大鼠脊髓右半横断损伤模型的制备及其评价

1、 大鼠脊髓右半横断损伤模型的制备及其评价 .、八、一 前言 脊髓损伤(spinal cord injury , SCI)是中枢神经系统的 严重创伤， 通过制备脊髓损伤模型来研究治疗脊髓损伤疾病是临 床上常用的必要手段， 而进行脊髓损伤基础研究的前提就是建立 一个适宜的脊髓损伤模型 1 。本研究结合现在临床治疗脊髓损 伤的需求，建立了脊髓右半横断损伤模型。 1. 材料与方法 1.1实验动物 健康成年SD大鼠共39只，雌雄不限，体重 250300g，由贵州医科大学动物实验中心提供，统一标准饲料 喂养。 1.2方法 将39只SD大鼠按随机数字表法分为假手术组、 脊髓右半横断损伤 1d、1w、2w、3

2、w、4w 共 6 组，每组 6 只，中 间淘汰 3 只。实验观察时间分别在脊髓损伤 1d、 1w、 2w、 3w、 4w。实验用动物购入后常规饲养 1周，观察其健康状况及四肢活 动情况，无异常后，各脊髓损伤组大鼠腹腔注射5%水合氯醛 ( 6ml/kg )麻醉，俯卧位固定于自制的木板上，常规消毒后剪去 背部脊椎区毛。 75%酒精消毒后，沿 T9T10 背部正中线棘突作 23cm长的切口，切开皮下脂肪和深筋膜直达棘突及棘上韧带， 将椎旁肌从棘突和椎板表面剥离牵开， 咬除棘突和椎板。 脊髓背 部正中剪开长3.5mm长纵向切口，沿正中作3mn长纵向切口贯穿 脊髓，横向剪断去除右侧脊髓。大鼠迅速出现摆尾

3、反射，右侧后 肢及躯体回缩扑动后右后肢瘫痪，提示造模成功。仔细止血，生 理盐水、甲硝唑依次冲洗创腔，逐层缝合硬膜、椎旁肌、筋膜及 皮肤，再次常规消毒皮肤，无菌纱布覆盖。假手术组只咬除棘突 和椎板不损伤脊髓，其他步骤同脊髓损伤组操作 2 。 1.3形态学观察 将各实验组SD大鼠在各时间点用5%水合 氯醛经腹腔麻醉后，切取以损伤处为中心长约 1.5cm 的脊髓组 织，4%多聚甲醛固定24h,冰冻切片，经Nissl染色后观察脊髓 损伤的病理变化。 1.4 行为学观察 本实验采用 BBB（ Basso， Beattie ， andBresnahanLocomotorRatingScale ） 动功能评

4、分法分别 对假手术组和脊髓损伤各组进行脊髓神经功能恢复情况的评价。 1.5统计学方法 本实验内容数据采用 SPSS17.0软件进行 统计处理。实验数据用均数土标准差（土 s）表示，各组数据采 用单因素方差分析（ ANOV）A ，以 P 脊髓损伤后的运动功 能评分是评估脊髓损伤程度、 观察脊髓损伤后损伤脊髓自我修复 与再生能力的重要措施。BBB评分是目前应用最广泛的脊髓损伤 评价方法， 可作为评价大鼠脊髓损伤后运动功能恢复的标准评分 方案之一， 其评价内容包括身体协调性和后肢 动幅度等多个方 面。但此方法易因为主观因素使其结果失真， 所以本研究利用双 盲、双人独立评分并取其平均值的方法， 尽可能提高运动功能评 价的准确性。 目前，国内外学者针对治疗脊髓损伤的实验研究很多， 涉及 到的研究面很广， 主要有干细胞移植 8 、局部植入神经支架 2 及药物治疗 9 等，但至今未找到行之有效的治疗方法。因此建 立一种可靠、 简单、 实用的脊髓损伤模型是研究脊髓损伤的先决 条件。本实验通过制备与临床上脊髓损伤患者相似的动物实验模 型，在一定程度上模拟人类脊髓损伤后的病理改变和临床表现。 为研究脊髓受损后神经修复及运动功能改善提供实验用模型。 综上所述， 在制备脊髓损伤模型时， 研究者应根据其实验目 的和具体实验条件做出科学的选择。 通过本实验方法建立大鼠脊 髓右半横断损伤模型， 制作过程简单