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文档简介
1、薄层色谱法,thin layer chromatography,TLC,1,第一节,薄层色谱法的基本原理,定义:薄层色谱法是将被分离的试样,溶液点在薄层板的一端,再用溶剂把,试样展开,从而使试样组分分离,分型,吸附薄层色谱,分配薄层色谱,法、离子交换薄层色谱法、凝胶色谱,等,2,一)薄层色谱法的原理,将一定粒度的吸附剂均,匀地涂铺在表面光洁,的玻璃板或塑料平板,上,制成薄层板,3,薄层板,原点,试样,加在薄层板的起始线,上(点样,4,把待分析试样的溶液滴,把薄层板放入层析缸中,底端浸入适当溶剂,5,A,B,前沿,展开过程中,组分在,两相之间发生多次吸,附,解吸平衡,吸附,牢的组分随展开剂移,动
2、慢,吸附弱的组分,随展开剂移动快,一,段时后,组分被分离,各组分在薄层板上形,成不同距离的斑点,6,原点,比移值,R,f,溶剂,前沿,起始线,R,原点到斑点中心的距离,f,原点到溶剂前沿的距离,c,R,a,b,a,f,c,R,st,c,b,R,f,值相差越大,分离越好。一般要求分,A,A,B,B,离后组分的,R,f,值在,0.2,0.8,之间,各组分,的,R,f,值之差应大于,0.05,以防斑点重叠,7,二)固定相和流动相,1,固定相(吸附剂,常用的吸附剂:硅胶、氧化铝、聚酰胺、活性炭和大孔吸,附树脂等,吸附剂的选择要合适,与流动相、被分离化合物不反应,8,2,流动相(展开剂,薄层色谱法中采用
3、单一溶剂或多元,混合溶剂作流动相,称为展开剂,与吸附柱色谱法中选择流动相的一,般规则相同,展开剂的选用要从被分,离试样组分极性、吸附剂活性和展开,剂的极性三个因素综合考虑,9,吸附剂和展开剂的选择,对于极性较小的被分离试样组分,应,选用活性较强的吸附剂,极性较小的,展开剂,对于极性较大的被分离试样组分,应,选用活性较弱的吸附剂,极性较大的,展开剂,10,被分离试样组分极性、吸附剂活性和展开剂极性之,间的关系,活泼,C,B,C,极性,吸附剂,固定相,展开剂,流动相,不活泼,B,A,A,非极性,被分离物质,非极性,极性,11,展开剂成分的选择,对于容易分离的化合物,用单一溶剂展,开,优点:溶剂简单,分离重现性好,对于难分离组分,则选用二元、三元,甚至多元溶剂,Rf,太小,加入强极性展开剂,Rf,过大,降低展开剂的极性,12,优化,1,占比例较大的溶剂为主要溶剂,可使,试样组分溶解并基本分离,占比例较小的溶剂可进一步调整各组,分,Rf,值,改善分离效果,2,分离酸性或碱性组分时,往往在展开,剂中加入少量酸或碱,以防这些组分,离解,使这些组分的斑点更加集中和,清晰,从而提高分离度,3,当展开剂的粘度太大时,可在展开剂,中加入粘度小的溶剂,以降低展开剂,粘度,从而提高展开速度,13,谢谢,thank you,14,谢谢,观赏,WPS,O
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