乙型肝炎病毒抗体诊断胶体金法SOP标准操作程序

1、乙型肝炎病毒抗体诊断（胶体金法SOP）测定标准操作程序编写者：宿金涛日期：2012年3月1日一.原理：乙型肝炎病毒表面抗原、表面抗体、e抗原、e抗体、核心抗体检测试 剂盒（胶体金法）采用胶体金免疫层析分析技术、将五个诊断意义相关的试剂通过一个 包装组合在一起，同时进行乙型肝炎病毒五项标志物的检测， 在不影响各自性能的情况 下，便于客户的储存和使用。HBsAg检测试剂采用双抗体夹心法，试剂含有被事先固定于膜上测试区（T）的抗体。测试时，标本滴入试剂加样处，标本与预包被的胶体金颗粒结合的抗HBsAg抗体反应。然后，混合物随之在毛细效应下向上层析。 如是阳性，胶体金抗体在层析过程中 先于标本中的HB

2、sAg结合，随后家何物会被固定在膜上的抗 HBsAg抗体结合，在测 试区内（T）会出现一条紫红色带。这条带是 HBsAg抗体-HBsAg-HBsAg抗体金标粒 子的复合物在膜上结合形成的。如是阴性，则测试区内（T ）将没有紫红色带。无论HBsAg是否存在于标本中，一条紫红色带都会出现在指控内（ C）。质控区内（C）所 显现的紫红色条带是判定是否有足够标本， 层析过程是否正常的标准，同时也作为试剂 的内控标准。HBsAb检测试剂双抗原夹心法，试剂含有被事先固定于膜上测试区（T）的乙肝表面抗体。测试时，标本滴入试剂加样处，标本与预包被的胶体金颗粒结合的HBsAg反应。然后，混合物随之在毛细效应下向

3、上层析。 如是阳性，胶体金抗体在层析过程中先于标 本中的HBsAg结合，随后结合物会被固定在膜上的 HBsAg抗体结合，在测试区内（T） 会出现一条紫红色条带。这条带是 HBsAg-HBsAb-HBsAg金标粒子的复合物在膜上结 合形成的。如果阴性，则测试区内（T）将没有紫红色条带。无论HBsAg是否存在于标本 中，一条紫红色条带都会出现在质控区内（C）。质控区内（C）所显现的紫红色条带是判定 是否有足够标本，层析过程是否正常的标准，同时也作为试剂的内控标准。HBeAg检测试剂采用双抗体夹心法，试剂含有被事先固定于膜上测试区（T）的乙肝e抗体。测试时，标本滴入试剂加样处，标本与预包被的胶体金颗

4、粒结合的HBeAg抗体反应。然后，混合物随之在毛细效应下向上层析。 如是阳性，胶体金抗体在层析过程中先 于标本中的HBeAg结合，随后结合物会被固定在膜上的 HBeAg抗体结合，在测试区 内（T）会出现一条紫红色条带。这条带是HBeAg抗体-HBeAg-HBeAg抗体金标粒子的复 合物在膜上结合形成的。如果阴性，则测试区内（T）将没有紫红色条带。无论HBeAg抗 体是否存在于标本中，一条紫红色条带都会出现在质控区内（C）。质控区内（C）所显现的紫红色条带是判定是否有足够标本，层析过程是否正常的标准，同时也作为试剂的内控 标准。HBeAb,HBcAb检测试剂才有竞争抑制法，试剂含有被事先固定于膜

5、上测试区（T）的 抗体。测试时，血清或血浆标本滴入试剂加样处，随之标本在毛细效应下向上层析。如标本中含有相应的抗体，贝U同膜上测试区（T）的抗体竞争与预包被在金标粒子的相应抗体 反应。如果标本中没有相应抗体，预包被在金标粒子的复合物的相应抗原则同膜上测试 区（T）的抗体全部结合。阳性标本，测试区内（T）将没有紫红色条带，阴性标本，测试区 内（T）将会出现明显的紫红色条带。无论相应的抗体是否存在于标本中，一条紫红色条 带都会出现在质控区内（C）。质控区内（C）所显现的紫红色条带是判定是否有足够标本， 层析过程是否正常的标准，同时也作为试剂的内控标准。二试剂：英科新创乙肝五项检测卡（胶体金法）。规

6、格为25人份/盒。产品标准编号：YZB/国 0378-2009。三.操作步骤：1将待测标本从储存条件下取出，平衡至室温（18-25 C）并编号。2、将胶体金测试卡从包装盒中取出，打开铝箔包装袋，平置于台面上。编号（与 样品相对应）；3、用塑料滴管加2-3滴样本血清或血浆，加入试剂板的五个加样孔。4、等待紫红色条带的出现，测试结果应在测定开始后20分钟开始读取。30分钟后 判断无效。四参考范围：正常人为阴性。五、结果判定HBsAg HBsAb HBeAg阳性：两条紫红色条带出现。一条位于测试区（T）内，另一条位于质控区（C）。 阳性结果表明：标本中含有待测物质。阴性：仅质控区（C）出现一条紫红色

7、条带，在测试区（T）内无紫红色条带出现。 阴性结果表明：标本中检测不出待测物质无效：质控区（C）未出现紫红色条带，表明不正确的操作过程或试剂已变质损坏。 在此情况下，应再次仔细阅读说明书，并用新的试剂重新测试。如果问题仍然存在，应 立即停止使用此批号产品，并与当地供应商联系。注意：测试区（T）内的紫红色条带可显现出颜色深浅的现象。但是，在规定的观 察时间内，不论该色带颜色深浅，即使只有非常弱的色带也应判定为阳性结果。HBeAb HBcAb阳性：仅质控区（C）出现一条紫红色条带，在测试区（T）内无紫红色条带出现。 阳性结果表明：标本中含有待测物质。阴性：两条紫红色条带出现，一条位于测试区（T）内

8、，另一条位于质控区（C）。 阴性结果表明：标本中检测不出待测物质。无效：质控区（C）未出现紫红色条带，表明不正确的操作过程或试剂已变质损坏。在 此情况下，应再次仔细阅读说明书，并用新的试剂重新测试。如果问题仍然存在，应立即停止使用此批号产品，并与当地供应商联系序HBeMiHBcM出卿霄秤窜见楔式1*4FC）富性咼：惑毅越向恢昼；慢世明马鮭撻苦者；隹染摆 芻即緒刪耳际三HI.Simt2+急性或慢性乙甦拝畑站 嗯不脚，复制.慣躬劉 即昭的30沁3-过去和現在未感染过HBV电”1换境期!懸鳩可乩抗-映木出酣朮圧往眩皿E携带着-Tio*5t+往感梁过金；急性HK感染恢复期：由）少数标本仍看传塾性.KE

9、Y感染已过；抗KBs.M现前前蔚口期旷ox6*注射址乙肝吊自先疫；既往愿染；惻E性.T一急性冊逼后康复.6-m有L性垃寸画卑：慢性腸M带着；传探由玉10*15*9+既往感翼，仍有免貶九测愿染，恢良須*無六. 临床意义:乙肝肝炎病毒引起的感染带来了严重的公共卫生问题。母婴传播、性传播和血液传播是最主要的传播途径。尽早的发现感染可以有效的减少疾病的传播。乙肝五项检测卡（胶体金法）定性检测人血清、血浆中的乙肝表面抗原、表面抗体、 e抗体、核心抗体、用于乙型肝炎病毒感染的辅助诊断。七. 病人及样本要求：1 、本品适用于血清、血浆样本，血浆样本对临床常用抗凝剂（EDTA肝素、枸椽酸钠）无要求；样本的采集

10、须遵循常规的医疗样本的采集方法并遵守相关的医学规定。2、采集静脉血样本必须在无菌条件下操作，并避免样品溶血。3、如果血清和血浆样品收集后 7天内检测，样品须放在2-8 C保存；大于7天须 20 C以下冷冻保存。4、溶血、粘稠及高脂标本不适于本试剂。含特珠物质（如强氧化剂）的标本可能 会导致检测结果不稳定，在检测前须清除。八. 注意事项:1、 检测必须符合实验室管理规范和物物安全守则的规定，操作时必须戴手套、穿工 作服、严格健全和执行消毒隔离制度。2、乙型肝炎病毒表面抗原、表面抗体、 e抗原、e抗体、核心抗体检测试剂盒（胶 体金法）适用于测试血清或血浆标本，其他标本或溶液进行检测可能出现异常结 果。3、由于在技术上和操作上可能出现的失误， 同时也由于标本中存在干扰物质， 检测 结果有可能错误。4、请保证适量的标本用于检测，过多或过少的标本量都有可能导致结果的偏差。5、测试结果应在测定开始后20分钟读取，30分钟后判定无效。6本产品为目视读取结果，为保证判定结果的正确，请勿在光线昏暗处对结果进行 判读。7、试剂可在室温下保