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文档简介

a,实验十,目的基因的诱导性表达,a,一、实验目的,了解学习目的基因诱导性表达过程以及表达产物的活性检测方法,a,二、实验原理,诱导性表达方法 表达产物的检测,a,诱导性表达方法,IPTG诱导目的基因高效表达原理 乳糖操纵子模型 表达载体,a,表达产物的检测,产量高低 活性高低不同,a,三、实验器材,转化的Ecoli、LB培养基、Amp、IPTG、1XPBS、离心管、指形管、移液器、超声波裂解仪等,a,四、实验步骤,将新鲜菌种液（已含有目的基因）以1:100接种于LB（Amp）培养基中，37振荡培养至OD600=0.4-0.6 ； 加IPTG至终浓度为0.5mM, 30振荡培养5h; 4, 8000rpm离, 10min离心收集细菌,a,PBS充分洗涤2次后进行超声波裂解菌体，分别收集裂解上清和沉淀进行SDS-PAGE，分析蛋白表达情况并确定诱导表达的最佳条件,a

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