山东省潍坊一中高一生物学案第1节基因工程的基本工具

1、第 1 节基因工程的基本工具知识要点：DNA 重组技术的所需要的三种基本工具自学探究：一 . 限制性核酸内切酶“分子手术刀”1.限制酶存在的位置及种类？常用的两种限制酶是什么？2.限制酶的作用及特点？3.限制酶怎样切割DNA 才能形成粘性末端和平末端？二 . DNA 连接酶“分子缝合针”1. DNA 连接酶的作用？2.目前常用的两类DNA 连接酶的种类及作用特点？3.区别 DNA 连接酶、 DNA 聚合酶、 DNA 解旋酶、 DNA 酶？三 .基因进入受体细胞的载体“分子运输车”1.什么是质粒？2.天然的质粒能做载体吗？做载体的质粒必须具备哪些特点？3.为什么限制酶不剪切细菌本身的DNA ？4

2、.常用的“分子运输车”有哪些？疑难点拨：1. 理解限制性核酸内切酶：例 1下列关于限制性核酸内切酶的说法，错误的是A限制性核酸内切酶广泛存在于动植物体内，微生物内很少分布B限制性核酸内切酶可以被用来切割DNA分子，获取目的基因C一种限制性核酸内切酶只能识别一种特定的核苷酸序列D限制性核酸内切酶能在特定部位的两个核苷酸之间切断磷酸二酯键2. 理解 DNA 连接酶：例 2下列关于DNA连接酶的作用，叙述正确的是A 既能将双链DNA 片断互补的黏性末端之间连接起来，也能将双链DNA 的黏性末端之间的氢键进行连接B 将单个核苷酸加到某DNA 片断末端，形成磷酸二脂键C连接两条DNA 链上碱基之间的氢键

3、D 将断开的两个DNA 片断的骨架连接起来，重新形成磷酸二酯键3. 理解载体：例 3 作为基因的运输工具载体，必须具备的条件之一及理由是A. 能够在宿主细胞中稳定地保存下来并大量复制，以便提供大量的目的基因B. 具有多个限制酶切点，以便于目的基因的表达C. 具有某些标记基因，以便为目的基因的表达提供条件第 1 页D. 能够在宿主细胞中复制并稳定保存，以便于进行筛选巩固练习：1下列说法中正确的有A 限制性核酸内切酶主要是从真核生物中分离纯化出来的B 所有限制性核酸内切酶识别的核苷酸序列均由6 个核苷酸组成C不同的限制性核酸内切酶切割DNA的位点不同D有的质粒是单链DNA2. 下图示限制性核酸内切

4、酶切割某DNA分子的过程，从图中可知，该限制性核酸内切酶能识别的碱基序列及切点是A CTTAAG，切点在C 和 T 之间B CTTAAG，切点在G和 A 之间C GAATTC，切点在G和 A 之间D GAATTC，切点在C 和 T 之间3. 基因工程的操作过程中需要的工具酶有A 限制性核酸内切酶、DNA聚合酶B限制性核酸内切酶、DNA连接酶、载体C DNA连接酶、 DNA聚合酶D 限制性核酸内切酶、DNA连接酶4. 特定的限制性核酸内切酶只能识别特定的核苷酸序列，并在特定的切点上切割DNA分子，这是应用了酶的A高效性B专一性C多样性D酶作用条件的温和性5. 一个双链DNA经一种限制酶切割一次形

5、成的黏性末端个数为A 1B 2C 0D 2 或 06.DNA 连接酶的作用是A. 连接两个黏性末端之间的氢键B连接两个黏性末端之间的磷酸二酯键C 连接任意两个DNA分子D ABC都对7质粒是基因工程常用的载体，它的特点是能自主复制不能复制结构简单单链 DNA环状 DNA含有标记基因A B CD 8下列不属于基因工程的常用载体的是A 核 DNAB动物病毒C 噬菌体的衍生物D植物病毒9关于限制酶和DNA连接酶的理解，正确的是A 其化学本质都是蛋白质B DNA连接酶可以恢复 DNA分子中的氢键C.在基因工程操作中可以用DNA聚合酶代替DNA连接酶D. 它们不能被反复使用10. 以下是几种不同限制性内

6、切酶切割DNA分子后形成的部分片段。回答下列问题：第 2 页(1)以上 DNA片段是由种限制性核酸内切酶切割后产生的。(2)若要把相应片段连接起来，应选用(填“ DNA 聚合酶”或“ DNA连接酶” )(3) 找出能连接的对应片段并写出连接形成的DNA片段。11. 下图所示为一种限制性核酸内切酶切割DNA分子：(1) 这种限制性核酸内切酶切点是间形成个黏性末端，其特点是。(2)此限制性核酸内切酶的特点是。(3)如是 G碱基发生基因突变，可能发生的情况。(4)这种工具酶主要存在于中。(5)若用该酶从苏云金芽孢杆菌中提取到了抗虫基因，要将该基因导入棉花细胞中获得抗虫棉，则所需运输工具称为，最常用的是，其次还有和。答案： (1)G 和 A2