各类药物的生产方法

1、概念：多种结晶概念：多种结晶L-氨基酸依特定的比例混合制成的静脉氨基酸依特定的比例混合制成的静脉 内输液谓之氨基酸输液内输液谓之氨基酸输液 生理作用：促进蛋白质、酶及肽类激素的合成，提高血生理作用：促进蛋白质、酶及肽类激素的合成，提高血 浆蛋白浓度与组织蛋白含量，维持氮平衡，调节机体正浆蛋白浓度与组织蛋白含量，维持氮平衡，调节机体正 常代谢。常代谢。 专用输液：肝病、肾衰竭及肝肾衰竭用氨基酸、癌症及专用输液：肝病、肾衰竭及肝肾衰竭用氨基酸、癌症及 泌尿生殖系统、新生儿及婴儿用氨基酸输液。泌尿生殖系统、新生儿及婴儿用氨基酸输液。 加入杉梨醇、木糖、维生素及钙加入杉梨醇、木糖、维生素及钙 、钾或镁

2、等成分，以、钾或镁等成分，以 补充能量，提高氨基酸的利用率及营养价值，也可与右补充能量，提高氨基酸的利用率及营养价值，也可与右 旋糖酐配伍制成较理想的代血浆。旋糖酐配伍制成较理想的代血浆。 理想氨基酸应全部使用理想氨基酸应全部使用L-氨基酸。氨基酸。 氨基酸输液氨基酸输液 1 1、稳定及难溶氨基酸的溶解、稳定及难溶氨基酸的溶解 取新鲜的注射用水（约全量取新鲜的注射用水（约全量 2/32/3），于容器中，加温至），于容器中，加温至90 90 o oC C，将亮氨酸、异亮氨酸、将亮氨酸、异亮氨酸、 蛋氨酸、苯丙氨酸、缬氨酸、天门冬氨酸及谷氨酸依次投蛋氨酸、苯丙氨酸、缬氨酸、天门冬氨酸及谷氨酸依次投

3、 入，充分搅拌溶解，停止加热，加入色氨酸搅拌溶解。入，充分搅拌溶解，停止加热，加入色氨酸搅拌溶解。 2 2、加易溶解的氨基酸及稳定剂、加易溶解的氨基酸及稳定剂 投入其它易溶氨基酸及投入其它易溶氨基酸及 稳定剂（亚硫酸氢钠及半胱氨酸各加至全量浓度为稳定剂（亚硫酸氢钠及半胱氨酸各加至全量浓度为0.050.05） 搅拌溶解，迅速降至室温，加注射用水至近全量，用搅拌溶解，迅速降至室温，加注射用水至近全量，用1010 氢氧化钠液调氢氧化钠液调pH4.5-5.5pH4.5-5.5，加注射用水至全量。加注射用水至全量。 3 3、脱色与灌注、脱色与灌注 上述溶液加上述溶液加0.1-0.20.1-0.2（w/v

4、w/v）的活性炭，的活性炭， 搅拌搅拌3030minmin，滤除活性炭，再用分子量截留值为滤除活性炭，再用分子量截留值为1-21-2万的超万的超 滤膜过滤，滤液分装于滤膜过滤，滤液分装于250250mlml或或500500mlml的输液瓶中，按常规的输液瓶中，按常规 操作压盖后，于操作压盖后，于105105o oC C流动蒸汽灭菌流动蒸汽灭菌3030minmin即得成品。即得成品。 氨基酸输液配制原则氨基酸输液配制原则 一、糖类药物的一般制备方法一、糖类药物的一般制备方法 1、单糖、寡糖及其衍生物提取纯化、单糖、寡糖及其衍生物提取纯化 可以用水及可以用水及50以下的乙醇为提取溶剂，也可用以下的

5、乙醇为提取溶剂，也可用82乙醇，在乙醇，在 7078 oC下回流提取。杂蛋白用硫酸铅除去，然后用通下回流提取。杂蛋白用硫酸铅除去，然后用通H2S除去。除去。 提取后用吸附层析或离子交换法进行纯化。提取后用吸附层析或离子交换法进行纯化。 2、多糖分离纯化、多糖分离纯化 先脱脂便于释放多糖 A 难溶于水者（冷水、热水）可溶于烯碱者（不溶性的胶类）；难溶于水者（冷水、热水）可溶于烯碱者（不溶性的胶类）； B易溶于温水、难溶于冷水及乙醇者；易溶于温水、难溶于冷水及乙醇者； C粘多糖需先用酶解法或碱水解法使糖蛋白结合键断裂，用水粘多糖需先用酶解法或碱水解法使糖蛋白结合键断裂，用水 或盐溶液提取或盐溶液提

6、取 纯化：乙醇沉淀法纯化：乙醇沉淀法 有机溶极分级沉淀法有机溶极分级沉淀法 回 收 酒 精 上 清 液 小 分 子 右 旋 糖 苷 成 品 沉 淀 干 燥 ， 乙 醇 洗 上 清 液 常 温 ， 6h , 55.5 56.5% A 低 分 子 右 旋 糖 苷 成 品 沉 淀 干 燥 ， 乙 醇 洗 ， 干 燥 上 清 夜 40oC , 22h, 48 48.5% A 中 分 子 右 旋 糖 苷 成 品 沉 淀 干 燥 ， 乙 醇 洗 ， 干 燥 上 清 夜 40oC , 22h, 45 45.5% A 沉 淀 （ 杂 质 及 大 分 子 右 旋 糖 苷 ） 水 解 液 40 40.5% A 沉

7、 淀 为 高 分 子 右 旋 糖 苷 粗 品 水 解 、 中 和 纯 化 ， pH 6.5, 95 100oC 发 酵 液 pH 4.2 5 发 酵 5oC , 20 24h 种 子 培 养 5oC , 20 24h 菌 种 活 化 25oC , 24h二、二、 不不 同同 分分 子子 量量 右右 旋旋 糖糖 苷苷 乙乙 醇醇 分分 级级 分分 离离 结构及理化性质： 等质量的葡萄糖醛酸和乙酰氨基葡萄糖组成； 无种属差异，只存在相对分子量的差异； 加热、剧烈搅拌、重金属、酸碱、紫外线等会 造成降解，提纯工艺不同分子量差异较大。 生产工艺：动物组织提取法和细菌发酵法 产氨短杆菌嘌呤核苷产氨短杆菌

8、嘌呤核苷 酸生物合成调节机制酸生物合成调节机制 5受受GMP ATP的反馈抑制的反馈抑制 1被被G阻遏阻遏 2受受GMP反馈抑制反馈抑制 3被被A阻遏阻遏 4受受ATP ADP AMP GMP反馈抑制反馈抑制 6受受GTP的反馈抑制的反馈抑制 注：注：PRPP5磷酸核糖焦磷酸磷酸核糖焦磷酸 产氨短杆菌腺嘌呤缺陷产氨短杆菌腺嘌呤缺陷 型菌株型菌株IMP发酵机制发酵机制 肌肌 苷苷 酸酸 诱诱 变变 图图 谱谱 肌肌 苷苷 酸酸 产产 生生 诱诱 变变 过过 程程 的的 产产 量量 变变 化化 1 1、选用产氨短杆菌腺嘌呤缺陷型菌株以解、选用产氨短杆菌腺嘌呤缺陷型菌株以解 除腺嘌呤衍生物的反馈抑制

9、；除腺嘌呤衍生物的反馈抑制； 2 2、培养基中提供亚适量、培养基中提供亚适量A A，不足以产生反馈，不足以产生反馈 抑制的腺嘌呤衍生物，通过补救途径合成微抑制的腺嘌呤衍生物，通过补救途径合成微 生物生命活动所需要的生物生命活动所需要的DNADNA； 3 3、培养基中加入特异抑制、培养基中加入特异抑制IMPIMP脱氢酶的化学脱氢酶的化学 物质（如物质（如8 8氮杂鸟嘌呤）则氮杂鸟嘌呤）则IMPIMP脱氢反应被脱氢反应被 切断，切断，GMPGMP不能生成，解除不能生成，解除GMPGMP的反馈抑制，的反馈抑制， 使使IMPIMP进一步被积累；进一步被积累； 提高提高IMP产量途径产量途径 4、Mn2

10、+在限量的情况下，培养后期产氨短在限量的情况下，培养后期产氨短 杆菌，嘌呤核苷酸补救合成所需的酶和中杆菌，嘌呤核苷酸补救合成所需的酶和中 间体核糖间体核糖5磷酸很容易透过细胞膜，并磷酸很容易透过细胞膜，并 且在细胞外重新合成大量的肌苷酸；且在细胞外重新合成大量的肌苷酸； 5、因工业原料和工业水都含较高的、因工业原料和工业水都含较高的Mn2 ， ， 通过诱变育种的方法选育了对通过诱变育种的方法选育了对Mn2+不敏感不敏感 的变异株，使发酵液的变异株，使发酵液Mn2 含量高达 含量高达 1000 g/ml时，肌苷酸的生物合成仍不受影时，肌苷酸的生物合成仍不受影 响。响。 二、免疫治疗二、免疫治疗

11、免疫治疗是通过输入抗体、胸腺素、淋巴因子免疫治疗是通过输入抗体、胸腺素、淋巴因子 或某些药物等来提高人的免疫功能，治疗疾病的或某些药物等来提高人的免疫功能，治疗疾病的 方法。输入的抗体常称为抗毒素。方法。输入的抗体常称为抗毒素。抗细菌毒素或抗抗细菌毒素或抗 病毒抗体可用于中和毒素和病毒。病毒抗体可用于中和毒素和病毒。例如：被狗咬伤的例如：被狗咬伤的 人要注射人要注射“狂犬疫苗狂犬疫苗”、被铁钉等扎伤的人常注、被铁钉等扎伤的人常注 射的射的“破伤风毒素破伤风毒素”等都是从健康且遭受过相应等都是从健康且遭受过相应 抗原感染的人血液中提取出来的抗体。给被抗原抗原感染的人血液中提取出来的抗体。给被抗原

12、 感染或怀疑被感染的人输入淋巴因子、干扰素等感染或怀疑被感染的人输入淋巴因子、干扰素等 增强免疫效应的物质用于治疗某些疾病也属免疫增强免疫效应的物质用于治疗某些疾病也属免疫 治疗的方法。治疗的方法。输入激活的淋巴细胞多用于肿瘤治疗。如输入激活的淋巴细胞多用于肿瘤治疗。如 肿瘤浸润的淋巴细胞（肿瘤浸润的淋巴细胞（tumor infiltrating tumor infiltrating lymphocyte,TILlymphocyte,TIL）或淋巴因子激活的杀伤细胞）或淋巴因子激活的杀伤细胞 （lymphokine-activated killerlymphokine-activated ki

13、ller，LAKLAK）输注等。）输注等。 三、免疫重建与免疫替代疗法三、免疫重建与免疫替代疗法 若机体免疫系统因先天或后天原因而出现严重若机体免疫系统因先天或后天原因而出现严重 缺陷，可通过输入造血干细胞而重建免疫系统缺陷，可通过输入造血干细胞而重建免疫系统， 此为免疫重建（此为免疫重建（immunological reconstitution）。造血干细胞可来自骨髓、胚。造血干细胞可来自骨髓、胚 胎肝细胞、脐血或外周血。胎肝细胞、脐血或外周血。免疫替代疗法免疫替代疗法即输入即输入 机体缺乏的免疫活性物质，以暂时维持其免疫功机体缺乏的免疫活性物质，以暂时维持其免疫功 能。能。 1、第一代疫苗

14、、第一代疫苗-以完整病原体与毒素制备的疫苗以完整病原体与毒素制备的疫苗由 灭活的病源微生物悬液构成，几乎不经过任何纯 化 2、第二代疫苗病源微生物的纯化、保护组分的、第二代疫苗病源微生物的纯化、保护组分的 完全提纯完全提纯。如脊髓灰质炎死疫苗、多糖疫苗； 3、第三代疫苗各种保护组织进行组合后的产品、第三代疫苗各种保护组织进行组合后的产品 及生物技术疫苗。及生物技术疫苗。如将多糖连接到百日咳疫苗蛋 白载体上、DNA疫苗等。 死疫苗死疫苗 (dead vaccine) 亦称灭活疫苗亦称灭活疫苗( inactive vaccine)，包括霍乱、伤寒、钩端螺旋体、百日咳、，包括霍乱、伤寒、钩端螺旋体、百日咳、 狂犬病、甲型肝炎及乙型脑炎疫苗等。狂犬病、甲型肝炎及乙型脑炎疫苗等。 减毒活疫苗减毒活疫苗 （attenuated vaccine）由无毒或弱毒由无毒或弱毒 的病原微生物制成，可在体内增殖，所需接种剂量的病原微生物制成，可在体内增殖，所需接种剂量 小，且仅需一次接种；免疫效果较好。有卡介苗、小，且仅需一次接种；免疫效果较好。有卡介苗、 麻疹、腮腺炎、脊髓灰质炎麻疹、腮腺炎、脊髓灰质炎(Sabin)、风疹及水痘、风疹及水痘 疫苗等。疫苗等。会有核酸插入宿主基因组的危险，和发生