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文档简介
1、植物细胞工程与植物的组织培养技术1 2014北京卷 在25 的实验条件下可顺利完成的是()A光合色素的提取与分离 B用斐林试剂鉴定还原糖C大鼠神经细胞的培养 D制备用于植物组织培养的固体培养基2 2014广东卷 铁皮石斛是我国名贵中药,生物碱是其有效成分之一。应用组织培养技术培养铁皮石斛拟原球茎(简称PLBs,类似愈伤组织)生产生物碱的实验流程如下:在固体培养基上,PLBs的重量、生物碱含量随增殖培养时间的变化如图所示,请回答下列问题:(1)选用新生营养芽为外植体的原因是_,诱导外植体形成PLBs的过程称_。(2)与黑暗条件下相比,PLBs在光照条件下生长的优势体现在_,_,_。(3)脱落酸(
2、ABA)能提高生物碱含量,但会抑制PLBs的生长。若采用液体培养,推测添加适量的ABA可提高生物碱产量。同学们拟开展探究实验验证该推测,在设计实验方案时探讨了以下问题:ABA的浓度梯度设置和添加方式:设4个ABA处理组,1个空白对照组,3次重复。因ABA受热易分解,故一定浓度的无菌ABA母液应在各组液体培养基_后按比例加入。实验进程和取样:实验50天完成,每10天取样,将样品(PLBs)称重(g/瓶)后再测定生物碱含量。如初始(第0天)数据已知,实验过程中还需测定的样品数为_。依所测定数据确定适宜的ABA浓度和培养时间:当某3个样品(重复样)的_时,其对应的ABA浓度为适宜浓度,对应的培养时间
3、是适应培养时间。3、2014江苏卷 为了获得植物次生代谢产物,先用植物外植体获得愈伤组织,然后在液体培养基中悬浮培养。请回答下列问题:(1)外植体经诱导后形成愈伤组织的过程称为_。(2)在愈伤组织悬浮培养时,细胞干重、蔗糖浓度和pH的变化如图所示。细胞干重在12 d后下降的原因有_;培养液中蔗糖的作用是_、_。(3)多倍体愈伤组织细胞产生的次生代谢产物量常高于二倍体。二倍体愈伤组织细胞经_处理,会产生染色体加倍的细胞。为检测愈伤组织细胞染色体数目,压片前常用纤维素酶和_酶解离愈伤组织。若愈伤组织细胞(2n)经诱导处理后,观察到染色体数为8n的细胞。合理的解释是_、_。动物细胞工程与单克隆抗体4
4、2014天津卷 为达到相应目的,必须通过分子检测的是()A携带链霉素抗性基因受体菌的筛选 B产生抗人白细胞介素8抗体的杂交瘤细胞的筛选C转基因抗虫棉植株抗虫效果的鉴定 D21三体综合征的诊断5 2014浙江卷 下列关于动物细胞培养的叙述,正确的是()A连续细胞系的细胞大多具有正常的二倍体核型 B某些癌细胞在合适条件下能逆转为正常细胞C由多个祖细胞培养形成的细胞群为一个克隆 D未经克隆化培养的细胞系细胞具有相同的性状6、2014新课标全国卷某研究者用抗原(A)分别免疫3只同种小鼠(X、Y和Z),每只小鼠免疫5次,每次免疫一周后测定各小鼠血清抗体的效价(能检测出抗原抗体反应的血清最大稀释倍数),结
5、果如下图所示。若要制备杂交瘤细胞,需取免疫后小鼠的B淋巴细胞(染色体数目40条),并将该细胞与体外培养的小鼠骨髓瘤细胞(染色体数目60条)按一定比例加入试管中,再加入聚乙二醇诱导细胞融合,经筛选培养及抗体检测,得到不断分泌抗A抗体的杂交瘤细胞。回答下列问题:(1)制备融合所需的B淋巴细胞时,所用免疫小鼠的血清抗体效价需达到16000以上,则小鼠最少需要经过_次免疫后才能有符合要求的。达到要求后的X、Y、Z这3只免疫小鼠中,最适合用于制备B淋巴细胞的是_小鼠,理由是_。(2)细胞融合实验完成后,融合体系中除含有未融合的细胞和杂交瘤细胞外,可能还有_,体系中出现多种类型细胞的原因是_。(3)杂交瘤
6、细胞中有_个细胞核,染色体数目最多是_条。(4)未融合的B淋巴细胞经多次传代培养后都不能存活,原因是_。答案及详细解析:1A2(1)细胞分化程度低,容易诱导形成PLBs细胞的脱分化 (2)生长起始较快快速生长时间较长PLBs产量较高 (3)灭菌、冷却75PLBs重量和生物碱含量乘积的平均值最大解析 (2)据图可知,与黑暗条件下相比,PLBs在光照条件下的重量高,其生长的优势体现在光照有利于生长起始较快、快速生长时间较长、PLBs产量较高。(3)由于ABA受热易分解,所以各种液体培养基灭菌并冷却后才能按比例加入一定浓度的无菌ABA母液。分析图解可知,4个ABA处理组,1个空白对照组,共5组,50
7、天每10天取样,需要取样5次,3次重复,即55375。故实验过程中还需测定的样品数为75。PLBs(类似愈伤组织)重量与生物碱含量呈正相关,故当某3个样品(重复样)的生物碱平均含量最大时,即PLBs重量和生物碱含量乘积的平均值最大时,其对应的ABA浓度为适宜浓度,对应的培养时间是适宜培养时间。3. (1)脱分化(2)蔗糖浓度下降,pH 降低提供能源调节渗透压(3)秋水仙素(低温)果胶经加倍到4n的细胞处于有丝分裂后期经加倍到8n 的细胞处于有丝分裂中期(4)4B解析 可通过将受体菌接种在含链霉素的培养基中筛选携带链霉素抗性基因的受体菌,A项错误。抗人白细胞介素8抗体的杂交瘤细胞应通过抗原抗体杂
8、交技术筛选产生,B项正确。在棉花田中人工放入害虫可检验转基因抗虫棉的抗虫效果,C项错误。可利用显微镜检测21三体综合征患者的染色体组成,D项错误。5B解析 本题考查的是动物细胞培养的过程。连续细胞系被认为是发生了转化的细胞系,大多数具有异倍体核型,A项错误。一般来说,癌细胞是不能逆转为正常细胞的,但在一些因素(如放射治疗)的作用下可使癌细胞恢复为正常细胞,B项正确。细胞克隆的基本要求是来源于单个细胞(一个共同的祖细胞),不能来自多个细胞,C项错误。未经克隆化培养的细胞系细胞具有异质性,所以不是都具有相同的性状,D项错误。6(1)四YY小鼠的血清抗体效价最高 (2)B淋巴细胞相互融合形成的细胞、骨髓瘤细胞相互融合形成的细胞细胞融合是随机的,且融合率达不到100% (3)1100 (4)不能无限增殖 解析 (1)据图分析,第四次免疫后小鼠Y的血清抗体效价达到 16000 以上。达到要求后的 X、Y、Z 这3只小鼠中,小鼠 Y 的 B 淋巴细胞产生抗体效价最高,最适合用于制备单克隆抗体。 (3)杂交瘤细胞形成后,由于核膜具
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