阿托品与乙酰胆碱对豚鼠肠道的拮抗作用课件

1、阿托品与乙酰胆碱对豚鼠肠道的拮 抗作用1 阿托品与乙酰胆碱对豚鼠肠道的拮抗作用与 pA2值的测定 小组成员小组成员 （ 06药学）药学） 苏鹤桂苏鹤桂 谭柏森谭柏森 钟润桃钟润桃 彭冠彭冠 王衍栋王衍栋 阿托品与乙酰胆碱对豚鼠肠道的拮 抗作用 2 v促胃肠动力药包括很多种类, 这 类药物有着不同受体类型和化学 结构以及作用机制, 对从食管到 结肠的胃肠道的不同部位有着不 同程度的促动力作用.这类药物对 胃肠道作用机制的研究包括: 胆 碱能机制、肾上腺能机制、抗多 巴胺和抗胆碱脂酶机制、神经体 液机制等. 阿托品与乙酰胆碱对豚鼠肠道的拮 抗作用 3 v而胆碱能受体药物临床上广泛应 用于慢性胃炎、

2、反流性食管炎 (GERD)、胃瘫、功能性消化不 良 (FD) 等疾病的治疗.该类药物 的作用机制还没有完全明确，研 究其对胃肠动力的作用机制及临 床应用有重大的临床意义。 阿托品与乙酰胆碱对豚鼠肠道的拮 抗作用 4 阿托品与乙酰胆碱的对肠道的药理学作用阿托品与乙酰胆碱的对肠道的药理学作用 阿托品阿托品 v阿托品为阻断阿托品为阻断M胆碱受体胆碱受体 的抗胆碱药，能解除平滑的抗胆碱药，能解除平滑 肌的痉挛肌的痉挛(包括解除血管痉包括解除血管痉 挛，改善微血管循环挛，改善微血管循环)。 乙酰胆碱乙酰胆碱 vAch可明显兴奋胃肠道，可明显兴奋胃肠道， 使其收缩幅度、张力增加，使其收缩幅度、张力增加，

3、胃、肠平滑肌蠕动增加，胃、肠平滑肌蠕动增加， 并可促进胃、肠分泌，导并可促进胃、肠分泌，导 致恶心、嗳气、呕吐、腹致恶心、嗳气、呕吐、腹 痛及排便等症状痛及排便等症状 阿托品与乙酰胆碱对豚鼠肠道的拮 抗作用 5 pA2pA2与与pD2pD2值的定义值的定义 pA2 vPA2是拮抗参数，当有是拮抗参数，当有 一定浓度的拮抗药存在时，一定浓度的拮抗药存在时， 激动剂增加激动剂增加2倍时才能达倍时才能达 到原来效应，此时拮抗药到原来效应，此时拮抗药 的负对数即拮抗参数，的负对数即拮抗参数， pA2 = -logI = -logKI 。 PA2的值越大说明拮抗剂的值越大说明拮抗剂 的作用越强的作用越强

4、 pD2 vPD2：是激动剂与受体亲：是激动剂与受体亲 和力的定量表示。和力的定量表示。PD2是是 产生产生50最大效应最大效应(E=1 2Emax)的摩尔浓度的负对的摩尔浓度的负对 数数(-logD)。PD2值越大，值越大， 说明药物和受体的亲和力说明药物和受体的亲和力 越大，药效越强。计算方越大，药效越强。计算方 法与法与PA2相似相似 阿托品与乙酰胆碱对豚鼠肠道的拮 抗作用 6 实验方法概述与目的实验方法概述与目的 v本实验拟用豚鼠的离体肠道并 佐以乙酰胆碱与阿托品分别作 为肠道激动剂与拮抗剂进行实 验。观察其对肠道的竞争性拮 抗作用，同时掌握pA2值的测定 方法。 阿托品与乙酰胆碱对豚

5、鼠肠道的拮 抗作用 7 实验器材实验器材 离体器官浴池及恒温离体器官浴池及恒温 装置装置 PowerLab系统系统 加液器加液器 培养皿培养皿 缝针缝针 线线 眼科镊子眼科镊子 剪刀剪刀 试药试药 阿托品阿托品（mol/L）：）： 3 10-7 乙酰胆碱乙酰胆碱（mol/L）：）： 10-6、10-5、10-4、10-3、 10-2 台氏液台氏液 混合气体混合气体（95O2 5CO2）负荷）负荷500 mg 实验器材与试剂实验器材与试剂 阿托品与乙酰胆碱对豚鼠肠道的拮 抗作用 8 实验路线实验路线 实验装置实验装置 累积剂量效应曲线累积剂量效应曲线 离体肠离体肠制备制备 猛击豚鼠头部至昏，猛击

6、豚鼠头部至昏， 立即剖开腹腔，自幽立即剖开腹腔，自幽 门下门下5cm剪取空肠和剪取空肠和 回肠上段，迅速置于回肠上段，迅速置于 台氏液液中。小心修台氏液液中。小心修 去肠系膜，用吸管吸去肠系膜，用吸管吸 取台氏液液缓慢冲洗取台氏液液缓慢冲洗 肠内容物；将空肠段肠内容物；将空肠段 分割成分割成2 cm的小段备的小段备 用。用。 制成的标本一端固定制成的标本一端固定 于通气钩上，另一端于通气钩上，另一端 连接于肌力换能器并连接于肌力换能器并 接入接入PowerLab系统系统 的桥式放大器上，浴的桥式放大器上，浴 池内放池内放20ml 台氏液液台氏液液 ，加，加500mg负荷，恒负荷，恒 温温37

7、1 C，浴池内持，浴池内持 续通入续通入95O2与与5 CO2的混合气体。的混合气体。 实验装置完毕以后，实验装置完毕以后， 打开打开PowerLab系统系统 ，设置参数，设置参数 。描记肠描记肠 肌收缩曲线，待收缩肌收缩曲线，待收缩 基线平稳后，按次序基线平稳后，按次序 在浴池中加入预先配在浴池中加入预先配 好的不同克分子浓度好的不同克分子浓度 的乙酰胆碱。当反应的乙酰胆碱。当反应 到一定高峰，再递增到一定高峰，再递增 剂量，效应不再增加剂量，效应不再增加 ，此时的效应为最大，此时的效应为最大 效应。效应。 阿托品与乙酰胆碱对豚鼠肠道的拮 抗作用 9 阿托品拮抗乙酰胆阿托品拮抗乙酰胆 碱的剂

8、量效应碱的剂量效应 曲线的制作曲线的制作 放去浴池中的液体放去浴池中的液体 ，用台氏液液冲洗，用台氏液液冲洗 三次，以后每隔三次，以后每隔 10min冲洗一次，冲洗一次， 共冲洗三次，再加共冲洗三次，再加 入台氏液液至入台氏液液至 20ml。待收缩基。待收缩基 线平稳后，加入阿线平稳后，加入阿 托品托品107 mol/L 0.6ml（实际浓度（实际浓度 310-9 mol/L） ，培育，培育15min。 再按前法依次加入再按前法依次加入 不同浓度的乙酰胆不同浓度的乙酰胆 碱，便可得到有拮碱，便可得到有拮 抗剂时乙酰胆碱的抗剂时乙酰胆碱的 累积剂量效应曲线累积剂量效应曲线 ，此时拮抗剂（阿，此时

9、拮抗剂（阿 托品）摩尔浓度的托品）摩尔浓度的 负对数即负对数即pAx。 阿托品与乙酰胆碱对豚鼠肠道的拮 抗作用 10 累积剂量法加药顺序 累加次 序 药液浓度 （mol/L） 药液的毫升数（ml） 每L中累积剂量 （mol） 110-60.20.01 210-60.40.03 310-50.140.1 410-50.40.3 510-40.141 610-40.43 710-30.1410 810-30.430 910-20.14100 1010-20.4300 附加药顺序表附加药顺序表 阿托品与乙酰胆碱对豚鼠肠道的拮 抗作用 11 为了正确求得为了正确求得 各参数，必须各参数，必须 将曲线直

10、线化将曲线直线化 。可按。可按D/R式使式使 剂量效应曲线剂量效应曲线 直线化。直线化。 以肠肌收缩幅以肠肌收缩幅 度作为纵坐标，度作为纵坐标， 以药物对数浓以药物对数浓 度为横坐标，度为横坐标， 绘制量效曲线。绘制量效曲线。 药物的最大效药物的最大效 应即曲线的高应即曲线的高 度。度。 绘制累积绘制累积 剂量效应剂量效应 曲线曲线 直线回归直线回归 计算参数计算参数 公式公式 1 maxmax D EE K E D D 式中：式中：D为药物剂量（浓度），为药物剂量（浓度），E为某一剂量的效应，为某一剂量的效应，KD为药物的解离为药物的解离 常数，常数，Emax为药物的最大效应。以为药物的最大

11、效应。以D/E为纵坐标，为纵坐标，D为横坐标进行为横坐标进行 直线回归。根据公式直线回归。根据公式pA2 = pAx + log (x-1)，式中，式中pAx为拮抗剂摩尔浓为拮抗剂摩尔浓 度的负对数，度的负对数，x为用拮抗剂后与用拮抗剂前为用拮抗剂后与用拮抗剂前KD之比。之比。 阿托品与乙酰胆碱对豚鼠肠道的拮 抗作用 12 2009.11.2- 2009.11.20 制定实验方案，制定实验方案， 并对方案进行并对方案进行 陈述陈述 2009.11.30- 2009.12.4 实验阶段实验阶段 2009.12.7- 2009.12.18 实验总结阶段实验总结阶段 实验进程安排实验进程安排 试验中期 试验初期 试验末期 阿托品与乙酰胆碱对豚鼠肠道