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1、试卷编号 NO: 高等函授教育植物组织培养试题8、微体嫁接 名: 姓 学 号: 四 五 总 分 题号 一 二三 分数9、人工种子 分) 10*2分=20一 名词解释:( 、植物细胞组织培养1 10、体细胞无性系变异 2、细胞全能性 30*1分=30分)二 填空:( 目前植物组织培养应用最广泛的方面是1、 。 和 、脱分化3 叫种途径,一种植细脱分化的胞再分化出完整株有两、2由 。 ,另一种叫做做 、3、培养用具的常用灭菌方法有 、外植体4 。 、某些生长调节物质及抗生素、酶类物质遇热不稳定,对其灭菌时不能4 ,而要进行进行 。 、试管苗驯化5 往往、一般来说,黑暗条件下有利于 的增殖,而 5

2、需要一定的光照。 6、植物离体授粉技术通常包括、 、 6、间接不定芽发生 三个方面。 继代一次;而固体培7、一般液体培养的继代时间较短, 、双极性7 继代一次。 养继代时间可以长些, 。 、 、 、外植体器官发生的三种途径包括8 9、从再生植株倍性来看,小孢子培养通常产生 植株,胚1、造成组织培养过程中发生污染的原因有哪些?如何有效控制污染? 植株, 通常产生三倍体植株。 培养通常产生 、 、 10、脱毒苗鉴定与检测的主要方法有 、 。 对于许多作物花粉的启动、分裂、形11、在生长素中, 成愈伤组织和胚状体起着决定性作用,但是对却有抑制作用。 12、用平板培养法培养单细胞或原生质体时,常用 来

3、衡量细胞培养效果。 13 、用 药剂处理是诱导染色体加倍的传统方法。 =10分) 三计算题(1*10分 MS母液的浓度%某培养基的配方是MSBA LNAA L蔗糖琼脂粉。 BA100分别是:大量元素倍,微量元素500倍,铁盐倍,有机物倍;2、简述外植体消毒的一般步骤。 400ml该培养基,需要吸取各种母 ml mg/ml 母液浓度,NAA母液浓度。要配制 ?分别称取蔗糖、琼脂粉各多少克?(要求写出计算步骤)液各多少ml 、胚培养在科学研究及生产实践中有哪些应用?3 分)=25分5*5简答题( 四 五 、结合花粉培养,简述看护培养法。4 论述题(1*15=15分) 试述植物组织培养中影响器官分化

4、的因素有哪些?在实验研究中应该如 何考虑这些因素以达到较好的器官分化效果? 、如何减轻植物组织培养中试管苗玻璃化现象?5植物组织培养参考答案 殊材料还须进行预处理,以达到最佳消毒效果。对于材料内部带菌的组织有时还需在培养基中加入适量抗生素。 一 名词解释 2、外植体取材自来水冲洗70酒精表面消毒201、 植物细胞组织培养:指在离体条件下利用人工培养基对植物器官、组织、细胞、原生质体60s无菌水冲洗消毒剂(升汞或23次氯酸钠)消毒处理810min或等进行培养,使其长成完整的植株。 2535min无菌水充分洗净备用 。 3、( 2、细胞全能性:指一个完整的植物细胞拥有形成一个完整植株所必需的全部遗

5、传信息。 1)用于胚的挽救 远缘杂交是植物育种工作的重要途径之一,单远缘杂交难以成功的一个主要原因就是杂交后的合子胚发育不良,常常表现中途败育。 脱分化:在细胞组织培养中,一个成熟细胞或分化细胞转变成为分生状态的过程,即形成通过人工胚培养可使之成苗,用于育种。 3、(愈伤组织的过程。 2)打破种子休眠 胚培养可使休眠的种子提高萌发成苗、缩短育种周期或加速良种繁育。 (3)克服珠心胚的干扰外植体:在植物细胞组织培养中,由活体植物体上提取下来的,接种在培养基上的无菌细 利用幼胚离体培养技术可以排除多胚性植物珠心胚对合子胚的干扰,4、 获得杂种胚,大大提高杂交育种的效率。胞、组织、器官等均称为外植体

6、。 (4 5、试管苗驯化:植物组织培养中获得的小植株,长期生长在试管或三角瓶内,体表几乎没有)诱导胚状体及胚性愈伤组织 利用植物的幼胚或其他胚胎组织,在离体培养条下可以产生大量次生胚状体,从而用于快速繁殖。保护组织,生长势弱,适应性差,要露地移栽成活,完成由“异养”到“自养”的转变,需要一个逐 (渐适应的驯化过程。5)种子生活力的快速测定 木本植物经层积和未层积处理的种胚离体培养条件的萌发速率一 致。 间接不定芽发生:指外植体先脱分化产生愈伤组织,再分化形成芽器官。 6、4、7、 双极性:指在细胞发育的初期其内含物的分布具不均匀性,形成胚性细胞后具有发育成芽 Sharp等(1972)建立一种看

7、护培养法,从培养的番茄形成了细胞无性繁殖系。做法是:将滤纸片放置在完整花药的上面,将花粉放置在滤纸片上。 端和根端的潜在能力。 5的茎尖作为接穗,嫁接到由试管中培养出来的无菌实生砧木上,继续进、8 微体嫁接:指将 、在组织培养过程中,经常会发现不定芽丛或者试管苗畸形生长,茎叶呈半透明水渍状,叶片失绿、皱缩,并沿纵向卷曲,脆弱易碎,叶表面完全无蜡质,称之为“玻璃化现象” 。这种“玻璃苗”行试管培养,愈合成为完整的的植株。细胞丧失持水能力,细胞内水分大量外渗,增加了植株水分的散失和蒸腾,是组织培养中一种生理失9、人工种子:指通过植物组织培养的方法获得的具有正常发育能力的材料,外面还被有特定 调或生

8、理病变,它极易引起植株死亡,很难移植成活,已成为茎尖脱毒、工厂化育苗等方面的严重障 物质,在适宜条件下可以发芽成苗的植物幼体。碍。为了更好解决“玻璃化现象”、10 体细胞无性系变异:在植物组织和细胞培养中,可以:培养细胞及再生植株往往会出现各种变异, ( 1)适当提高培养基中的琼脂、蔗糖或其他渗透剂的浓度,降低培养基的衬质势。 称为体细胞无性系变异。(二、 2)可在培养基中加入适量生长延缓剂,例如 ABA、PP333,并降低培养基中含氮量和细胞分填空裂素、赤霉素浓度。 体细胞胚胎发生 不定器官形成(器官形成) 、离体快繁植物脱毒1、 2(灼烧灭菌高压蒸汽灭菌、3 干热灭菌 4 3) 增加培养容

9、器的透气性,并避免容器底部受下层日光灯的加热,使容器底部适当降温造成、高温高压灭菌 过滤灭菌容器内的湿度有自上而下的梯度。雌蕊离体授粉 离体子房授粉、胚珠试管受精器官的分化、愈伤组织5 6 (周7 、1 2-44)控制培养室内温度,可对培养材料适当进行低温处理。 体细胞胚胎发生不定芽发生、腋芽萌发周 8 (5)增加自然光照。 胚乳培养二倍体、单倍体9 五、论述题 酶联免疫测定法电子显微镜鉴定法抗血清鉴定法、指示植物法10 首先,通过调节培养基中生长素和激动素或激动素之间的平衡关系,可以在一定程度上影响不、秋水仙素、植板效率 12器官分化、112, 4-D 13 定芽的分化。 三、计算题 培养基

10、中存在的腺嘌呤或激动素能够促进不定芽的分化和发育,但是培养基中的其他化合物,特别是IAA和NAA可以改变这种促进作用,因为生长素能够抑制不定芽的形成。当与激动素或 微量元素母液:大量元素母液:400ml/20=20ml 400ml/500= 腺嘌呤结合使用时,生长素可以抵消他们促进不定芽形成的作用,若400ml/50=8ml 有机母液:400ml/100=4ml 铁盐母液: IAA的相对浓度较高则有利于细胞的增殖和根的分化;若腺嘌呤或激动素的相对浓度较高,则有利于不定芽的分化;当这两种激素之 *L/ml=母液:BA间的比例适中时,则或产生无结构的愈伤组织。赤霉素对于不定芽的分化具有抑制作用,但

11、是如果不 *L/ml=2ml 母液:NAA 定芽已经形成,琼脂粉:蔗糖: 400g *%= 10g 400g *%= 赤霉素则会促进它们进一步伸长。不同组织在不定芽分化过程中对生长素和细胞分裂 素的要求是不同的,所要求的水平取决于这两类物质的内生水平。 四、简答题 其次,培养方式和培养条件也会影响不定芽的分化。一些植物的培养材料在固体培养基上只能、1如工作环境及仪器的因素、培养基及器皿灭菌不彻底、造成组织培养过程中污染的原因很多,以一种完全无结构的状态生长,但在成分相同的液体培养基中却能分化不定芽丛。此外,光周期、光 外植体带菌、操作时不遵守操作规程等。造成污染的病原主要分为细菌和真菌两大类。

12、质和光强对器官的分化也有影响。一般培养物适合的光强为10001500lx,光周期为1216h即可发。真菌性污染一般多由接种室内3真菌性污染主要指霉菌引起的污染。一般接种后8d,金紫外和蓝紫光能够促进芽的发生,而红光对生根具有显著作用。例如红光和远红外光交替照射对杜鹃花的空气不清洁、超净工作台的过滤效果不理想、操作不慎等原因引起。此类污染可通过完善操作、控器官发生有良好效果。根据培养材料种类的不同,不同的培养方式和培养条件对不定芽分化的影响有 制培养环境、严格操作程序来克服。所不同。细菌性污染除外植体带菌或培养基灭菌不彻底外,主要是操作人员的不慎造成。除要求操作人 最后,培养材料的基因型、供体植株和外植体的生理状态、外植体的细胞发育状态、培养物的员严格按照无菌操作程序

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