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文档简介
1、实验四 影响酶活性的因素,一、实验目的,观察淀粉在水解过程中遇碘后溶液颜色的变化。观察不同底物、温度、pH、激活剂与抑制剂对唾液淀粉酶活性的影响,二、原理,影响酶活性的因素包括:底物类型、酶浓度、底物浓度、产物浓度、抑制剂、激活剂、pH值、温度等 淀粉在淀粉酶的作用下被降解成单糖,这种降解过程是逐步进行的,降解的中间产物遇碘曾现不同的颜色: 淀粉 红色糊精 无色糊精 麦芽糖 葡萄糖 (紫蓝色)(红色) (无色) 所以根据水解液和碘反应的颜色,可以判断水解是否已完全,三、试剂和器材,1. 试剂 新鲜唾液稀释液、1%蔗糖溶液、Benedict试剂、0.5%淀粉、含0.3%NaCl的0.5%淀粉溶液
2、、 5氯化钠溶液、0.1硫酸铜溶液、 0.2 mol/L磷酸氢二钠溶液、柠檬酸钠溶液、KI-I2溶液 2. 器材 恒温水浴锅、冰箱、电磁炉,四、操作方法,1. 唾液淀粉酶液的准备:实验者先用蒸馏水嗽口,然后含一口蒸馏水于口中,轻嗽一、二分钟,吐入小烧杯中。将其稀释5-20倍。 2. 淀粉酶活性的检测: 取一支试管,注入0.5%淀粉溶液3 mL与稀释的唾液1 mL。混匀后插入1支玻棒,将试管连同玻棒置于37水浴中。不时地用玻棒从试管中取出1滴溶液,滴加在白磁板上,随即加1滴碘液,观察溶液呈现的颜色。此实验延续至溶液仅表现碘被稀释后的微黄色为止。记录淀粉在水解过程中,遇碘后溶液颜色的变化及反应时间
3、。 根据反应时间调整酶的稀释倍数,实验四1 酶的特异性,一、实验目的 了解酶的特异性并掌握检查酶的特异性的方法和原理。 二、原理 酶的特异性是指一种酶只能对一种或一类化合物(此类化合物通常具有相同的化学键)起作用,而不能对别的化合物起作用。如淀粉酶只能催化淀粉水解,对蔗糖的水解无催化作用。 本实验以唾液淀粉酶(含淀粉酶和少量麦芽糖酶)对淀粉的作用为例,说明酶的特异性。淀粉和蔗糖都没有还原性,但淀粉水解产物为葡萄糖,蔗糖水解产物为果糖和葡萄糖,均为还原性糖,能与Benedict试剂反应,生成砖红色的氧化亚铜沉淀,三、试剂和器材 1. 试剂 新鲜唾液稀释液、1%蔗糖溶液、Benedict试剂、0.5%淀粉、含0.3%NaCl的0.5%淀粉溶液 2. 器材 恒温水浴锅 四、操作方法 1. 检查试剂 取2只试管,按下表操作,淀粉酶的专一性实验 取2只试管,按下表操作,五、注意事项 唾液的稀释倍数因人而异,有时差别很大,稀释倍数可以是5100
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