组培复习资料

1、植物组织培养复习资料一、名词解释。（每个3分，共24分）、植物组织培养：在无菌和人工控制的环境条件下，利用适当的培养基，对离体的植物器官、组织、细胞及原生质体进行培养，使其再生细胞或发育成完整植株的技术。又称植物离体培养。、细胞的全能性：指植物体的任何一个有完整细胞核的活细胞都具有该植物的全套遗传基因和产生完整植株的潜在能力。3、脱分化：离体培养条件下生长的器官、组织、细胞，经过细胞分裂或不分裂而恢复分生状态，形成无组织结构的细胞团或愈伤组织或成为未分化细胞特性的细胞过程。4、外植体：从活体植物上切取下来，用以进行离体培养的那部分组织或器官。5、单细胞培养：对分离的到的单个细胞进行培养，诱导其

2、分裂增殖，形成细胞团，再通过细胞分化形成芽、根等器官或胚状体，直至长成完整植株的技术。6、胚状体：亦称体细胞胚。指在组培过程中，由植物体细胞所形成的类似于合子胚的结构。它具有根、茎结构，能够一次性形成再生植株。7、平板培养：是将悬浮培养的细胞接种到未固化的薄层培养基中，使其与培养基充分配合，再倒入培养皿中进行培养的方法。8、人工种子：指植物离体培养中产生的胚状体或不定芽，被包裹在含有养分和保护功能的人工胚乳和人工种皮中，从而形成能发芽出苗的颗粒状。9、次生代谢产物：指植物生长发育正常运行的非必需的小分子有机化合物，其产生和分布通常有种属、器官、组织以及生长发育时期的特异性。10、再分化：细胞经

3、过脱分化形成的愈伤组织再次分化，进行器官形成，产丛生芽或胚状体，形成完整植株的过程。11、无病毒苗:指不含该种植物主要危害病毒的苗木。二、不定项选择1、培养室里的湿度一般保持在_C_.A3040%；B5060%；C7080%；D8090%2.下列不属于生长素类的植物激素是_AD_。AKt；BIAA；CNAA；DZT3.影响培养基凝固程度因素有_ABCD_.A琼脂的质量好坏；B高压灭菌的时间；C高压灭菌的温度；D培养基的PH4.活性炭在组织培养中的作用有_ABC_。A吸附有毒物质；B减少褐变，防止玻璃化；C创造黑暗环境，增加培养基的通透性，利于根的生长；D增加培养基中的养分；5.下列具有细胞全能

4、性的细胞是：_ABCD_。A成熟的老细胞；B幼嫩的组织细胞；C愈伤组织细胞D番茄的受精合子6.第一次提出植物细胞具有全能性的理论概念的科学家是_B_：.AMorel；BHaberland；CSchleiden；DWhite7.下列培养基中_C_无机盐的浓度最低。AMS培养基；BB5培养基；CWhite培养基；N6培养基8.高温易被破坏分解的植物激素是_ACD_。AIAA生长素；BGA赤霉素；CNAA萘乙酸；DZt玉米素-细胞分裂素9.从单个细胞或一块外植体形成典型的愈伤组织，大致经历_ACD_三个时期。A诱导期；B潜伏期；C分化期；D分裂期10.下列实验中可能获得单倍体植株的是_BCD_。A小

5、麦的茎尖培养；B番茄花药培养；C玉米胚乳培养；D玉米花粉培养11.下列不属于细胞分裂素类的植物激素是_B_。A6-BA细胞分裂素类；BNAA；CZt；DKt激动素12.植物组织培养的特点是_ABCD_：A培养条件可人为控制；B生长周期短，繁殖率高；C管理方便；D离体14、下列不属于大量元素的盐是_C_。ANH4NO3；BKNO3；CZnSO4.7H2O；DMgSO4.7H2O15.下面属于处于愈伤组织分裂期的特征是_ABCD_。A细胞分裂加快B正在分裂的细胞体积小，内无液泡C细胞的核和核仁增至最大D细胞中的RNA含量减少。16.在原生质体的培养中，渗透稳定剂的作用是：A稳定原生质体的形态而不使

6、其被破坏B支持作用C提供营养D调节PH值17.能打破种子休眠，促进种子、块茎、鳞茎等提前萌发的激素是：ABAGA；BIAA；CNAA；DZt18.在组培条件下，花粉的发育大致有下列几种途径：A营养细胞发育途径B生殖细胞发育途径C营养细胞和生殖细胞同时发育途径D花粉的均等分裂19.同一植株下列_B_D_部位病毒的含量最低A叶片细胞；B茎尖生长点细胞；C茎节细胞；D根尖生长点细胞20.第一次提出植物细胞具有全能性的理论概念的科学家是_B_：.AMorel；BHaberland；CSchleiden；DWhite21.脱落酸（ABA）需要用_C_法灭菌。A灼烧灭菌；B干热灭菌；C过滤灭菌；D高压湿热

7、灭菌；24.原生质体纯化步骤大致有如下几步：将收集到的滤液离心，转速以将原生质体沉淀而碎片等仍悬浮在上清液中为准，一般以500rmin离心15min。用吸管谨慎地吸去上清液。将离心下来的原生质体重新悬浮在洗液中(除不含酶外，其他成分和酶液相同)，再次离心，去上清液，如此重复三次。将原生质体混合液经筛孔大小为40100um的滤网过滤，以除去未消化的细胞团块和筛管、导管等杂质，收集滤液。用培养基清洗一次，最后用培养基将原生质调到一定密度进行培养。一般原生质体的培养密度为104106ml。正确的操作步骤是：ABCD25.下列不属于生长素类的植物激素是_AD_.AKtBIAACNAADABA26.玉米

8、素（ZT）需要用_C_法灭菌.A灼烧灭菌B干热灭菌C过滤灭菌D高压湿热灭菌27.下列实验中可能获得三倍体植株的是_C_:A小麦的茎尖培养；B番茄花药培养C玉米胚乳培养；D玉米花粉培养；28、超净工作台是以（A）吸附微生物的方式达到净化效果。A、 过滤器B、紫外灯C、日光灯D、酒精灯三、填空题（每空1分，共20分）1、植物组织培养按培养对象分为_组织培养_、_器官培养_、_胚胎培养_、_细胞培养_、_原生质体培养_等几种类型.2、在分离原生质体的酶溶液内，需要加入一定量的_Cacl22H2O和葡聚糖硫酸钾_其作用是保持原生质体膜的稳定，避免破裂.3.1902年德国植物生理学家Haberlandt

9、第一次提出植物_细胞全能性_的理论概念；1943年White提出植物细胞“_全能性_”学说，并出版了植物组织培养手册，从而使植物组织培养成为一门新兴的学科。4、用烘箱迅速干燥洗净后的玻璃器皿时温度可以设在_80_，而若用它高温干燥灭菌则需在_150_的温度下1-3小时；烘干植物材料的温度是_60_.5.细胞全能性是指植物的每个细胞都具有该植物的_全部遗传信息_和_发育成完整植株的潜在_的能力。6.1962年，Murashige和Skoog为培养烟草花叶细胞设计了_MS_培养基，其特点是_无机盐_浓度较高，且为较稳定的_。7、6-BA/NAA的高低决定了外植体的发育方向，比值低时促进_根_的生长

10、，这时_脱分化_占主导地位；比值高促进_芽_的生长，这时_分化_占主导地位.8.1962年印度Guha等人成功地培养毛叶曼陀罗花药获得_单倍体植株_，这促进了花药和花粉培养的研究。9.在组织培养中，不耐热的物质用_过滤_法灭菌，而培养基常用_湿热灭菌_法灭菌.10、在组织培养中，非洲菊是靠_从生芽_的方式进行繁殖的，而蝴蝶兰是以_原球茎_的方式进行快繁的。11.一个已停止分裂的成熟细胞转变为_分化_状态，并形成_无分化的愈伤组织的现象称为脱分化。12.在通过微茎尖培养脱毒时，外植体的大小应以成苗率和脱毒率综合确定，一般以_0.3-0.5_mm、带_1-2_个叶原基为好。12.在通过微茎尖培养脱

11、毒时，外植体的大小应以成苗率和脱毒率综合确定，一般以_0.3-0.5_mm、带_1-2_个叶原基为好。13.进行植物组织培养最基本的前提条件是_无菌_。14.植物组织培养按培养过程中是否需要光，可分为_光_培养和_暗_培养。15、组织培养中有三大不易解决的问题，它们分别是_污染_、_褐化_、_玻璃化。16.White培养基_无机盐_浓度低，适合生根培养。17.在无毒苗的组织培养中，外植体的大小与其成活率成_正比_，而与脱毒效果成反比。18.原生质体的分离有_机械法_和_酶解法_两种方法。19.茎尖培养根据培养目的和取材大小可分为_普通茎尖_培养和_茎尖分生组织_培养两种类型。20、愈伤组织的形

12、态发生有_器官形态建成_和_体胎形态建成_两种情况21.植物组织培养按培养的方式分为_液体_培养和_固体_培养。22.1960年，英国学者Cocking用_真菌纤维素酶_分离原生质体成功，从而创新原生质体的培养技术。23、大多数植物组织培养的适宜温度范围是_23_-27_，培养基的PH值范_5.6-5.8_.24.在组织培养中，ZT和GA必须用_过滤_法灭菌，而接种室空间采用_甲醛薰蒸_或_紫外线照射_法灭菌.25.不同的灭菌剂其灭菌的机理一般不一样，次氯酸钙和次氯酸钠都是利用分解产生_ClO-_来杀菌的；升汞是靠_重金属离子_来达到灭菌目的。26.幼胚培养时，其发育过程有_早熟萌发_、_胚性

13、发育_、_形成愈伤_三种方式。27.由胚乳培养可以获得_单_倍体植株，经秋水仙素处理可以获得_二_倍体植株.28.去除植物病毒的主要方法是_理化法_和_组培法_两种方法，当把二者结合起来脱毒效果最好.29.原生质体的融合可实现_体细胞_的杂交，其融合的方式分为_自然融合_和_人工诱导_两类.30、花药培养是_器官_培养，花粉培养属于_细胞_培养，但二者的培养目的一样，都是要诱导花粉细胞发育成单倍体细胞，最后发育成_单倍体植株_。31、植物的胚胎培养，包括_幼胚_培养、_成熟胚_培养、_胚乳_培养、_胚珠_培养以及子房的培养。32、组织培养的特点是：_离体_和_无菌_。四、判断题（对的画“”；错

14、题画“”。）1、一个已分化的细胞若要表现其全能性，首先要经历脱分化过程。2、由胚乳培养获得的三倍体植株，也一定要进行染色体倍数的检查.3.一般来说，光照强度较强，幼苗容易徒长，而光照强度较弱幼苗生长的粗壮。4、经过花药培养所获得的植株都是单倍体。5、幼年细胞和组织比成年细胞和组织诱导愈伤组织容易.6一般的说，PH值高于6.5时，培养基全变硬；低于5时，琼脂不能很好地凝7.在配制6-BA母液时，要先加少量的1mol的HCl溶解，再加蒸馏水定容。8.在配制NAA母液时，要先加少量的1mol的HCl溶解，再加蒸馏水定容。9、2，4-D可用01molL的NaOH或KOH助溶，而后加无菌水定容。10、

15、未成熟胚较小、较嫩、颜色浅，不易培养；成熟胚较大、较硬、颜色较深，易培养.11.花器脱分化比茎叶容易；幼嫩的组织比成熟的老组织脱分化难。12、通过子房的培养，即可能得到单倍体植株，又可能得到二倍体植株.13. 环境的相对湿度过低会使培养基丧失大量水分，湿度过高时，易引起棉塞长霉，造成污染。14、 由性细胞发育而成的胚叫做胚状体，而由体细胞发育而成的胚叫做合子胚.15. 二倍体细胞比单倍体细胞容易诱导愈伤组织.16、在MS的培养基成分中，MgSO4.7H2O属于微量元素.17.固体培养基可加进活性炭来增加通气度，以利于发根。18、用于外植体、手、超净台等的表面消毒酒精浓度越大，消毒效果越好越好.

16、五、简答题（每题5分，共30分）1、植物组织培养技术主要包括哪些环节?各环节的主要工作内容是什么?答：（1）培养基配置技术：包括培养基的选择、母液配制、培养基配制、培养基灭菌。（2）培养材料制备灭菌技术：供体植物材料选择、外植体的选择和处理。（3）无菌接种技术：包括接种室的消毒、工作人员用工作服、口罩等的消毒、超净工作台的清洁与杀菌、操作工具的灭菌。（4）培养技术：主要是培养条件的控制，包括温度、光照、湿度等各种物理环境条件及培养基组成、PH、渗透压等各种化学环境条件。2、培养基、培养器皿和植物材料通常怎样灭菌?答：（1）培养基一般采用湿热灭菌，如果培养基中的有些成分高温易分解，则可采用过滤灭

17、菌。（2）培养器皿可采用湿热灭菌或干热灭菌。（3）植物材料一般采用药剂浸泡灭菌，具体操作如下：A）外植体的预处理，对植物组织进行修整，去掉不需要的部分，并将外植体用流水冲洗干净。B）用70%的酒精浸润材料30s左右。C）用灭菌剂浸泡灭菌，灭菌时不时搅动，使植物材料与灭菌剂有良好的接触，若灭菌过程中加入数滴吐温，则灭菌效果更好。D）植物材料用无菌水冲洗3-5次，以除去灭菌剂。3、简述酶法分离原生质体的步骤.答：叶片表面消毒去除表皮，将叶片切成小块叶碎片放入含有酶和渗透压稳定剂的溶液中摇床保温培养原生质体沉到培养皿底部除去酶溶液将原生质体移入CPW清洗离心清洗基质两次重悬浮于培养基4、简述人工种子

18、生产步骤？答：选取目标植物从适合的外植体上诱导愈伤组织将愈伤组织转移到液体培养基愈伤组织在液体培养基中增生扩大愈伤组织转移至无激素培养基产生体细胞胚包裹人工种皮炼苗温室（大棚）播种获得目标植物5、愈伤组织的形态发生有哪两种情况?并比较各自由此形成完整植株的不同。答：（1）愈伤组织的形态发生可通过两种途径实现，一种是根芽器官直接分化形成植株，即器官发生途径；另一种是产生具胚芽、胚根的胚状体结构再形成植株，即体细胞胚胎发生途径。（2）在器官发生途径中，芽或芽原基起源于培养组织中比较表层的细胞，即外起源，而根原基则发生于组织较深处，呈现单向极性，所形成植株的维管组织与外植体的维管组织联在一起。而在胚

19、状体发生途径中，绝大多数体细胞胚起源于单细胞，形成的胚状体有双极性，维管组织与外植体没有联系。6、NAA的中文名称是什么？有何作用和特点？答：NAA的中文名称叫萘乙酸，是一种人工合成的生长调节物质。其在植物体内有促使茎和节间伸长、向性运动、顶端优势、器官脱落和生根的作用。在组织培养中NAA被用于诱导细胞的分裂和根的分化，并能与细胞分裂素互作促进茎芽的增殖。6、 论述题：（每题10分，共20分）1.请你设计一个组培实验室，说明你设计组培实验室各分室的作用及其所需主要仪器设备。答：（1）准备室：水槽、冰箱、药品柜、天平、灭菌锅、干燥箱、蒸馏水发生器、酸度计、电磁炉、药品。（2）无菌操作室：超净工作台、紫外灯及接种用的酒精灯、镊子、剪刀、手术刀、接种针、过滤灭菌器、70%及95%酒精、试管架、载物台。（3）培养室：分层培养架、日光灯、自动计时器、温度计、湿度计、空调、加热器、制冷机、恒温恒湿机、除湿机等。（4）温室：育苗盘、营养袋、培养槽、花盆等培养装置，草炭、花风岩、珍珠岩、沙、土等基质，及有机或无机肥料、喷壶等洒水装置。2、现在需要你配制2升胡萝卜肉质根愈伤组织诱导培养基，其配方为MS2.4-D2mg/LKT0.2mg/L蔗糖3%琼脂0.7%，请你阐述培养基的配制和分装