蜱论文蜱雄蜱性腺长角血蜱森林革蜱cDNA文库饱血因讲解

1、蜱论文：两种硬蜱雄性性腺功能因子的研究【中文摘要】交配是蜱类繁殖过程中的关键环节，诱发雌蜱发生一系列的生理变化，并最终产卵。雄蜱性腺分泌物在交配过程中发挥 着十分重要的作用，一方面保护、活化精子，促进授精,刺激卵巢发育 和卵黄发生，另一方面对雌蜱的生理行为等产生影响，如诱导雌蜱快 速吸血,加速产卵等。本文的综述部分在简要描述雄蜱性腺形态结构 和分泌物生化特性基础上，系统阐述了雄蜱性腺分泌物中各种功能因 子的研究现状，着重论述其在精子获能、诱导雌蜱吸血、促进雌蜱卵 巢发育和卵黄发生方面的进展，并对未来的研究提出了展望，以期为 今后此领域研究开拓思路，促进防治工作的开展。本研究以河北省广 泛分布的

2、两种硬蜱一长角血蜱和森林革蜱为研究对象。利用体腔注 射、酶联免疫分析对饱血雄蜱性腺分泌物的功能活性进行了研究；利用cDNA文库构建、cDNA末端快速扩增、反转录PCR实时定量PCR 技术扩增得到饱血因子的全长序列并对其阶段和组织表达进行了系 统分析；利用液相色谱-质谱联用技术对长角血蜱饱血雄蜱性腺蛋白 质组进行了分析。以上工作为进一步探索蜱类引发雌蜱交配效应的功 能物质以及利用它们开发抗蜱疫苗奠定了基础。为了进一步加深对蜱类饱血因子的了解，并为蜱类饱血因子序列保守性研究提供基础，同 样采【英文摘要】 Mati ng is an importa nt prerequisite for tickr

3、eproduction,andinitiatesa cascade of physiologicalchangesin female that eventually leads to oviposition.Male accessorygland (MAG) plays an important role during mating,which protects and activates the spermatozoa,promotes ovary development and vitellogenesis, exerts inductivityeffects onfemale repro

4、ductive physiological activity,i nduces or accelerates rapid feedi ng,ovulati on,o vipositi on and many other functions. The morphological features and the secreti.【关键词】蜱 雄蜱性腺 长角血蜱 森林革蜱cDNA文库 饱血因 子LC-MS生殖【英文关键词】 tick male gonad Haemaphysalis lon gicor nis Dermace ntor silvarum cDNA library en gorgem

5、e nt factor LC-MS reproducti on【索购全文】联系圖Qi: 138113721闻Q2: 139938848【目录】两种硬蜱雄性性腺功能因子的研究摘要4-6 Abstract 6-8 第一章 综述 12-201.1 引言 121.2雄蜱生殖腺形态结构及其分泌物生化特性12-141.3 MAG分泌物的功能因子14-181.3.1与精子发育有关的功能因子14-151.3.2 促进雌蜱吸血的功能因子15-161.3.3 促进雌蜱卵巢发育和卵黄发生的功能因子16-171.3.4 MAG的其他功能因子17-181.4昆虫雄性生殖腺功能因子18-191.5存在的问题及展望19-2

6、0 第二章长角血蜱雄蜱性腺分泌物交配效应研究20-312.1引言202.2材料与方法20-222.2.1 长角血蜱的采集与喂养20-21222 MAG粗提液的收集21223粗提液的生物活性测定212.2.4不同剂量粗提液生物活性测定212.2.5双抗体夹心ELISA法测定样品中Vn或Vg含量21-222.2.6 数据分析 222.3实验结果 22-302.3.1 粗提液的生物活性测定22-232.3.2不同剂量粗提液生物活性测定23-302.4结果分析与讨论30-31 第三章构建两种硬蜱生殖腺全长cDNA文库31-393.1引言313.2材料与方法31-333.2.1 实验材料 31-323.

7、2.2 总 RNA提取 323.2.3mRNA屯化323.2.4 cDNA 文库构建 323.2.5 连接转化323.2.6 库容量测定 32-333.2.7 重组率测定 333.3 实验结果与分析 33-383.3.1 总RNA提取33-353.3.2 cDNA 文库构建35-363.3.3库容量及重组率的测定 36-383.4结果分析与讨论38-39 第四章 两种硬蜱饱血因子的基因克隆39- 534.1引言39-404.2 材料与方法 40-424.2.1 两种硬蜱饱血因子完整编码序列(coding sequenee, CDS)克隆40- 414.2.2 HIEF a在各发育阶段及雌蜱各组织表达研究(RT-PCR 414.2.3 HIEF a在饱血雄蜱各组织研究(Real-timePCR 41-424.3 结果与分析 42-524.3.1 HIEF a 和 DsEFa 基因克隆42-484.3.2 EF a组织表达性分析48-524.4结果分析与讨论52-53第五章两种硬蜱饱血雄蜱性腺cDNA文库随机筛库53-555.1引言535.2材料与方法535.3结果与讨论53-55第六章 长角血蜱饱血性腺总蛋白鉴定55-606.1 引言55 6.2 材料与方法 55-56621 实验材料 55 6 22 实验方法55-566.3实验结果与分析 56-60