血清效价滴定操作规程_第1页
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血清效价滴定操作规程_第3页
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文档简介

1、血清效价滴定操作规程文件编号XN-XK-SXK-005第 二 版 共3页生效日期 年 月 日编写者：审批者： 复审人：复审日期：医务科保管者： （签名）检验科主任： （签名）输血科： （签名）1. 目的抗体效价测定主要用于鉴定标准血清效价、患者血清抗体检测、血清试剂的稀释及室内质量控制等。2. 原理将被检抗血清用生理盐水作倍比稀释，加入一定量的抗原红细胞，观察凝集强度。以抗体稀释后能与抗原红细胞出现肉眼明显可见凝集的最高血清稀释倍数的倒数来表示抗体的效价。3. 操作步骤3.1. 取清洁干燥小试管10支，每管各加生理盐水0.2 ml。3.2. 第1管加被检血清0.2ml，用吸管将第1管溶液吸放3

2、次，使之混匀，吸0.2ml至第2管，依次连续稀释至第9管，混匀后弃去0.2ml。第10管不加血清，作为盐水对照。3.3. 每管加入相应2红细胞悬液0.2ml。3.4. 将试管架振摇使混和，置15C20 C室温1h（或1000r/min离心1min），用肉眼观察结果，成弱凝集反应的最高稀释倍数的倒数即为该抗体的效价。对照管应无凝集现象。 4. 结果判断4.1. 一般盐水凝集试验可立即观察，或置室温一小时观察结果。4.2. 冷凝集素效价要置4冰箱一小时观查结果。4.3. 若出现低稀释凝集强度比比高稀释强度要强，说明有前带现象发生。4.4. 对一份血清重复滴定，结果可能不一样，如果只有一个稀释度的差

3、别，是正常误差范围。5. 注意事项5.1. 稀释操作是要准确，避免稀释不匀出现跳管现象。5.2. 离心后试管内上清夜出现溶血外观表明不仅有抗原抗体反应，而且有补体激活，有重要临床意义。5.3. 稀释液的容量越小，可能产生的误差越大。如果可能，可以增加稀释容量。5.4. 如果一中血清分别和几种红细胞作用，要将血清做稀释，然后分别取相同的量到几个试管中，以减少误差。5.5. 应以效价和积分评价血清抗体的质和量。红细胞凝集强度与积分见表1-1；6. 正常范围抗A效价应不低于128，抗B效价不低于64。表1-1 红细胞凝集强度红细胞凝集强度积分 4+ 12 3+ 10 2+ 8 1+ 5 或w+ 2

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