第十九节消化道寄生虫的病原检查

1、 第十九节第十九节 消化道寄生虫的病原检查消化道寄生虫的病原检查 主要是根据主要是根据 蠕虫的虫卵、幼虫、成虫或节片，蠕虫的虫卵、幼虫、成虫或节片， 原虫的滋养体、包囊、卵囊或孢子囊，原虫的滋养体、包囊、卵囊或孢子囊， 某些节肢动物；某些节肢动物； 可随粪便排出体外可随粪便排出体外 有些虫体可在肛周产卵，有些虫体可在肛周产卵， 绦虫孕节主动从肛门逸出过程中被挤破绦虫孕节主动从肛门逸出过程中被挤破 、虫卵可散落在肛周，、虫卵可散落在肛周， 所以，采用粪便检查或肛门周围检查寄生虫所以，采用粪便检查或肛门周围检查寄生虫 注意：注意： 保证粪便新鲜，一般不超过保证粪便新鲜，一般不超过2424小时小时

2、盛粪便的容器须干燥、洁净，无污染；盛粪便的容器须干燥、洁净，无污染； 容器外贴有标签，容器外贴有标签， 受检粪量一般为受检粪量一般为5 510g10g，或不少于，或不少于30g30g， 要严格按照粪检程序进行操作，以免漏检。要严格按照粪检程序进行操作，以免漏检。 1. 1. 直接涂片法直接涂片法 用以检查蠕虫卵、原虫的包囊和滋养体。方法简用以检查蠕虫卵、原虫的包囊和滋养体。方法简 便，连续作便，连续作3 3次涂片，可提高检出率。次涂片，可提高检出率。 （1 1）蠕虫卵检查蠕虫卵检查：滴一滴生理盐水于洁净的载：滴一滴生理盐水于洁净的载 玻片，用棉签棍或牙签挑取绿豆大小的粪便块，玻片，用棉签棍或牙

3、签挑取绿豆大小的粪便块， 在生理盐水中涂抹均匀；涂片的厚度以透过涂在生理盐水中涂抹均匀；涂片的厚度以透过涂 片约可辨认书上的字迹为宜。一般在低倍镜下片约可辨认书上的字迹为宜。一般在低倍镜下 检查，如用高倍镜观察，需加盖片。应注意虫检查，如用高倍镜观察，需加盖片。应注意虫 卵与粪便中异物的鉴别。虫卵都具有一定形状卵与粪便中异物的鉴别。虫卵都具有一定形状 和大小；卵壳表面光滑整齐，具固有色泽；卵和大小；卵壳表面光滑整齐，具固有色泽；卵 内含卵细胞或幼虫。内含卵细胞或幼虫。 （2 2）原虫检查）原虫检查 活滋养体检查：涂片应较薄，方法同查蠕虫卵。活滋养体检查：涂片应较薄，方法同查蠕虫卵。 气温愈接近

4、体温，滋养体的活动愈明显。必要时气温愈接近体温，滋养体的活动愈明显。必要时 可用保温台保持温度。可用保温台保持温度。 包囊的碘液染色检查：直接涂片方法同上，包囊的碘液染色检查：直接涂片方法同上， 以一滴碘液代替生理盐水。如碘液过多，可用吸以一滴碘液代替生理盐水。如碘液过多，可用吸 水纸从盖片边缘吸去过多的液体。若同时需检查水纸从盖片边缘吸去过多的液体。若同时需检查 活滋养体，可在用生理盐水涂匀的粪滴附近滴一活滋养体，可在用生理盐水涂匀的粪滴附近滴一 滴碘液，取少许粪便在碘液中涂匀，再盖上盖片。滴碘液，取少许粪便在碘液中涂匀，再盖上盖片。 涂片染色的一半查包囊；末染色的一半查活滋养涂片染色的一半

5、查包囊；末染色的一半查活滋养 体。体。 二、厚涂片透明法（改良加藤法）二、厚涂片透明法（改良加藤法） 取约取约5mg5mg（已用（已用100100目不锈钢筛除去粪渣）粪便，置于目不锈钢筛除去粪渣）粪便，置于 载玻片上，覆以浸透甘油孔雀绿溶液的玻璃纸片，轻载玻片上，覆以浸透甘油孔雀绿溶液的玻璃纸片，轻 压，使粪便铺开（压，使粪便铺开（202025mm25mm）。置于）。置于30303636温箱中约温箱中约 半小时或半小时或2525约约1 1小时。待粪膜稍干，即可镜检。小时。待粪膜稍干，即可镜检。 玻璃纸准备：将玻璃纸剪成玻璃纸准备：将玻璃纸剪成222230mm30mm大小的小片，浸大小的小片，浸

6、 于甘油孔雀绿溶液（含纯甘油于甘油孔雀绿溶液（含纯甘油100ml100ml、水、水100ml100ml和和3 3 孔雀绿孔雀绿1ml1ml的水溶液）中，至少浸泡的水溶液）中，至少浸泡2424小时，至玻璃纸小时，至玻璃纸 呈现绿色。呈现绿色。 使用此法需掌握粪膜的合适厚度和透明的时间。如粪膜使用此法需掌握粪膜的合适厚度和透明的时间。如粪膜 厚，透明时间短，虫卵难以发现；如透明时间过长，则厚，透明时间短，虫卵难以发现；如透明时间过长，则 虫卵变形，也不易辨认虫卵变形，也不易辨认。 定量透明法定量透明法 适用于各种粪便内蠕虫卵的检查及计数。此法系应用改良聚适用于各种粪便内蠕虫卵的检查及计数。此法系应

7、用改良聚 苯乙烯作定量板，大小为苯乙烯作定量板，大小为404030301.37mm1.37mm，模孔为一长圆，模孔为一长圆 孔，大小为孔，大小为8 84mm4mm，两端呈半圆形，所取的粪样平均为，两端呈半圆形，所取的粪样平均为 41.7mg41.7mg。操作时将大小约。操作时将大小约4 44cm4cm的的100100目尼龙网或金属筛目尼龙网或金属筛 网覆盖在粪便标本上，自筛网上用刮片刮取粪便，置定量网覆盖在粪便标本上，自筛网上用刮片刮取粪便，置定量 板于载玻片上，用一手的两指压住定量板的两端，将刮片板于载玻片上，用一手的两指压住定量板的两端，将刮片 上的粪便填满模孔，刮去多余粪便。掀起定量板，

8、载玻片上的粪便填满模孔，刮去多余粪便。掀起定量板，载玻片 上留下一个长形粪样，然后在粪条上覆盖含甘油孔雀绿上留下一个长形粪样，然后在粪条上覆盖含甘油孔雀绿 溶液的大小约为溶液的大小约为5.05.02.6cm2.6cm的玻璃纸条，展平后加压，使的玻璃纸条，展平后加压，使 玻璃纸下的粪便铺成长椭圆形。经玻璃纸下的粪便铺成长椭圆形。经1 12 2小时粪便透明后置小时粪便透明后置 镜下计数。将所得虫卵数镜下计数。将所得虫卵数2424，再乘上述粪便性状系数，再乘上述粪便性状系数， 即为每克粪便虫卵数。即为每克粪便虫卵数。 三、三、浮聚法：浮聚法：利用比重较大的液体，使原虫包囊或利用比重较大的液体，使原虫

9、包囊或 蠕虫卵上浮，集中于液体表面。常用的方法有两蠕虫卵上浮，集中于液体表面。常用的方法有两 种：种： （1 1）饱和盐水浮聚法：此法用以检查钩虫卵效果）饱和盐水浮聚法：此法用以检查钩虫卵效果 最好。用竹签取黄豆粒大小的粪便置于漂浮杯最好。用竹签取黄豆粒大小的粪便置于漂浮杯 （高（高3.5cm3.5cm，直径约，直径约2cm2cm的圆形直筒瓶）中，加入的圆形直筒瓶）中，加入 少量饱和盐水调匀，再慢慢加入饱和盐水到液面少量饱和盐水调匀，再慢慢加入饱和盐水到液面 略高于瓶口，但不溢出为止。此时在杯口覆盖一略高于瓶口，但不溢出为止。此时在杯口覆盖一 载玻片，静置载玻片，静置1515分钟后，将载玻片提

10、起并迅速翻分钟后，将载玻片提起并迅速翻 转，镜检转，镜检 。 （2）硫酸锌离心浮聚法：此法可用于检查 原虫包囊，球虫卵囊和蠕虫卵。取粪便约 1g，加1015倍的水，充分搅碎，按离心 沉淀法过滤，反复离心34次，至水清为 止，最后倒去上液，在沉渣中加入比重 1.18的硫酸锌液（33的溶液），调匀后 再加硫酸锌溶液至距管口约1cm处，离心1 分钟。用金属环取表面的粪液置于载玻片 上，加碘液一滴，镜检。 （3）蔗糖离心浮聚法：此法适用于检查粪便中隐 孢子虫的卵囊。取粪便约5g，加水1520ml，以 260目尼龙袋或4层纱布过滤。取滤液离心510分 钟，吸弃上清液，加蔗糖溶液（蔗糖500g，蒸馏水 3

11、20ml，石炭酸6.5ml）再离心，然后如同饱和盐水 浮聚法，取其表液膜镜检（高倍或油镜）。卵囊透 明无色，囊壁光滑，内有一小暗点和发出淡黄色的 子孢子。隐孢子虫的卵囊在漂浮液中浮力较大，常 紧贴于盖片之下，但1小时后卵囊脱水变形不易辨 认，故应立即镜检。也可用饱和硫酸锌溶液或饱和 盐水替代蔗糖溶液。 浓聚法浓聚法 1 1沉淀法：原虫包囊和蠕虫卵的比重大可沉集沉淀法：原虫包囊和蠕虫卵的比重大可沉集 于水底，有助于提高检出率。但比重较小的钩虫于水底，有助于提高检出率。但比重较小的钩虫 卵和某些原虫包囊则效果较差。卵和某些原虫包囊则效果较差。 （1 1）重力沉淀法：取粪便）重力沉淀法：取粪便202

12、030g30g、加水成混悬、加水成混悬 液，经金属筛（液，经金属筛（40406060孔）或孔）或2 2、3 3层湿纱布过滤层湿纱布过滤 ，再加清水冲洗残渣；过滤粪液在容器中静置，再加清水冲洗残渣；过滤粪液在容器中静置2525 分钟，倒去上液，重新加满清水，以后每隔分钟，倒去上液，重新加满清水，以后每隔1515 2020分钟换水一次（分钟换水一次（3 34 4次），直至上液清晰为止次），直至上液清晰为止 。最后倒去上液，取沉渣作涂片镜检。如检查包。最后倒去上液，取沉渣作涂片镜检。如检查包 囊，换水间隔时间宜延长至约囊，换水间隔时间宜延长至约6 6小时换一次小时换一次 （2 2）离心沉淀法：将上述

13、滤去粗）离心沉淀法：将上述滤去粗 渣的粪液离心（渣的粪液离心（15001500 2000rpm/min2000rpm/min）1 12 2分钟，倒去上分钟，倒去上 液，注入清水，再离心沉淀，如液，注入清水，再离心沉淀，如 此反复沉淀此反复沉淀3 34 4次，直至上液澄次，直至上液澄 清为止，最后倒去上液，取沉渣清为止，最后倒去上液，取沉渣 镜检。镜检。 （3 3）醛醚沉淀法：）醛醚沉淀法： 置粪便置粪便1 12g2g于小容器内，加水于小容器内，加水1010 20ml20ml调匀，将粪便混悬液经调匀，将粪便混悬液经2 2层纱布（或层纱布（或 100100目金属筛网）过滤，离心（目金属筛网）过滤，

14、离心（ 2000rpm/min2000rpm/min）2 2分钟；倒去上层粪液，保分钟；倒去上层粪液，保 留沉渣，加水留沉渣，加水10ml10ml混匀，离心混匀，离心2 2分钟；倒去分钟；倒去 上液，加上液，加1010甲醛甲醛7ml7ml。5 5分钟后加乙醚分钟后加乙醚3ml3ml ，塞紧管口并充分摇匀，取下管口塞，离，塞紧管口并充分摇匀，取下管口塞，离 心心2 2分钟，即可见管内自下而上分为分钟，即可见管内自下而上分为4 4层。层。 取管底沉渣涂片镜检。如检查原虫包囊，取管底沉渣涂片镜检。如检查原虫包囊， 可加卢戈氏液染色，加盖片镜检。可加卢戈氏液染色，加盖片镜检。 六、钩蚴培养法六、钩蚴培

15、养法 钩虫卵在适宜条件下可在短时间内孵出幼虫。钩虫卵在适宜条件下可在短时间内孵出幼虫。 如冷开水约如冷开水约1ml1ml于洁净试管内（于洁净试管内（1 110cm10cm），将滤），将滤 纸剪成与试管等宽但较试管稍长的纸剪成与试管等宽但较试管稍长的T T字型纸条，字型纸条， 用铅笔书写受检者姓名或编号于横条部分。取粪用铅笔书写受检者姓名或编号于横条部分。取粪 便约便约0.20.20.4g0.4g，均匀地涂抹在紧竖条纸条的上，均匀地涂抹在紧竖条纸条的上 部部2 23 3处，再将纸条插入试管，下端浸泡在水中处，再将纸条插入试管，下端浸泡在水中 ，以粪便不接触水面为度。在，以粪便不接触水面为度。在2

16、0203030条件下培条件下培 养。培养期间每天沿管壁补充冷开水，以保持水养。培养期间每天沿管壁补充冷开水，以保持水 面位置。面位置。3 3天后肉眼或放大镜检查试管底部。钩天后肉眼或放大镜检查试管底部。钩 蚴在水中常作蛇形游动，虫体透明。如未发现钩蚴在水中常作蛇形游动，虫体透明。如未发现钩 蚴，应继续培养观察至第蚴，应继续培养观察至第5 5天。气温太低时可将天。气温太低时可将 培养管放入温水（培养管放入温水（3030左右）中数分钟后，再行左右）中数分钟后，再行 检查。检查。 五、肛门拭子检查法五、肛门拭子检查法 适用于在肛周产卵（蛲虫），或常在肛门适用于在肛周产卵（蛲虫），或常在肛门 附近发现

17、带绦虫的虫卵检查。附近发现带绦虫的虫卵检查。 1 1棉签拭子法：先将棉签浸泡在生理盐水棉签拭子法：先将棉签浸泡在生理盐水 中，取出时挤去过多的盐水，在肛门周围中，取出时挤去过多的盐水，在肛门周围 擦拭，随后将棉签放入盛有饱和盐水的试擦拭，随后将棉签放入盛有饱和盐水的试 管中，用力搅动，迅速提起棉签，在试管管中，用力搅动，迅速提起棉签，在试管 内壁挤干盐水后弃去，再用饱和盐水法，内壁挤干盐水后弃去，再用饱和盐水法， 覆盖一载玻片，覆盖一载玻片，5 5分钟后取载玻片镜检。分钟后取载玻片镜检。 2 2 可将擦拭肛周的棉签放在盛清水的试可将擦拭肛周的棉签放在盛清水的试 管中，经充分浸泡，取出，在试管内

18、壁挤管中，经充分浸泡，取出，在试管内壁挤 去水分后弃去。试管静置去水分后弃去。试管静置1010分钟，或经离分钟，或经离 心后，倒去上液，取沉渣镜检。心后，倒去上液，取沉渣镜检。 3 3透明胶纸法：用长约透明胶纸法：用长约6cm6cm，宽约，宽约2cm2cm的的 透明胶纸粘擦肛门周围的皮肤，取下胶纸透明胶纸粘擦肛门周围的皮肤，取下胶纸 ，将有胶面平贴玻片上，镜检，将有胶面平贴玻片上，镜检。 八、淘虫检查法八、淘虫检查法 为考核驱虫疗效，常需从粪便中淘为考核驱虫疗效，常需从粪便中淘 取蠕虫进行鉴定与计数。取患者服药取蠕虫进行鉴定与计数。取患者服药 后后24247272小时的全部粪便，加水搅拌小时的全部粪便，加水搅拌 ，用筛（，用筛（4040目）或纱布滤出粪渣，经目）或纱布滤出粪渣，经 水反复冲洗后，倒在盛有清水的大型水反复冲洗后，倒在盛有清水的大型 玻皿内。检查混杂在粪渣中的虫体时玻皿内。检查混杂在粪渣中的虫体时 ，应在玻皿下衬以黑纸。，应在玻皿下衬以黑纸。 带绦虫孕节检查法带绦虫孕节检查法