等用病人血液注射家兔睾丸内，经56次传代后，阴囊红肿，取其涂片染色发现。1948年我国国内（广州）分离出恙

17、虫病东方体。该病主要流行于东南亚、西南太平洋岛屿、日本和我国的东南与西南地区。一、生物学性状（一）形态、染色与结构呈双球或短杆状，多成对排列，平均长度为1.2mm，很少超过1.5mm。Gimnez法染色呈暗红色；革兰染色法、姬姆萨染色法和Macchiavello染色法其染色特性与普氏立克次体相同。细胞壁的结构和抗原成分不同于其它立克次体，无粘液层，无微荚膜，无肽聚糖和脂多糖，与变形杆菌OXK有交叉抗原。故恙虫病立克次体现另立为东方体属。（二）培养特性小鼠易感，可在鸡胚卵黄囊和细胞培养中生长。常用的原代细胞有地鼠肾细胞、睾丸细胞等，传代细胞有HeLa、L929等。（三）抵抗力在外环境中的抵抗力较

18、其它立克次体为低，低温可长期保存，-20能存活5周，5610分钟即被杀灭；3723小时后，其活力大为下降；对一般消毒剂极为敏感。二、致病性与免疫性（一）感染途径恙虫病是一种自然疫源性疾病，主要流行于啮齿动物之间。野鼠和家鼠感染后多无症状，但体内长期保留病原体，故为主要传染源。此外，兔类、鸟类等也能感染或携带恙螨而成为传染源。恙螨是恙虫病东方体的寄生宿主、储存宿主和传播媒介，立克次体寄居在恙螨体内，可经卵传代，并借助于恙螨的叮咬在鼠间传播。（二）所致疾病所致疾病为恙虫病。人若被恙螨叮咬后，经710天或更长的潜伏期，突然发病，高热，剧烈头痛，可出现耳聋。于叮咬处出现红斑样皮疹，形成水疱，破裂后发生

19、溃疡，周围红润，上覆黑色痂皮（称为焦痂），是恙虫病的特征之一。病原体在宿主细胞内繁殖，多在细胞质近核处成堆排列，然后通过出芽方式释放，经淋巴系统入血循环，产生东方体血症。病原体释出的毒素，可引起发热、皮疹、全身淋巴结肿大及各内脏器官的病变。（三）免疫性以细胞免疫为主，病后获得较持久的免疫力。三、微生物学检查法（一）病原体分离取急性期病人血液接于小鼠腹腔，濒死时取腹膜或脾脏作涂片，经姬姆萨染色或荧光抗体染色镜检。（二）血清学检查 1外斐反应 病人单份血清对变形杆菌OXk凝集效价在1160以上或早晚期双份血清效价呈4倍增长者有诊断意义。最早第4天出现阳性，34周达高峰，5周后下降。2补体结合试验

20、应用当地代表株或多价抗原，特异性高，抗体持续时间长，可达5年左右。效价110为阳性。3间接免疫荧光试验 测定血清抗体，于起病第1周末出现抗体，第2周末达高峰，阳性率高于外斐反应，抗体可持续10年，对流行病学调查意义较大。四、防治原则在流行区要加强个人防护，防止恙螨幼虫叮咬，灭鼠除草，加快疫苗研制。治疗同普氏立克次体。 贝纳柯克斯体贝纳柯克斯体（C.burnetii）亦称Q热柯克斯体，是Q热（query fever）的病原体。Q热即疑问热，指原因不明的发热。1937年，Burnet等证明其病原体是一种立克次体，命名为贝纳柯克斯体。Q热流行于世界各地。一、生物学性状（一）形态与染色贝纳柯克斯体呈高度多形性，球杆形或短杆形，甚至球形。大小为长0.21.0mm ，宽0.20.4mm，是目前发现的最小的立克次体。革兰染色多为阴性，其他染色特性同普氏立克次体。鸡胚卵黄囊中生长旺盛，能在多种细胞中繁殖。（二）基因组特征贝纳柯克斯体基因组分子量为1.04109，含1.6106bp，约为大肠埃希菌的1/3。近年来已分离其基因达13个之多，分别与编码立克次体代谢酶有关（如PyrB、gitA、sdhCDAB基因），或与编码表面抗原有关（chtpA、tpB、ComI基因），或与编码毒力因子有关（Sod、Mucz、CbbE、Cbmip、dnaJ、qrsA基因）。此外，还发现贝纳柯克斯体带有