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文档简介

1、医院检验中心自体溶血试验操作规程 原理 血液经37C孵育，如果红细胞存在酶缺陷，使糖酵解发生障碍而导致溶血，并通过能否被葡萄糖和ATP纠正而可进一步予以分型。 试剂 (1) 100g/L 无菌葡萄糖。(2) 无菌等渗盐水。(3) 0. 48/L氨水(浓氨水0. 16m1加蒸馏水到100m1或用 HiCN 转化液。(4) 0.4mol/L ATP 生理盐水溶液。 操作 (1) 取 4 支小试管，每管加 1g/L 肝素 0. 02m1， 8 磅 5 分钟高压灭菌后，置 50C以下烘干。(2) 抽静脉血4m1无菌手续按 表1 32操作。血液加入后稍振摇混匀以冷藏离心后之血浆 0.2ml，加0.4g/

2、L氨水（或 转化液）4 . 8ml作空白，540nm比色求吸光度 A。测定管溶血=A测定管X （1 一红细胞压积）/ （A溶血对照 管X 4） 结果观察 计算各测定管的溶血率 （相当于空白对照管 100的比 值） ，其公式如下：测定管的溶血率=测定管 AX （1 一红细胞压积）/溶血 对照管 AX4式中分于是将测定管 A 值乘以血浆比值，换算成稀释 到全血量时的吸光度； 分母乘 4是溶血对照管稀释 100倍, 即测定管稀释25倍的系数。若溶血明显，A值过大，可以增加稀释倍数。 参考值 正常人血液在无菌条件下孵育 24小时（或 48小时）后， 溶血率很低，一般V 4. 0%,加葡萄糖或 ATP后，溶血率 更低（V O. 6%）。各类溶血性贫血。 临床意义 遗传性球形红细胞增多症自身溶血加快，但能够被葡 萄糖纠正；遗传性非球形红细胞溶血性贫血自身溶血增 快，其中 I 型由于 6- 磷酸葡萄糖脱氢酶活性下降可被葡 萄糖和ATP纠正，川型因丙酮酸激酶缺乏，溶血不被葡 萄糖纠正，但能被 ATP纠正；PNH自身免

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