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文档简介
1、临床检验分析仪器临床检验分析仪器 临床化学分析仪临床化学分析仪 电解质分析仪电解质分析仪 血气分析仪血气分析仪 血液学测定装置血液学测定装置 比色和分光光度仪比色和分光光度仪 朗伯朗伯-比尔定律及其应用比尔定律及其应用 单色光经过有色溶液时,透过溶液单色光经过有色溶液时,透过溶液 的光强度不仅与溶液的浓度有关,的光强度不仅与溶液的浓度有关, 而且还与溶液的厚度及溶液本身对而且还与溶液的厚度及溶液本身对 光的吸收性能有关:光的吸收性能有关: A = KCb A为消光值为消光值:A= lg(I0/I); K为溶液的消光(吸收)系数;为溶液的消光(吸收)系数; C为溶液的浓度;为溶液的浓度; b为光
2、程,即溶液的厚度(有时也为光程,即溶液的厚度(有时也 以以L表示)。表示)。 摩尔消光系数摩尔消光系数 一种有色溶液对于一定波长(单色光)的一种有色溶液对于一定波长(单色光)的 入射光的入射光的K值具有一定数值。值具有一定数值。 若溶液的浓度以若溶液的浓度以mol/l表示,溶液厚度以表示,溶液厚度以cm 表示,则此时的表示,则此时的K值称为摩尔消光系数,它值称为摩尔消光系数,它 是有色化合物的重要特征之一。是有色化合物的重要特征之一。 光电比色计的基本原理光电比色计的基本原理 若先配制一已知浓度的标准溶液,根据若先配制一已知浓度的标准溶液,根据 朗伯朗伯-比尔定律,有:比尔定律,有:As=Ks
3、Csbs。 待测浓度的溶液:待测浓度的溶液:Ax=KxCxbx。 如使如使bx=bs,Kx=Ks, ,即光程和溶液已知, 即光程和溶液已知, 则有则有 As/Ax=Cs/Cx 或或 : Cx=(Ax/As)Cs 光电比色计结构光电比色计结构 光源与聚光镜光源与聚光镜 光源强度保持不变是获得准确测定结果的重要因光源强度保持不变是获得准确测定结果的重要因 素素(稳压器稳压器)。光电比色计通常用。光电比色计通常用612V的钨丝灯的钨丝灯 泡作发光光源泡作发光光源(3201100nm)。聚光镜使从光源射。聚光镜使从光源射 来的光成为平行光。来的光成为平行光。 光 源 滤 光 片 比 色 皿 光 电 检
4、测器 放 大 显 示 滤光片滤光片 滤光片的作用是只让一定波长范围的光透过,滤光片的作用是只让一定波长范围的光透过, 而将其余不需要的波长光滤去。常用的滤光片而将其余不需要的波长光滤去。常用的滤光片 有吸收滤光片、截止滤光片、复合滤光片等。有吸收滤光片、截止滤光片、复合滤光片等。 比色皿比色皿 比色皿是用来盛装所分析的样品液的。在可见比色皿是用来盛装所分析的样品液的。在可见 光范围内,常用无色光学玻璃或塑料制作;而光范围内,常用无色光学玻璃或塑料制作;而 在紫外区,需要用能透紫外线的材料,如石英在紫外区,需要用能透紫外线的材料,如石英 玻璃来制作。由于经常用来盛装各种化学溶液,玻璃来制作。由于
5、经常用来盛装各种化学溶液, 比色皿除了应具有良好的透光特性之外,还应比色皿除了应具有良好的透光特性之外,还应 有较强的耐腐蚀性。有较强的耐腐蚀性。 光电检测器光电检测器 在检验仪器中常使用的光电检测器有光在检验仪器中常使用的光电检测器有光 电池、光电管、光电倍增管等,是利用电池、光电管、光电倍增管等,是利用 光电效应把光能转化为电能的器件,它光电效应把光能转化为电能的器件,它 必须满足以下三个条件:必须满足以下三个条件: 光电转换必须满足恒定的函数关系。光电转换必须满足恒定的函数关系。 波长响应范围宽。波长响应范围宽。 灵敏度高,响应速度快,产生的电信号易灵敏度高,响应速度快,产生的电信号易
6、于检测和放大,噪音低。于检测和放大,噪音低。 分光光度法分光光度法 能从含有各种波长的混合光中将每一单色光分离能从含有各种波长的混合光中将每一单色光分离 出来并测量其强度的仪器称为出来并测量其强度的仪器称为分光光度计分光光度计。 利用单色分光器产生波长可连续变化的电磁波照利用单色分光器产生波长可连续变化的电磁波照 射溶液。因溶液中的分子吸收能量而在宏观上表射溶液。因溶液中的分子吸收能量而在宏观上表 现为透射光强度变小。若将照射前后光强度的变现为透射光强度变小。若将照射前后光强度的变 化转变为电信号并记录下来,就可以得到一张光化转变为电信号并记录下来,就可以得到一张光 强度变化对波长关系曲线图强
7、度变化对波长关系曲线图分子吸收光谱图。分子吸收光谱图。 由于分子吸收光谱与物质本身的结构有关,吸光由于分子吸收光谱与物质本身的结构有关,吸光 度的大小与物质的含量有关,利用吸收光谱的形度的大小与物质的含量有关,利用吸收光谱的形 状和吸收程度的大小即可对物质进行定性和定量状和吸收程度的大小即可对物质进行定性和定量 的分析。这种方法就叫做分光光度法。的分析。这种方法就叫做分光光度法。 分光光度计 紫外可见光分光光度计紫外可见光分光光度计 光焰光度计光焰光度计 原子吸收分光光度计原子吸收分光光度计 荧光分光光度计荧光分光光度计等 分光光度计仪器结构分光光度计仪器结构: l 光源:要求能提供所需波长范
8、 围的连续光谱,稳定而有足够 的强度。 l 单色器(分光系统):单色 器是指能从混合光波中分解出 来所需单一波长光的装置,由 棱镜或光栅构成。 l 狭缝:狭缝是指由一对隔板在 光通路上形成的缝隙,用来调 节入射单色光的纯度和强度, 也直接影响分辩力。 l 比色环:比争环也叫样品池, 吸收器或比色皿,用来盛溶液, 各个杯子壁厚度等规格应尽可 能完全相等,否则将产生测定 误差。玻璃比色杯只适用于可 见光区,在紫外区测定时要用 石英比色杯。 l检测器系统:有许多金属能在光的 照射下产生电流,光愈强电流愈大, 此即光电效应。因光照射而产生的电 流叫做光电流。受光器有两种,一是 光电池,二是光电管。 分
9、光光度计仪器结构分光光度计仪器结构: l 从从光源光源发出的光,经发出的光,经单色器 单色器 (分光系统)(分光系统)色散后,变为色散后,变为 单色光。单色光经过比色皿单色光。单色光经过比色皿 中的被测溶液后照射到光电中的被测溶液后照射到光电 管上。光电管将这一随溶液管上。光电管将这一随溶液 浓度不同而变化的光信号转浓度不同而变化的光信号转 换成电信号,再经放大器,换成电信号,再经放大器, 由微安表将透光度由微安表将透光度T或吸光或吸光 度度A显示出来。显示出来。 l 调节单色器可以使不同波长调节单色器可以使不同波长 的单色光穿过比色皿,从而的单色光穿过比色皿,从而 测量比色皿中的样品对不同测
10、量比色皿中的样品对不同 波长的光的吸光度。波长的光的吸光度。 l 单色器的主要部件是玻璃棱镜或衍射单色器的主要部件是玻璃棱镜或衍射 光栅,转动不同角度可获得不同波长的光栅,转动不同角度可获得不同波长的 单色光。单色光。 l光源最常用的是钨灯(光源最常用的是钨灯(360-800nm),), 紫外线时要增加氢灯或氘灯来产生紫外紫外线时要增加氢灯或氘灯来产生紫外 光。要求能提供所需波长范围的光。要求能提供所需波长范围的连续光连续光 谱,稳定而有足够的强度谱,稳定而有足够的强度。 光源;单色器;狭缝;样品池;检测器系统光源;单色器;狭缝;样品池;检测器系统 分光光度计调零和调满刻度分光光度计调零和调满
11、刻度 在实际使用中,分光光度计需在实际使用中,分光光度计需 要进行调零要进行调零(T=0)和调满刻度和调满刻度(T =100%)。 调零时,关上光门使之没有光调零时,关上光门使之没有光 线射入探测器,调节电位器线射入探测器,调节电位器2, 提供一个合适的电压以抵消光提供一个合适的电压以抵消光 电管本身产生的暗电流或其它电管本身产生的暗电流或其它 原因造成的零漂,使输出信号原因造成的零漂,使输出信号 为零为零(T=0)。 调满刻度时,将参比溶液置于调满刻度时,将参比溶液置于 光路中,通过调节电位器光路中,通过调节电位器1来调来调 节光源灯两端的电压,改变光节光源灯两端的电压,改变光 源灯的亮度使
12、输出信号为满刻源灯的亮度使输出信号为满刻 度。度。 常用的分光光度计的光学系统 有:单光束光学系统、双光束 光学系统和双波长/双光束系统 等。由于对不同波长都需要作 调零,采用单光束光学系统需 要把参比溶液皿和样品皿来回 的换位,不利于光谱的扫描。 使用双光束光学系统可以便于 光谱的扫描. 721分光光度计外形及 内部结构 稳压电路板稳压电路板 KMn04KMn04的分子光吸收谱的分子光吸收谱 火焰光度计火焰光度计 每一元素都有其特定发射光谱,其谱波长为特异性的。每一元素都有其特定发射光谱,其谱波长为特异性的。 以火焰为激发源,对某些金属元素的发射光谱进行光度分析以火焰为激发源,对某些金属元素
13、的发射光谱进行光度分析 的方法称为的方法称为火焰光度法火焰光度法。 火焰光度法火焰光度法是用火焰作为激发光源的原子发射光谱法。该法是用火焰作为激发光源的原子发射光谱法。该法 系选择适当的方式将分析试样引入火焰中,依靠火焰(系选择适当的方式将分析试样引入火焰中,依靠火焰( 1800-2500)的)的热效应和化学作用热效应和化学作用将试样蒸发、离子化、将试样蒸发、离子化、 原子化和激发发光。根据特征谱线的发射强度原子化和激发发光。根据特征谱线的发射强度I与样品中该与样品中该 元素浓度元素浓度c之间的关系式之间的关系式I=acb(a、b为常数为常数),将未知试样待,将未知试样待 测元素分析谱线的发射
14、强度与一系列已知浓度标准样的测量测元素分析谱线的发射强度与一系列已知浓度标准样的测量 强度相比较,进行元素的火焰光谱定量分析。测定所用的装强度相比较,进行元素的火焰光谱定量分析。测定所用的装 置为火焰光度计。置为火焰光度计。 样品经喷口成雾状,与燃料混合进样品经喷口成雾状,与燃料混合进 入火焰,待测碱金属原子离解生成入火焰,待测碱金属原子离解生成 基态原子,并被火焰激发,辐射出基态原子,并被火焰激发,辐射出 自身的特征谱线。用单色器或滤光自身的特征谱线。用单色器或滤光 片选择出所测元素的特征谱线,送片选择出所测元素的特征谱线,送 入光电检测器,经放大并显示结果。入光电检测器,经放大并显示结果。
15、 雾化器与混合室、火焰共同组成火雾化器与混合室、火焰共同组成火 焰原子化器,是样品焰原子化器,是样品原子化的场所原子化的场所。 光 源 原 子 化 器 单 色 器 检 测 器 信 号 处 理 检 测 装 置 样品 原子吸收分光光度计原子吸收分光光度计 原子吸收光谱法(原子吸收光谱法(Atomic Absorption Spectrometry,AAS)是以测)是以测 量量气态气态基态原子外层电子共振线的吸收作为基础的分析方法,可对基态原子外层电子共振线的吸收作为基础的分析方法,可对 60多种元素作微量(多种元素作微量(ng/ml)定量测定(符合朗伯)定量测定(符合朗伯-比耳定律)。原比耳定律)
16、。原 子从基态到激发态吸收特定波长的光使入射光变弱、变暗,通常为子从基态到激发态吸收特定波长的光使入射光变弱、变暗,通常为 线状光谱。线状光谱。 溶液是分子吸收光谱。溶液是分子吸收光谱。 元素在热解石墨炉中被加热原子化,成为基态原 子蒸汽,对空心阴极灯发射的特征辐射进行选择 性吸收。在一定浓度范围内,其吸收强度与试液 中该元素的含量成正比。其定量关系可用郎伯-比 耳定律,A= -lg I/I o= -lgT = KCL ,式中I为透射 光强度;I0为发射光强度;T为透射比;L为光通 过原子化器光程(长度),每台仪器的L值是固定的; C是被测样品浓度;所以A=KC。 利用待测元素的共振辐射,通过
17、其原子蒸汽,测 定其吸光度的装置称为原子吸收分光光度计。 原子吸收分光光度计原子吸收分光光度计 荧光荧光 荧光分光光度计是用于扫描液相荧光标记物所发荧光分光光度计是用于扫描液相荧光标记物所发 出的荧光光谱的一种仪器。出的荧光光谱的一种仪器。 物质经高能量射线(如紫外线)激发后,所发出物质经高能量射线(如紫外线)激发后,所发出 的比原激发光波较长的可见光叫荧光。任何能发的比原激发光波较长的可见光叫荧光。任何能发 出荧光的分子都具有两种特征光谱,激发光谱和出荧光的分子都具有两种特征光谱,激发光谱和 发射光谱。发射光谱。 由高压汞灯或氙灯发出的紫外光和蓝紫光经滤光由高压汞灯或氙灯发出的紫外光和蓝紫光
18、经滤光 片照射到样品池中,激发样品中的荧光物质发出片照射到样品池中,激发样品中的荧光物质发出 荧光,荧光经过滤过和反射后,被光电倍增管所荧光,荧光经过滤过和反射后,被光电倍增管所 接受,然后以图或数字的形式显示出来。接受,然后以图或数字的形式显示出来。 光源光源 激发单色器激发单色器 样品杯样品杯 发发 射射 单单 色色 器器 检检 测测 器器 电电 子子 放放 大大 及及 控控 制制 显显 示示 荧光分光光度计荧光分光光度计 激发单色器从光源中选择出合适波长的激发光,投射到样品上。样品激发单色器从光源中选择出合适波长的激发光,投射到样品上。样品 杯里的荧光物质吸收了激发光后,被激发发出该物质
19、的荧光光谱。杯里的荧光物质吸收了激发光后,被激发发出该物质的荧光光谱。 荧光被发射单色器选出,由光电检测器将此正比于物质浓度的荧光强荧光被发射单色器选出,由光电检测器将此正比于物质浓度的荧光强 度转换成电信号,经放大后显示。度转换成电信号,经放大后显示。 激发光束和荧光光束相垂直,以防光源产生的激发光到达检测器。激发光束和荧光光束相垂直,以防光源产生的激发光到达检测器。 自动生化分析仪自动生化分析仪 生化分析仪是临床诊断常用的重要仪器之一。它生化分析仪是临床诊断常用的重要仪器之一。它通过对通过对 血液和其他体液的分析来测定各种生化指标血液和其他体液的分析来测定各种生化指标:如血红蛋白、胆:如血
20、红蛋白、胆 固醇、肌肝、转氨酶、葡萄糖、无机磷、淀粉酶、白蛋白、钙固醇、肌肝、转氨酶、葡萄糖、无机磷、淀粉酶、白蛋白、钙 等。等。 自动生化分析仪就是把生化分析中的取样、加试剂、去干自动生化分析仪就是把生化分析中的取样、加试剂、去干 扰物、混合、保温反应、检测、结果计算和显示、以及清洗等扰物、混合、保温反应、检测、结果计算和显示、以及清洗等 步骤进行自动化的仪器。步骤进行自动化的仪器。 目前,绝大多数生化分析仪都是目前,绝大多数生化分析仪都是基于光电比色法基于光电比色法的原理进的原理进 行工作的。其结构可粗略看成是由光电比色计或分光光度计加行工作的。其结构可粗略看成是由光电比色计或分光光度计加
21、 微机两部分组成。由于整个测试过程是自动完成的,所以除微微机两部分组成。由于整个测试过程是自动完成的,所以除微 机外,在采样、进样、反应等过程使用了一些特殊的部件。机外,在采样、进样、反应等过程使用了一些特殊的部件。 生化分析仪分类 可从不同的角度进行分类。可从不同的角度进行分类。 按反应装置的结构:按反应装置的结构:连续流动式、分立式和离心式连续流动式、分立式和离心式三类。三类。 按自动化程序:按自动化程序:全自动、半自动和手工型全自动、半自动和手工型三类。三类。 按同时可测定项目:按同时可测定项目:单通道和多通道单通道和多通道两类。单通道每次只能检测一个两类。单通道每次只能检测一个 项目,
22、但项目可以更换。多通道每次同时可以测多个项目。项目,但项目可以更换。多通道每次同时可以测多个项目。 按仪器的复杂程度及功能:按仪器的复杂程度及功能:小型、中型和大型小型、中型和大型三类。小型一般为单通三类。小型一般为单通 道、半自动及专用分析仪。中型为单通道道、半自动及专用分析仪。中型为单通道(可更换几十个项目可更换几十个项目)或多通或多通 道,常同时可测道,常同时可测2-10个项目,大型均为多通道仪器,同时可测个项目,大型均为多通道仪器,同时可测10个以个以 上项目,分析项目可自选或组合,不仅能进行临床生化检验,而且可上项目,分析项目可自选或组合,不仅能进行临床生化检验,而且可 进行药物监测
23、及进行免疫球蛋白的测定。进行药物监测及进行免疫球蛋白的测定。 按规定程序可变与否:按规定程序可变与否:程序固定式和程序可变程序固定式和程序可变式式分析仪两类。分析仪两类。 连续流动式自动生化分析仪连续流动式自动生化分析仪 单通道连续流动式生化分析仪是在微机控制下,通过比例泵将标单通道连续流动式生化分析仪是在微机控制下,通过比例泵将标 本和试剂吸到连续的管道系统中,在一定的温度下,在管道内完本和试剂吸到连续的管道系统中,在一定的温度下,在管道内完 成混合,去除干扰物,保温反应,比色测定,信号放大,运算处成混合,去除干扰物,保温反应,比色测定,信号放大,运算处 理,最后将结果显示并打印出来。因为这
24、种检测分析是一个标本理,最后将结果显示并打印出来。因为这种检测分析是一个标本 跟着一个标本在连续流动状态下进行的,故称之为连续流动式分跟着一个标本在连续流动状态下进行的,故称之为连续流动式分 析仪。析仪。 样品和样品之间可用空气来隔离,叫空气分段式系统;也可用空样品和样品之间可用空气来隔离,叫空气分段式系统;也可用空 白试剂或缓冲液来隔离,叫非分段式系统。白试剂或缓冲液来隔离,叫非分段式系统。 分立式自动生化分析仪分立式自动生化分析仪 分立式是指按手工操作的方式编排程序,并以有节奏的机械操作 代替手工,各环节用传送带连接起来,按顺序依次操作。放在传 送带上的编码试管架,可使试管升降。当反应试管
25、加好样品后, 即向保温水浴移动,至一定部位(在匀速行进中,距离即等于反应 时间)时,又由另外的注射加液器加入反应试剂,并伸入搅拌器搅 拌均匀。反应完毕后,由泵依次吸至流动比色池中进行比色,经 信号处理后,记录或打印出结果。 离心式自动生化分析仪离心式自动生化分析仪 全部检验过程在一个类似离心机转头样 的圆盘上进行:将样品和试剂放在特制 的圆盘上(作为转头),当离心机开动后, 圆盘内的样品和试剂受离心作用而相互 混合,并进行反应。最后流入圆盘外圈 的比色槽中,通过比色计进行检测。在 整个分析过程中,各样品和试剂的混合, 反应和检测的每一步骤,几乎都是同时 完成的。 特点是微量(样品150m L,
26、试剂120 300m L)、快速(每小时大于600个样品)。 血气和血气分析仪血气和血气分析仪 测量血气的意义测量血气的意义 呼吸是新陈代谢的重要部分,也是机体对O2的摄 吸与消耗(获得能量)及CO2的产生与排出的过程。 呼吸分内呼吸和外呼吸两个环节,内呼吸为组织 中毛细血管与组织间的气体交换以及细胞氧化, 外呼吸为肺泡通气和肺泡壁的气体交换。 血液是运送从大气吸入的O2到组织、同时又运送 组织排放的CO2到肺部以排出体外的运输工具。 血液中O2和CO2是反映人体代谢状态的重要指标。 血液中的氧 氧在血液中的两种存在形式: 物理溶解(4) 与血红蛋(Hb)结合成HbO2(96%) 血氧饱和度:
27、 HbO2(HbO2+Hb) 或:(O2含量物理溶解的O2量) O2含量; 正常人:动脉0.930.98,静脉0.60.7。 血气分析中测量的氧分压,是指血浆中物理溶解 O2的张力,其参考范围在10.6613.33kPa(80 100mmHg)。 血液中的二氧化碳 CO2在血液中的存在形式有三种: 物理溶解(7.3%); 与血红蛋白(Hb)结合成氨基甲酸血红蛋白 (HbNH2+CO2HbNHCOOH),(占24.4%); 与水结合形成HCO3(68.3%)。 血气分析中测量的二氧化碳分压也是物理溶解于 血浆中的CO2张力。其参考范围在4.655.98kPa (3545mmHg)。 血液酸碱度
28、人体血液酸碱度来源于食物、饮料和药物 中的酸碱物质及体内代谢后产生的酸碱物 质。维持酸碱平衡的因素有:缓冲系统、 肺调节、离子交换、肾调节,并按上述顺 序分四级调节。 在正常生理状态下,pH应稳定在7.35 7.45之间 血液气体的生理变化过程 血液中H+浓度增高(pH变低)或CO2分压增高时, Hb与氧亲合力降低 H+浓度降低(pH变高)或CO2分压降低时,Hb与 氧亲合力增高。 当血液流经组织时,因组织细胞的pH比血液低, 而CO2分压较血液高,有利于HbO2释放O2,同时 又促进了Hb和H+、CO2的结合。 当血流经肺时,肺泡的O2分压高,HbO2的生成促 使Hb释放H+和CO2,同时C
29、O2的呼出也有利于 HbO2的形成。 血气分析仪 血气分析仪是对人体血液及呼出气 的酸碱度(pH)、二氧化碳分压 (PCO2)、氧分压(PO2)进行定量测 定的仪器。 可用来分析和评价人 体血液酸碱平衡(紊乱)状态和输氧 状态。它还可以用于人体其它体液 (腔液、胃液、脑脊液、尿液)的pH、 PCO2、PO2的分析测量。 由于该仪器分析快速、准确、可靠,因此可以为分析病 因和制定治疗方案提供可靠的依据;在临床中常用于昏 迷、休克、严重外伤等危急病人的抢救、外科大手术的 监视、治疗效果的观察和研究;是肺心病、肺气肿、气 管炎、糖尿病、呕吐、腹泻、中毒等病症诊断和治疗中 所必备的仪器。 血气分析仪的
30、工作原理 被测样品在管路系统的抽吸下,被抽进样品室内的测 量管。测量管的管壁上开有四个孔,孔里面插有pH、 PCO2和PO2三只测量电极和一只参比电极。待测液进 入测量管后,同时被四个电极所检测,转换成pH、 PCO2和PO2三项参数所对应的电信号。 血气分 析仪的 结构可 分为: 1.电极 2.管路 3.电路 血气分析仪的管路系统 恒温测量室装有四只测量电极,是整个管路系统的中心。为保证 仪器的准确性,测量室严格恒温,保证电极、管道及所有进入的 液体、气体均恒温在37土0.1,其内部设有温度传感器、加热器、 过温开关和液位检测器。 作用: 1.系统通过管 路进行定标 (气、液)。 2.通过管
31、路对 电极、通道 做清洗。 3.测量样品的 通路。 电解质分析仪电解质分析仪 钾钠分析仪钾钠分析仪 钾钠分析仪是采用离子选择性电极 测量血清、血浆、尿、脑脊髓或其 它品液中钾钠离子浓度的分析仪器。 有些仪器除了钠钾离子外,还有能 测量其它多种离子的电极,因而也 常称为电解质分析仪。 钾钠分析仪的组成 钾钠分析仪一 般由钾电极、 钠电极、参比 电极、分析箱、 测量电路、控 制电路、驱动 电机及显示器 等组成。 血细胞计数器血细胞计数器 血细胞计数 血细胞计数主要是指计数单位容积中红细胞、白 细胞和血小板的个数。 传统的血细胞计数是将血液稀释后,滴在有分划 的玻璃片上,在显微镜下用人工计数。 最基
32、本的血细胞计数器只能用来计数红细胞(RBC) 和白细胞(WBC)。较复杂的仪器还可以用来计数 血小板(PLT),测量血红蛋白(HGB)。并根据以上 四个参数,自动计算出红细胞比容(HCT)、平均 红细胞容量(MCV)、平均血红蛋白量(MCH)、平 均血红蛋白浓度(MCHC)等项参数。 血细胞计数器 根据对白细胞分类的 能力,血细胞计数器 可分为三分类和五分 类两种。 血细胞计数方 法有:变阻脉 冲法(简称变 阻法)、光电 计数法和激光 计数法等。 变阻脉冲法血细胞计数原理变阻脉冲法血细胞计数原理 血细胞是电的不良导体,如果构成电路的某一小 段电解液截面很小,其尺度可与细胞直径相比拟, 那么当有
33、细胞浮游到此时,将明显增大整段电解 液的等效电阻。如果该电解液外接恒流源 ,则可 得到一连串脉冲,对这些脉冲计数,就可求得血 细胞数量。由于各种血细胞直径不同,所以其电 阻率也不同,所测得的脉冲幅度也不同,根据这 一特点就可以对各种血细胞进行分类计数。这就 是变阻脉冲法原理。 变阻法计数在大多数细胞计数器中是利用小孔管换 能器装置实现的。 红细胞、白细胞、血小板直径不同,产生的脉冲幅度 也不同,以白细胞最大,红细胞次之,血小板最小。 先利用脉冲幅度甄别器将幅度较小的血小板脉冲去掉, 保留红细胞和白细胞脉冲。因为白细胞数量小于红细 胞数量的15,故其总数即可代表红细胞数量。 在计数白细胞时,先利
34、用溶血剂将红细胞破碎,然后 再对剩下的白细胞进行计数。 在计数血小板时,将脉冲幅度甄别器的域值调低,计 出红细胞、白细胞和血小板的总数,再减去先前测出 的红细胞数,便得出血小板数。 重合损失补偿重合损失补偿 因为红、白细胞的直径一般是710m,大者也只有 20m左右,而宝石微孔的孔径却为100m,会存在两 个、三个甚至更多细胞,一同或前后尾随进入小孔 “敏感区”的可能性。虽然这种情况产生的脉冲幅度 比单个细胞要高,但它只能产生一个信号脉冲,使计 数有所丢失。这种现象称为重合损失。 为了弥补这种损失,通常设有重合校正电路或用软件 校正。 重合损失是按泊桑(Poisson)分布规律加以校正的: 计
35、数值在8000以下时不校正。 计数值在800038000时,每计数1000个含补充的 100个数。即每计900个便向千位进1。 在38000以上时,每计数1000含补充的200个。即 每计数800个向千位进l。 血红蛋白测量血红蛋白测量 血红蛋白的单位是g100m1(新制是gL)。 采用相对比色法进行间接测量:用溶血剂将经过 稀释的血液中的红细胞破坏,血红蛋白便溶解出 来,再加入氰化钾试剂进而转化为颜色稳定的氰 化血红蛋白。血红蛋白含量越高,它的颜色就越 深,透光性就越差(或吸光性越强)。用光电器件检 测透射光强度,并与已定标的血红蛋白值相比较, 即可得出血红蛋白含量。 常用的光路系统为了防止光散射和外来光干扰,
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