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文档简介

1、第二十四章免 疫 诊 断,抗原抗体反应的原理和特点,抗原抗体发生结合反应的物质基础抗原决定基与抗体的抗原结合部位之间的结构互补性。 抗原抗体反应的特点 1.高度特异 2.可逆性 3.可见性：适当浓度和比例、盐离子,Ag/Ab Reactions,亲和力（Affinity,凝集反应 沉淀反应 补体参加反应 免疫标记技术,第一节 抗原或抗体的检测,Agglutination 颗粒性抗原（如细菌、细胞）与相应抗体, 在适当电解质存在的条件下, 经过一定时间后出现肉眼可见凝集块称为凝集反应,间接凝集实验,可溶性抗原或抗体吸附于与免疫无关的载体上,使之成为致敏载体颗粒,然后与相应抗体或抗原作用,在电解质

2、参与下出现的凝集反应,应用 检测可溶性抗原或抗体,Coombs (Antiglobulin)Tests,检测血清中抗-Rh抗体,凝集抑制实验,将可溶性抗原与相应抗体预先作用,然后再加入致敏颗粒（吸附相同可溶性抗原的乳胶颗粒）, 由于抗体已被可溶性抗原结合, 因而致敏颗粒不发生凝集现象。如免疫妊娠实验,单向免疫扩散,双向免疫扩散,补体结合实验,已知抗原加入血清（检测抗体,加入标准量补体,加入包被抗体的红细胞,检测红细胞溶解量,Ag,Ag,免疫酶技术,免疫荧光法（immunofluorescence,免疫印迹法（western blotting,放射免疫测定法(RIA,直接荧光法,间接荧光法,Fl

3、ow Cytometry,Flow Cytometry,Flow Cytometry,ELISA,双抗体夹心法 双抗原夹心法 生物素亲和素系统 酶联免疫斑点试验（ELISPOT） 免疫组化技术,ELISA,双抗体夹心法（HBsAg、HBeAg等）示意图,1.将抗体包被在固相载体上,2.如样品中含有抗原，则结合 为抗原抗体复合物,3.再加入酶标记抗体，则结合 为抗体-抗原-酶标记抗体复合 物,4.酶催化底物并显色,双抗原夹心法（抗-HBs等）示意图,1.将抗原包被在固相载体上,2.如样品中含有抗体，则结合 为抗原抗体复合物,3.再加入酶标记抗原，则结合 为抗原-抗体-酶标记抗原复合 物,4.酶催化底物并显色,中间蓝色为癌巢，周围棕褐色为转基因的淋巴细胞,第二节 免疫细胞的测定,一、淋巴细胞的分离与类型鉴定,T细胞总数及亚类,外周血T细胞总数: CD3+T细胞 60%-80% CD4+T细胞55%-60% CD8+T细胞20%-30% CD4+/CD8+ 比值大约为2/1,免疫荧光法 磁珠分离法 淘选法 流式细胞术 抗原肽MHC分子四聚体tetramer,免疫磁性微球的分离原理,直接法对细胞进行分类,间接法对T细胞进行分离,二、白细胞功能测定,T细胞功能测定 B细胞功能测定 吞噬细胞功能测定,T细胞功能测定,T细胞增殖试验：MTT法 细胞毒试验 细胞因子检测 细胞

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