果蔬菜中农药残留测定实验报告

1、实验四 果蔬菜中农药残留测定环境工程 李婷婷 2110921109实验目的1、 练习使用农药残留快速检测仪，掌握其操作过程；2、 掌握酶抑制法的实验原理。二、实验原理 本实验采用酶抑制法，有机磷或氨基甲酸酯类农药能抑酶活性， 使本可以由酶参与的显色反应而失去颜色， 呈白色。可用比色法定量 抑制程度。抑制率是有机磷或氨基甲酸酯类农药抑制酶能力的强弱。在一定条件下 , 有机磷和氨基甲酸脂类农药对胆碱脂酶正常功能 有抑制作用 , 其抑制率与农药的浓度呈正相关。正常情况下 , 酶催化神经传导代谢产物 （乙酰胆碱 ）水解, 其水解 产物与显色剂反应。产生黄色物质，用分光光度计在412nm处测定吸 光度随

2、时间的变化值， 计算出抑制率。 通过抑制率可以判断出样品中 是否含有高剂量有机磷和氨基甲酸酯类农药的存在。三、实验步骤1 参数设置2 校准测量：选择校准菜单后，取 2.5ml 试剂一移入比色瓶后， 各取 100ul 试剂二和试剂三倒入比色瓶中， 盖紧摇匀 , 放入比色槽中放置10min,按校准键，仪器显示正在预热，仪器发出嘀嘀嘀三声后， 表示校准完毕。3 空白测量：接上步,按空白测量键,仪器显示正在预热,发出 嘀嘀嘀三声后,提示加入试剂四,取出比色瓶加入 100ul 试剂四,盖 好摇匀,放入比色瓶中,按回车继续,仪器显示正在测量,倒计时三 分钟,结束后同样发出嘀嘀嘀三声。并显示吸光度值A1,

3、A2。4 样品测量4.1 样品制备：选取有代表性的果蔬样品,擦去表面泥土,叶菜用叶菜取样器取叶片部分，果实蔬菜可切割。然后切成1cm左右 的见方碎片,称取 2.0g 样品。4.2 样品中农药的提取： 将 6 个样品提取瓶放在支架上, 各放 入 2.0g 样品,各加 10.ml 试剂一,用搅拌针使样品全部浸入液 体中,放入提取仪中萃取 6 分钟。之后放回支架,取 2.5ml 注入比 色瓶中。4.3 样品测量：选择测量键,各加 100ul 试剂二和试剂三混合摇匀。按确认键进行测量,预热结束后。仪器显示正在培养。 10 分钟后结束,发出嘀嘀嘀三声。提示加入试剂四。加入后,按确认 键三分钟后,屏幕显示

4、结果。四、实验结果与分析X 100%1 抑制率公式：E( %)=(A2-A 1 )-(A4-A3) /(A2-A1)E ：抑制率A1 ：空白测量 3 分钟前的吸光度值A2 ：空白测量 3 分钟后的吸光度值A3 ：样品测量 3 分钟前的吸光度值A4 ：样品测量 3 分钟后的吸光度值2 结果判定：当被测样品的抑制率在 50%以上时，表示被测样品 中有高剂量有机磷和氨基甲酸酯类农药存在， 样品为阳性结果， 阳性 结果的样品需要检测两次以上。 对阳性结果的样品， 可用其他方法进 一步确定农药品种的含量，并报有关部门处理。实验所测样品为豆角， 经实验测得： A1=-0.029 ， A2=0.617， A

5、2-A1=0.6460.300 ，所以空白有效。 A3=0.329，A4=1.1171.8 ，所 以此样品检测有效。抑制率为 4.1%，小于 50%，所以样品检测一次即 可。五、问题与讨论本次实验中应注意的问题有以下几点：1、试剂二用量：若 A2-A1 小于 0.300 ，此空白无效，需要重新 检测，若多次测定后，仍小于 0.300 ，则需要增加试剂二的用量，直 到大于为止。2、吸光度确认：在样品测量结束后。若 A4 大于 1.80 ，则此样 品检测无效，需重新检测，多次测量后仍大于 1.80 ，为果蔬色素干 扰，需要对被测样品进行整株提取，不要剪碎样品。3 、注意时间间隔：提示加入试剂四时应该在嘀嘀嘀三声后加入（ 空白和样品 ） 。且做空白和样品时加入试剂四的时间间隔应一致