微生物学课件：第16章 螺旋体

1、第十六章第十六章 螺旋体螺旋体 第一节第一节 分类与命名分类与命名 致病性螺旋体主要有下述致病性螺旋体主要有下述3 3个属：个属： 1 1钩端螺旋体属（钩端螺旋体属（leptospiraleptospira） 2 2疏螺旋体属（疏螺旋体属（BorreliaBorrelia） 3 3密螺旋体属（密螺旋体属（TreponemaTreponema） 第二节第二节 钩端螺旋体属钩端螺旋体属 问号状钩端螺旋体问号状钩端螺旋体 一、临床意义一、临床意义 问好状钩端螺旋体是钩端螺旋体病的病原体。问好状钩端螺旋体是钩端螺旋体病的病原体。 1. 1. 致病物质致病物质 内毒素样物质（内毒素样物质（ELSELS）

2、/ /脂多糖样物质（脂多糖样物质（LLS)LLS) 溶血素溶血素 细胞毒性因子（细胞毒性因子（GTFGTF） 致细胞病变作用致细胞病变作用( CPE)( CPE)物质物质 传染源与储存宿主传染源与储存宿主 2.2.所致疾病所致疾病 钩端螺旋体病钩端螺旋体病 传播途径：主要是传播途径：主要是接触疫水接触疫水传播传播 易感人群：人及动物易感人群：人及动物 临床表现临床表现 螺旋细密、规则，一端或两端呈钩状；螺旋细密、规则，一端或两端呈钩状； 有两根周浆鞭毛，运动活泼；有两根周浆鞭毛，运动活泼； G-，但不易着色，但不易着色，Fontana镀银染色成棕褐色。镀银染色成棕褐色。 二、二、微生物学检验微

3、生物学检验 （一）（一）基本特性基本特性 问好状钩端螺旋体问好状钩端螺旋体 镀银染色法镀银染色法1000 暗视野显微镜暗视野显微镜1500 抗原构造抗原构造 根据属特异性抗原、群特异性抗原、型特异性抗根据属特异性抗原、群特异性抗原、型特异性抗 原分类原分类 营养要求高，需氧或微需氧，常用营养要求高，需氧或微需氧，常用Korthof培养培养 基，生长缓慢；最适温度基，生长缓慢；最适温度2830。 n 在水及土壤中可存活数天至数月；对青霉素敏感在水及土壤中可存活数天至数月；对青霉素敏感 n 基因组：赖型钩体基因组全长为基因组：赖型钩体基因组全长为4.69mb，包含，包含 4.33mb的大染色体和的

4、大染色体和359kb的小染色体，的小染色体，G+C平平 均为均为36mol （二）检验程序（二）检验程序 1. 1. 标本采集标本采集 1010天内取血液；天内取血液；1 1周后取尿液。周后取尿液。 2. 2. 标本直接检查标本直接检查 直接镜检：暗视野观察；直接镜检：暗视野观察；Fontana镀银染色：镀银染色： 棕褐色棕褐色 核酸检测：特异核酸检测：特异DNA探针法、探针法、PCR 4. 4. 抗体检测抗体检测 （1 1）显微镜凝集试验）显微镜凝集试验 3. 3. 分离培养分离培养分离与鉴定分离与鉴定 血液尿液培养血液尿液培养 接种于接种于KorthofKorthof培养基中，培养后培养基

5、中，培养后 作暗视野检查。作暗视野检查。 钩端螺旋体凝集试验（暗视野）钩端螺旋体凝集试验（暗视野） 阴性对照阴性对照 阳性反应（阳性反应（+ + ） 5.5.动物试验动物试验 （2 2）间接凝集试验）间接凝集试验：效价效价1：8可判为阳性，双份可判为阳性，双份 血清标本效价呈血清标本效价呈4倍以上增长则更有诊断价值。倍以上增长则更有诊断价值。 （3 3）TR/PatocTR/Patoc特异性属抗原玻片凝集试验特异性属抗原玻片凝集试验 （4 4）酶联免疫吸附试验）酶联免疫吸附试验(ELISA)(ELISA) 适用于有杂菌污染的标本。常用幼龄豚鼠或适用于有杂菌污染的标本。常用幼龄豚鼠或 金地鼠。金

6、地鼠。 lyme病病 回归热螺旋体回归热螺旋体 第三节第三节 疏螺旋体疏螺旋体 此属螺旋体螺旋少而稀疏，且排列不规则。此属螺旋体螺旋少而稀疏，且排列不规则。 在自然界有宿主与媒介。在自然界有宿主与媒介。 疏螺旋体疏螺旋体 伯氏螺旋体伯氏螺旋体 流行性回归热流行性回归热 地方性回归热地方性回归热 （一）（一）临床意义临床意义 1. 1. 致病物质致病物质 粘附素，外膜蛋白粘附素，外膜蛋白OspAOspA，LPSLPS 2. 2. 自然储存宿主自然储存宿主 啮齿动物、鹿啮齿动物、鹿 3. 3. 传播媒介传播媒介 硬蜱硬蜱 4. Lyme4. Lyme病临床表现病临床表现 一、伯氏螺旋体一、伯氏螺旋

7、体 游走性红斑游走性红斑 长长1137m，两端稍尖；，两端稍尖； 周浆鞭毛有周浆鞭毛有2100根以上，根以上， 与运动有关；与运动有关； 伯氏疏螺旋体（电镜伯氏疏螺旋体（电镜2 0002 000） Giemsa染色为淡紫色，镀银染色为棕褐色；染色为淡紫色，镀银染色为棕褐色； 营养要求高，微需氧，营养要求高，微需氧，5 % 10% CO2促进生长，促进生长， 常用常用BSK培养基，生长缓慢；培养基，生长缓慢； 莱姆病的病原体：伯氏、伽氏、埃氏。莱姆病的病原体：伯氏、伽氏、埃氏。 1. 基本特性基本特性 （二）微生物学检查（二）微生物学检查 2. 检验程序检验程序 （3 3）抗体检测：免疫荧光法及

8、）抗体检测：免疫荧光法及ELISAELISA法检测患者法检测患者 体内的抗体。体内的抗体。 （1 1）标本中病原体数量少，早期和晚期均难分离）标本中病原体数量少，早期和晚期均难分离 出螺旋体。故一般不做直接镜检和分离培养出螺旋体。故一般不做直接镜检和分离培养 （2 2）分子生物学技术）分子生物学技术 二、回归热疏螺旋体二、回归热疏螺旋体 病原体：病原体：回归热疏螺旋体，我国多见回归热疏螺旋体，我国多见 流行性回归热（虱传回归热）流行性回归热（虱传回归热） 传播途径：传播途径：体虱体虱 临床症状：临床症状：高热反复发作高热反复发作3 39 9次。次。 地方性回归热（蜱传回归热）地方性回归热（蜱传

9、回归热） 病原体：病原体：杜通疏螺旋体等杜通疏螺旋体等1515种种 传播途径：传播途径：软蜱软蜱 储存宿主：储存宿主：啮齿动物啮齿动物 临床症状：临床症状：与虱传型相似与虱传型相似 1.体内正常菌群，寄生在口腔、齿龈及咽部体内正常菌群，寄生在口腔、齿龈及咽部 2.协同引起奋森咽峡炎、牙龈炎、溃疡性口协同引起奋森咽峡炎、牙龈炎、溃疡性口 腔炎、口颊坏疽腔炎、口颊坏疽 3.对青霉素、四环素等敏感对青霉素、四环素等敏感 三、奋森螺旋体三、奋森螺旋体 第四节第四节 密螺旋体属密螺旋体属 分为致病与非致病两大类。分为致病与非致病两大类。 苍白螺旋体：苍白亚种苍白螺旋体：苍白亚种 梅毒梅毒 性病性病 地方

10、亚种地方亚种 地方性梅毒地方性梅毒 极细亚种极细亚种 雅司病雅司病 非性病非性病 品他螺旋体：品他螺旋体： 品他病品他病 ( (一一) ) 临床意义临床意义 1. 1. 致病物质致病物质 外膜蛋白：黏附作用外膜蛋白：黏附作用 表面粘多糖和唾液酸：形成荚膜样物质。表面粘多糖和唾液酸：形成荚膜样物质。 透明质酸酶透明质酸酶 免疫逃逸免疫逃逸 过敏反应过敏反应 一、梅毒螺旋体一、梅毒螺旋体 获得性梅毒临床分期：分为三期获得性梅毒临床分期：分为三期 （1）期（初期）梅毒：感染后期（初期）梅毒：感染后3周左右局部周左右局部 出现无痛性硬下疳。感染性极强出现无痛性硬下疳。感染性极强 先天性：母体通过胎盘传

11、给胎儿先天性：母体通过胎盘传给胎儿 获得性：性传播获得性：性传播 2. 2. 所致疾病所致疾病 梅毒梅毒 巨大下疳巨大下疳(一期梅毒）一期梅毒） 全身皮肤、黏膜常有梅毒疹，全身淋巴结肿大。全身皮肤、黏膜常有梅毒疹，全身淋巴结肿大。 （2）期梅毒期梅毒 发生于硬下疳出现后发生于硬下疳出现后28周。周。 （3）期（晚期）梅毒期（晚期）梅毒 发生感染发生感染2年后，病变可波及全身组织和器官年后，病变可波及全身组织和器官 基本损害为慢性肉芽肿基本损害为慢性肉芽肿 病损内螺旋体少但破坏性大病损内螺旋体少但破坏性大 晚期梅毒的溃疡、坏死晚期梅毒的溃疡、坏死 先天性梅毒（胎传梅毒）先天性梅毒（胎传梅毒） 系

12、母体苍白亚种系母体苍白亚种 螺旋体通过胎盘进入螺旋体通过胎盘进入 胎儿所致，多发于妊胎儿所致，多发于妊 娠娠4个月之后。个月之后。 早期先天梅毒早期先天梅毒 （1）直径）直径 0.100.15m，有，有814个致密而规则的小螺个致密而规则的小螺 旋，两端尖直。旋，两端尖直。 （2）原生质圆柱体上紧绕）原生质圆柱体上紧绕 着着34根周浆鞭毛根周浆鞭毛，故故 运动活跃，运动方式运动活跃，运动方式 多样。多样。 （二）（二）微生物学检验微生物学检验 1. 1. 基本特性基本特性 梅毒螺旋体梅毒螺旋体 （3）G-，但不易着色。，但不易着色。Fontana镀银染色呈棕褐色。镀银染色呈棕褐色。 （4）基因组）基因组 环状环状DNA，约为，约为1 138 006bp，G+C 平均为平均为52.8mol。 （5）在无活细胞的人工培养基中难培养，生长慢。）在无活细胞的人工培养基中难培养，生长慢。 （6）抵抗力：极弱，对温度和干燥特别敏感；对）抵抗力：极弱，对温度和干燥特别敏感；对 青霉素、四环素、红霉素等抗菌药物敏感。青霉素、四环素、红霉素等抗菌药物敏感。 菌体柔软，用于运动的类似鞭毛的轴丝位于细胞外鞘内菌体柔软，用于运动的类似鞭毛的轴丝位于细胞外鞘内 梅毒密螺旋体梅毒密螺旋体 2. 检验程序检验程序 （1 1）标本）标本：、期梅毒取下疳