heTranscriptionFactorGata6,转录因子Gata.ppt

1、转录因子Gata6与组织巨噬细胞表型及其增值更新有关,组织固有巨噬细胞对组织的微环境至关重要，它具有自我平衡与免疫监视的功能。这种多样性预示着离散的转录调控在特定的巨噬细胞可能存在，而且它决定了巨噬细胞的特定表型与组织特异性功能。许多固有巨噬细胞通过自我增殖进行自我更新。但是控制这些过程的因素依然不清楚。我们猜测特定的组织微环境中离散的转录调控控制组织巨噬细胞的特定表型与增殖更新。 我们对的了急性腹膜炎的老鼠进行了转录分析，我们的方法分析了在组织固有巨噬细胞中特异性增强的群体，以确定限于组织巨噬细胞的转录模式。结果发现Gata6选择性的在腹膜巨噬细胞中表达，所以猜测Gata6可能决定离散的转录

2、调控。,一. 骨髓Gata6的缺乏导致选择性小鼠腹膜骨髓细胞的变化 1. 我们用条件Gata6tm2.1Sad/J基因敲除小鼠与溶菌酶Cre重组酶敲入小鼠(Lyz2Cre）杂交而产生骨髓Gata6缺陷的小鼠(Gata6-KOmye mice)。与同窝WT型小鼠相比，用流式细胞检测分析Gata6-KOmye 小鼠腹膜细胞可以发现典型的F4/80highCD11bhigh 表型发生明显的改变，大部分 (95%)经典的腹膜巨噬细胞减少了F4/80与CD11b的表达。 2. 深入分析Gata6-KOmye 小鼠腹膜骨髓细胞(CD11b+CD19)表明，尽管 F4/80low巨噬细胞表现出相对正常的Ti

3、m4的表达，但是它的数量是减少的，而嗜酸性粒细胞与巨噬细胞和树突状细胞却高表达。 3. 但是腹膜淋巴细胞与周边血细胞的数量却没有明显的改变。,二. Gata6对于腹膜固有巨噬细胞的表型至关重要,1.通过微阵列分析发现特定的基因在WT小鼠中的表达较Gata6-KOmye 小鼠高（Fig 2A）。 2.在缺乏Gata6的情况下，对腹膜巨噬细胞特有的转录进行分析表明，大量的探针组被下调（Fig 2B）。 3.与WT小鼠相比，Gata6-KOmye小鼠一些表面受体表达下降(Fig2 CtoE)。 4.一项附加的研究鉴定了与其他组织相比腹膜巨噬细胞特有的基因，在Gata6缺乏的情况下许多基因同样被下调了

4、。(fig.S6 and table S6). 5.增加Gata6在骨髓来源巨噬细胞中的表达，可以促进它们在腹膜的滞留和促进它们表型向腹膜固有巨噬细胞变化(fig. S7)。 6.这确证了Gata6是腹膜巨噬细胞表型的主要调整者。,三.Gata6的缺乏导致腹膜巨噬细胞的增殖障碍,1.Gata6的缺乏增强腹膜巨噬细胞基部的增殖(Fig. 3,A and B)。 2.Gata6缺乏导致细胞多倍体的产生，这意味着细胞分裂障碍(Fig. 3,A and C, and fig. S8)。 3.在Gata6-KOmye小鼠中与F4/80lowKO巨噬细胞相比F4/80highWT细胞的增殖增殖水平较低（F

5、ig 3D)。这与用慢病毒将Cre导入成年条件敲除老鼠的腹膜巨噬细胞得到的结果是一样的（Fig. 3E)。 4.这些研究证明Gata6是限制细胞基底增殖的。 5.考虑到腹膜组织固有巨噬细胞与胸膜巨噬细胞的相似之处，我们检测了它们的Gata6表达，发现它们的表达是相当的(Fig. 3F)。与腹膜巨噬细胞相似的是Gata6-KOmye小鼠的胸膜巨噬细胞主要都是 F4/80low型，而且与同期来至相同微环境的F4/80high腹膜巨噬细胞相比表现出细胞固有的增殖增加与多倍体(Fig. 3G and fig. S8D)。,S8,四.Gata6的缺乏使腹膜巨噬细胞在炎症时的增殖恢复受到损伤,1.用 2

6、106的酵母聚糖微粒诱发急性腹膜炎，同时在WT与Gata6-KOmye小鼠中观察到中性粒细胞与嗜酸性粒细胞数量的增长(fig. S10)。一开始两种基因型都出现Tim4+巨噬细胞数量的下降，但是48小时后WT小鼠的Tim4+巨噬细胞数量基本恢复到了炎症之前的水平，而在Gata6-KOmye小鼠中却没有恢复(Fig. 4A)。 2.炎症加强了WT小鼠的增殖反应，与此对比，Gata6-KOmye巨噬细胞的增殖却没有改变(Fig. 4B)。 3.在Gata6-KOmye小鼠中，我们比较了Tim4+F4/80highWT巨噬细胞与Tim4+F4/80low KO细胞的增殖状态。与KO巨噬细胞不同的是，

7、F4/80highWT细胞在同样的环境下对炎症的反应是表现出增殖的增加，这证明Gata6的功能是细胞固有的，而不是其他因素或者环境因素的结果(Fig. 4, C and D)。 4.用大剂量的酵母聚糖(2107particles)诱导炎症，与WT型相比，Gata6-KOmye小鼠表现出低数量的Tim4+巨噬细胞恢复，低水平的 Tim4巨噬细胞增长与嗜中性粒细胞的增长 (Fig. 4E)。,Gata6,缺乏,增加,促进骨髓M向 定居M转变,M基因表达改变,M增殖加强,M在炎症下 增殖障碍,M一些蛋白及 受体表达的改变,M表型改变,M多倍体增加 M增殖障碍,M增殖障碍,这里我们确定了Gata6是腹膜巨噬细胞特殊表型的主要控制物，而且这种表型内在地与增殖调节有关