肝脏病实验检查双缩脲法测定

1、肝脏功能实验检查,云南省第二人民医院检验科 方芳,本章要求 熟悉常用肝功及肝病的实验室检查的基本原理 掌握肝病常用实验室检查参考值、临床意义及选择原则,7、提问,1、蛋白质代谢功能的检查,2、胆红素代谢功能的检查,3、凝血功能的检查,4、酶学检查,5、病毒性肝炎标志物的检查,6、肝功能及肝病实验室检查的选择原则,主要内容,主要概念,2、肝病的实验室检查： 与肝脏的各种代谢功能、各种病理变化 相关的实验室检查称为肝病的实验室检查,注 意,监测ALT、AST与AFP变化对鉴别肝硬化 与肝癌的意义,血TB、DB、UCB和尿三胆在鉴别肝前性、 肝性、后前性黄疸中的意义,白蛋白与前白蛋白检查在肝病中的意

2、 义有什么不同,乙肝五项标志物检测的意义,主要检查内容,8.病毒性肝炎标志物的检查,6.摄取、排泄功能检查,一 蛋白质代谢的检查,包 括,血清总蛋白、白蛋白、球蛋白、A/G比值测定 血清蛋白电泳 血清前白蛋白测定 凝血功能检查 血氨测定,2）白蛋白（A，albulin)为血液中主要蛋白质 由肝脏合成，其半衰期为15-19天，可用溴 甲酚绿法测定,一）血清总蛋白、白蛋白、球蛋白 A/G比值测定,3）球蛋白 (G，globulin)为血清总蛋白中除去 白蛋白以外的蛋白质(TP-A=G) ,是多种蛋 白质的混合物，其中包括含量较多的免疫 球蛋白和补体、各种糖蛋白,脂蛋白、金属 结合蛋白和酶类等，球蛋

3、白主要是由单核- 吞噬细胞系统合成,与机体免疫有关,双缩脲法测定 TP,原 理: 两分子尿素加热脱氨缩合成为双缩脲与 碱性铜溶液中铜离子形成紫红色化合物，称 双缩脲反应，碱性铜溶液称双缩脲试剂,血清A测定 （BCG法：溴甲酚绿法,1）血液稀释，各种原因所致的水盐潴留2）各种原因的A降低,合成不足 常见肝脏损害(慢性肝病 时,A 下降比急性肝炎明显;失代偿期肝硬化低于代偿期肝硬化）血清总蛋白60g/L或白蛋白25g/L称为低蛋白血症，临床上常出现浮肿及胸、腹水； 原料不足 长期饥饿、腹泻、消化道肿瘤和消化不良等 3) 去路增加 丢失过多：肾炎、肾病综合征、大量胸腹水、严重烧伤和失血消耗过多：甲亢

4、、糖尿病、恶性肿瘤等,临床意义】 1、 肝脏疾病：慢性肝炎、肝硬化、肝细胞肝癌（常合并肝硬化）时，白蛋白带明显减少，1、2、球蛋白也有减少倾向，球蛋白增加，在肝硬化、肝癌时可出现 、难分离而连续的“ ”桥。肝癌时还可在白蛋白与1之间出现一条新的区带，即甲胎蛋白区。 2、 M蛋白血症：如骨髓瘤、原发性巨球蛋白血症等。大部分病人在至区带可见基底窄峰高尖的M蛋白峰,3、肾病综合征、糖尿病肾病：由于脂代谢异常，可致2及球蛋白（脂蛋白的主要成分）增高，白蛋白及球蛋白降低。 4、其他：结缔组织病伴有多克隆球蛋白增高，先天性低丙种球蛋白血症,球蛋白降低,肝脏严重受损时，肝脏合成凝血因子功能下降，故凝血时间延

5、长。1) 血浆凝血酶原时间（PT）延长 是肝硬化失代偿期的特征，也是诊断胆汁淤积，肝脏合成维生素K依赖因子、 、是否减少的重要检查。在暴发性肝炎时，如PT延长，FIB及PLT都降低，则可诊断为DIC,2) 活化的部分凝血活酶时间（APTT）延长 严重肝病时， IX、因子合成减少以及维生素K缺乏时因子 、不能激活，APTT延长。APTT是内源性凝血系统较敏感的筛选实验,3) 凝血酶时间测定（TT）： TT延长主要反应血浆纤维蛋白原含量减少或结构异常和纤维蛋白降解产物（FDP）的存在。大部分纤维蛋白原在肝脏合成，肝硬化或急性暴发性肝功能衰竭合并DIC时，TT可延长,4) 抗凝血酶测定（AT-）：

6、主要在肝合成，70%-80%凝血酶由其灭活，它与凝血酶形成11共价复合物而抑制凝血酶。严重肝病时AT-活性明显降低，合并DIC时更低,五）血氨测定,原理】 肠道中未被消化吸收的AA、蛋白质，以及血液中尿素渗入肠道后，在大肠杆菌的作用下生成氨，再经肠道血管重吸收入血，经门静脉进入肝脏。 氨对中枢神经系统有高度毒性，肝脏是唯一能解除氨毒性的器官。肝脏将氨合成尿素，经肾脏排出体外，是保证血氨正常的关键。在肝硬化及暴发性肝衰时，如果80%以上肝组织破坏，氨就不能被解毒，氨在中枢神经系统积聚，引起肝性脑病,参考范围】 谷氨酸脱氢酶法：11-35umol/L,临床意义】 1、升高：见于严重肝损害（如肝硬化

7、、肝癌、重 症肝炎等）、上消化道出血、尿毒症及肝外门脉系统 分流形成。 2、降低：低蛋白饮食、贫血,二 胆红素代谢功能检查,胆红素代谢后的去路： 在肝细胞中合成的结合胆红素，随胆汁排入肠道， 在细菌作用下生成尿胆原和尿胆素 大部分随粪便排出 小部分尿胆原被肠道重吸收，经门脉入肝，重 新转变成结合胆红素，再随胆汁排入肠腔，形成胆红 素的肠肝循环 在肠肝循环中有少量尿胆原逸入体循环，从尿 中排出,胆红素代谢功能检查内容,1、血清总胆红素、结合胆红素及非结合胆红素测定 2、尿内胆红素检查 3、尿内尿胆原检查 4、几种类型黄疸的实验室鉴别,2、尿内胆红素检查,原理】 非结合胆红素不能透过肾小球屏障，因

8、此不能 在尿中出现，而结合胆红素为水溶性能够透过肾小 球基底膜在尿中出现。正常人尿中结合胆红素含量 极微，定性为阴性，当血中结合胆红素浓度超过肾 阈值时，可自尿中排出,参考范围】 正常人为阴性,临床意义】 尿胆红素试验阳性提示血中结合胆红素增加，见于： 1、胆汁排泄受阻 ：肝外胆管阻塞，如胆石症、胆管 肿瘤、胰头癌等；肝内小胆管压力升高如门脉周围炎、 纤维化或肝细胞肿胀等。 2、肝细胞损害：各种肝炎等。 3、鉴别黄疸：溶血性黄疸为阴性，肝细胞性及梗阻 性黄疸为阳性,3、尿内尿胆原检查,原理】 在胆红素肠、肝循环过程中，有极少量尿胆原 逸入血循环，从肾脏排出,参考范围】 定性为阴性或弱阳性,临床

9、意义】 1）、尿胆原增多： （a）肝细胞受损； （b）循环中红细胞破坏增加及红细胞前体细胞在骨髓内 破坏增加，如溶贫； （c）内出血时由于胆红素生成增加； （d）其他，如肠梗阻顽固性便秘时肠道对尿胆原回吸收 增加，使尿中尿胆原排出增加,2）、尿胆原减少和缺如： （a）胆道梗阻：完全梗阻时尿胆原缺如，不完全梗阻时尿胆原减少； （b）新生儿及长期服用抗生素时， 由于肠道细菌缺乏或受到药物抑制，使尿胆原生成减少,三、胆汁酸（BA）测定,四、 脂类代谢功能检查,1）血清胆固醇和胆固醇脂的测定,原理】 内源性胆固醇80%是由肝脏合成，血浆中卵磷脂 胆固醇脂肪酰基转移酶（LCAT）全部由肝脏合成。 在LC

10、AT的作用下，卵磷脂的脂肪酰基转移到胆固醇 羟基上，生成胆固醇酯。当肝细胞损伤时，由于胆 固醇及LCAT合成减少或缺乏，导致胆固醇酯的含量 减少,参考范围】 总胆固醇 2.9-6.0mmol/L 胆固醇酯 2.34-3.38mmol/L 胆固醇酯游离胆固醇31,临床意义】 1、肝细胞受损时胆固醇酯减少，严重肝细胞损害如 肝硬化、暴发性肝衰血中总胆固醇也降低。 2、胆汁淤积时，血中胆固醇增加，其中以游离胆固 醇增加为主。胆固醇脂与游离胆固醇比值降低。 3、营养不良及甲亢时血中总胆固醇降低,肝脏是人体含酶最丰富的器官，有数百种之多， 在全身物质代谢及生物转化中都起重要作用。但常用 于临床诊断的不过

11、10余种： 有些酶有一定的组织特异性，如存在于肝细胞 内的酶，当肝脏损伤时，释放入血，使血清中这些酶 活力增加，如丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨 酸氨基转移酶（AST）等。 有些酶是肝细胞合成，当肝病时，这些酶活性 降低，如凝血酶,有些酶在肝脏中合成后，随胆汁排出，当胆道 阻塞时，血清中这些酶活性增加，如碱性磷酸酶 （ALP）-谷氨酰转酞酶（GGT）。 有些酶与肝纤维组织增生有关，当肝纤维化时， 血清中这些酶活性升高，如单胺氧化酶（MAO）、透 明质酸酶（HA）等,同工酶是指具有相同催化活性，但分子结构、 理化性质及免疫学反应等都不相同的一组酶，因此 又称同工异构酶。这些酶存在于人体的不

12、同组织， 或同一组织，同一细胞的不同细胞器中，因此，同 工酶的测定增加对肝胆系统疾病的鉴别诊断能力,几种特征酶,1、血清转氨酶 2、碱性磷酸酶（ALP） 3、-谷氨酰转移酶（-GT） 4、-L-岩藻糖苷酶（AFU） 5、单胺氧化酶（MAO） 6、脯氨酰羟化酶测定（PH,3) GOT现名天门冬氨酸氨基转移酶（AST）。此 酶在心肌含量最高，肝脏为第三，在肝损害 时，其漏出量也较ALT低,2）意义,4、-L-岩藻糖苷酶（AFU,原理】 -L-岩藻糖苷存在于细胞溶酶体中，参与含岩 藻糖苷的糖蛋白、糖脂等生物大分子物质的代谢。 【临床意义】 用于细胞癌与其他肝占位性病变的鉴别诊断。 肝癌时AFU显著增

13、高，手术切除后降低，复发时又升 高,5、 单胺氧化酶（MAO,原理】 MAO为一种含铜的酶，分布在肝、肾、胰、心 等器官。血清MAO活性与体内结缔组织增生呈正相关， 因此临床上常用MAO活性测定来观察肝脏纤维化程度,临床意义】 1、肝脏病变，80%的重症肝硬化及伴有肝硬化的 肝癌患者MAO增高。但对早期肝硬化不敏感，急性肝 炎多正常。中、重度慢性肝炎有50%血清MAO增高，表 明有肝细胞坏死和纤维化形成。 2、肝外疾病：慢性心衰、糖尿病、甲亢、系统性 硬化等，因这些器官中含有MAO，或因心功能不全引 起心源性肝硬化或肝窦长期高压，MAO也可升高,6、脯氨酰羟化酶测定（PH,原理】 PH是胶原纤

14、维合成酶，在脏器发生纤维化时， PH在该器官组织内的活性增加，当肝纤维化时，肝 脏胶原纤维合成亢进，血清中PH增高，可做为肝纤 维化的指标,临床意义】 1、肝纤维化的诊断，肝硬化时PH活性明显增高， 原发性肝癌大多伴有肝硬化，PH也可增高，各种肝炎 在病程进展中随肝细胞坏死、假小叶形成及纤维化程 度的不同，PH活性亦有不同。 2、肝脏病变随访及预后判断，慢性肝炎，肝硬 化其PH活性进行性增高，提示肝细胞坏死及纤维化状 态加重，若治疗后PH活性下降，提示治疗有效，疾病 在康复过程中,六、摄取、排泄功能检查,肝脏有两条输出通路，即除肝静脉与体循环联系 外，还通过胆道系统与肠道相连接，位于肝细胞之间

15、 的毛细胆管，互相连接成网并与小叶间胆管相通，接 受肝细胞分泌出来的胆汁。体内物质代谢的终末产物， 由外界进入体内的药物、染料、毒物，或从肠道吸收 来的非营养物质，以及一些肝内代谢产物（如胆色素、 胆汁酸盐、胆固醇），均可经过肝细胞的摄取、代谢、 转运，最后随胆汁的分泌而排入肠腔，并随粪便排出 体外,当肝脏受损及肝血流量减少时，上述物 质排泄功能便降低，因此外源性给予人工色 素（染料）、药物来检测肝脏排泄功能是肝 功能检查方法之一。临床上常运用静脉注射 靛氰绿（ ICG）、利多卡因或磺溴酞钠来了解 肝脏的摄取与排泄功能,型前胶原肽（PP）：常作为肝脏纤维化的检测指标，可鉴别慢性持续性肝炎与慢性

16、活动性肝炎，可诊断早期肝硬化，并可作为慢性肝炎的预后指标。 血清铁：当肝细胞发生变性、坏死时，肝细胞内储存的铁逸出，同时有肝内铁代谢异常，使血清铁增高,七、其他检查,血清铜测定：肝是含铜量最大的器官，95%的铜以铜蓝蛋白的形式储存，肝、胆、肾等器官病变时，血清铜随之变化。 透明质酸： 层粘蛋白： 反映肝纤维化的指标。 型胶原： 其他酶类：丁酰胆碱脂酶（CHE）、5-核苷酸酶（5-NT）、腺苷脱氨酶（ADA）、醛缩酶（ALD）、铜氧化酶（铜蓝蛋白）等,八、肝癌标志物的检查,4）其他 肝硬化（活动期）、先天性胆管闭锁、胃癌、胰腺癌时，AFP也可升高,3）溃疡、肝硬化、阻塞性黄疸及吸烟者 和老人 CEA可轻度升高,九、病毒性肝炎标志物的检查 P478,病毒性肝炎根据病原体（肝