毛细管气相色谱法测定食品、中药中五氯硝基苯农药

1、山东省疾病控制中山东省疾病控制中 心食品理化分析室心食品理化分析室 主讲人：宋家玉主讲人：宋家玉 毛细管气相色谱法测定保健食品、毛细管气相色谱法测定保健食品、 中药材中的五氯硝基苯残留中药材中的五氯硝基苯残留 五氯硝基苯残留限量标准五氯硝基苯残留限量标准 五氯硝基苯五氯硝基苯(PCNB，Quintozene）是一种专用于种）是一种专用于种 子、土壤消毒的有机氯杀菌剂子、土壤消毒的有机氯杀菌剂, 其化学性质稳定其化学性质稳定, 高残高残 留性和脂溶性严重污染环境并危害人类的健康留性和脂溶性严重污染环境并危害人类的健康 。 2010版中国药典规定人参、黄芪等为版中国药典规定人参、黄芪等为0.1mg

2、/kg。 现有标准以及存的问题 GB/T 16341-1996 中华人民共和国中华人民共和国 国家标准国家标准 食品中五氯硝基苯残留量食品中五氯硝基苯残留量 的测定的测定 2GB/T 5009.136-2003 中华人民共中华人民共 和国国家标准和国国家标准 植物性食品中五氯硝植物性食品中五氯硝 基苯残留量的测定基苯残留量的测定 3GB/T 5009.19-2008 食品中有机食品中有机 氯农药多组分残留量的测定氯农药多组分残留量的测定 我国现行检测标准1，2 色谱柱:内径3mm柱长1.5m玻璃柱，内 装涂以1.5%OV-17+2%QF-1固定液，担 体为80-100目Chromsorb W

3、AW。使 用填充柱色谱分离五氯硝基苯受六六六 等组分干扰严重，粮食取样5.0g时最低 检出浓度为0.005mg/kg；蔬菜取样1.0g 时最低检出浓度为0.01mg/kg。 现行检测标准3使用凝胶柱层析法 净化样液有操作烦琐、成本高等实际问 题。 现有标准存在的问题 色谱柱色谱柱: HP-5 石英毛细管柱石英毛细管柱30m 0.32mm(i.d.)； 柱温程序：初温柱温程序：初温90保持保持2min后以后以40/min升温至升温至 1.70保持保持1min。后以。后以5/min升温至升温至230保持保持9min； 进样口进样口260，检测器，检测器300。载气：高纯氮，流量。载气：高纯氮，流量

4、 2.0ml/min，尾吹，尾吹28 ml/min；进样量为；进样量为1.0l，分流不，分流不 分流进样分流进样 ，分流比，分流比1：100；保留时间定性，外标法定；保留时间定性，外标法定 量。组分峰量。组分峰 9.36 min。 本研究方法技术特点1 五氯硝基苯标准品色谱图 检出五氯硝基苯残留样品色谱图 五氯硝基苯、六六六、滴滴涕农药混合标准样色谱图 本研究方法技术特点2 五氯硝基苯不溶于水, 溶于有机溶剂, 化学性质稳定, 不易挥发、氧化和分解,也不易受阳光和酸碱的影响的特 点, 故采用具有强氧化性的浓硫酸进行净化, 从而排除大 量杂质对于检测的影响。解决了标准(3)使用的凝胶柱层 析法净

5、化样液操作繁琐的问题,同时节省了成本。用硫酸 净化在离心管中进行，损失少，使净化方法简便高效。 当样液成分复杂、颜色较深、色素和杂质不易去除时可 重复磺化一次即可。样液曾尝试用过Florisil硅藻土小柱净 化，回收率高与硫酸处理相近，因小柱成本较高、来源 困难而弃用。 标准曲线 精密称取一定量的五氯硝基苯标准品，用异辛烷溶解并 逐步稀释成0.10，0.05,0.02,0.01,0.005g/ml的标准品溶 液，依2.2色谱条件分析，测定峰面积，结果见表1 。计 算回归方程为 Y=2081.1X-1.58 r=0.9996。 方法的检出限 以阴性样品北沙参中添加五氯硝基苯多个水平,按2.1 和

6、2.2方法提取、净化、进样，从0.005、0.002、0.001至 0.0006 mg/kg 多个水平, 进行测定。 五氯硝基苯检出 限以取5g样品定容5ml计为 0.0006mg/kg（S/N=3） 方法回收率 采用标准添加法分别进行回收率实验 。取适量阴性北 沙参样品加标至0.02mg/kg和0.05mg/kg两个水平，混匀； 称取5g左右， 按2.1及2.2方法提取、净化、测定、计算 回收率。每个水平测定6 次,结果见表2 。 两水平回收率范围分别为： 0.05 mg/kg水平90.2-95.2%； 0.02 mg/kg水平为91.0-97.5% 精密度试验 取阴性样品捣碎加标配成浓度为0.020和0.10mg/kg样 品，混匀；取5g左右，按2.1方法处理，2.2条件测定，计 算RSD （n=6），精密度试验结果（n=6）1.20%和 2.79 % 精密度试验RSD均小于3% 。 方法应用 我实验室使用本文建立的方法分别对2009年、2010年山 东省内日常检测的部分保健食品及中药材进行五氯硝基 苯残留分析，56份样品有10份检出，最高一份五氯硝基 苯残留样品为人参海狗丸0.066mg/kg。 检出范围 保健食品 0.0006 0.066 （mg/kg） 中药材 0.0010.0192 （mg