实验1高吸光度示差分析法

1、实验二 高吸光度示差分析法一、目的：通过标准曲线的绘制及试样溶液的测定， 了解高吸光度示差分析法的基本原理， 方法优点。掌握 721 型分光光度计的使用方法。二、原理：普通吸光光度法是基于测量试样溶液与试剂空白溶液 （或溶剂） 相比较的吸 光度，从相同条件下所作的标准曲线来计算被测组份的含量， 这种方法的准确度 一般不会优于12%，因此，它不适合于高含量组份的测定。为了提高吸光光度法测定的准确度， 使其适合于高含量组分的测定， 可采用 高吸光度示差分析法。 示差法与普通吸光光度法的不同之处， 在于用一个待测组 份的标准溶液代替试剂空白溶液作为参比溶液， 测量待测量溶液的吸光度。 它的 测定步骤

2、如下：（ 1 ）在仪器没有光线通过时 （接受器上无光照射时） 调节透光率为 0，这与比 色法或普通分光光度法相同。将一个比待测溶液（浓度为 C +山）稍稀的参比溶液（浓度为 C）放在 仪器光路中，调节透光率为 100% 。（3） 将待测量溶液（或标准溶液）推入光路中，读取表现吸光度 Af。表观吸光度Af实际上是由 C引起的吸收大小，可表达为：Af=ab c上式说明， 待测溶液（或标准溶液） 与参比溶液的吸光度之差与这两次溶液 的浓度差成正比。无论普通吸光度或高吸光度示差法， 只要符合比尔定律， 而且测量误差仅仅 是由于透光率 （或吸光度） 读数的不确定所引起的， 则可以方便地计算出分析的 误差

3、。仪器刻度上透光率读数改变数（dT）所引起的浓度误差de为绝对误差，它 与透光率有关，其关系式容易由比耳定律推得：Af=ab Zje=k lgT=-A f=-k 0.43InT=-k ,0.43deKT dT式中k为标准曲线（AC）的斜率。实验中三条曲线的三个 k很接近。根 据k值及上述关系可以计算出实验中各点的绝对误差（假设透光率读数误差为 I%，即 dT=0.01 ）。de对于化学工作者来说，更有意义的是浓度的相对误差（c）,或者相对百分误de差（e X100）。浓度相对百分误差与参比溶液的浓度关系密切。随着有色参比溶 液浓度的增加（或 A的增加），相对百分误差也随之减小。当所用参比溶液的

4、 A=1.736时，最低的相对百分误差也可减小至 0.25%。由此可见了，差示法中 高吸光度法可达到容量分析和重量分析的准确度。三、仪器与试剂721型分光光度计（附2只1厘米比色皿）010ml微量滴定管1支（刻度准确至0.005ml ）25ml容量瓶X 160.2500M Cr （NO 3）3四、实验步骤1、标准溶液的配制在 16 支 25ml 容量瓶中，用微量滴定管分别放入 1.0,2.0,3.0 ，4.0，5.0 ， 6.0，7.0，8.0，9.0，10.0，11.0，12.0 ，13.0 ，14.0 ，15.0 ，16.0mI ，0.2500 M Cr（NO3）3 溶液（也可放置相接近的

5、毫升数，但须正确读到 0.005mI ），再 用蒸馏水稀释至刻度，摇匀。2、标准曲线的绘制及待测溶液的测定选择一对合适的厚度为 Icm 比色皿，在 550nm 波长下分别测量下列三组溶 液的吸光光度。（1）以蒸馏水为参比溶液，测量 1.05.0m1 0.2500M Cr （No 3）3/25mI 溶液的吸光度。（2）以 5.0m1 0.2500M Cr（NO3）3/25m1 溶液为参比溶液，测量 6.0 11.0mI0.2500M Cr （NO 3）3/25mI 溶液的吸光度。（3）以 10.0mI 0.2500M Cr（NO3）3/25mI 溶液为参比溶液，测量 11.0 16.0mI 0.

6、2500M Cr （NO 3）3/25mI 溶液及待测溶液的吸光度。（4）为了消除由于标准溶液浓度、 液槽厚度与光学性能不一致所带来的误差， 常采用中性滤光片代替参比溶液，以获得良好的结果。以中性滤光片（相对空气其 A 约为 1.0）代替参比溶液，测量 11-16 毫升 0.2500 M Cr （NO3）3/25mI 溶液及试样溶液的吸光度。 （注意：应固定中性滤 光片的位置）五、结果与处理1、在同一坐标纸上绘制（I） - （3）组的A-C标准曲线。2、从（ 3）组标准曲线上求算待测溶液的溶度。3、根据（ 1） -（3）组标准曲线，分别求其 K 值，然后计算出每个实验点dede的e X100，绘制（1） - （3）组e X100T图，从图可以引出什么结论。六、思考题.1、在普通分光光度法中，若透光率读数改变0.01，最小误差点（即T=36.8% ） 的相对百分误差是多少？2、根据实验数据，指出哪