脂质体与泡囊制备技术

1、 一、脂质体一、脂质体 概述概述 制备方法制备方法 质量评价分类质量评价分类 脂质体的概述脂质体的概述 脂质体的组成和结构脂质体的组成和结构 脂质体的性质脂质体的性质 脂质体的作用特点脂质体的作用特点 脂质体作为药物载体的应用脂质体作为药物载体的应用 脂质体的组成与结构脂质体的组成与结构 脂质体脂质体(liposomes): 将磷脂分散在水中，自主装形成的具将磷脂分散在水中，自主装形成的具 有具有双分子层膜结构的囊泡。有具有双分子层膜结构的囊泡。 脂质体脂质体 磷脂磷脂 附加剂附加剂 卵磷脂卵磷脂 磷脂酰乙醇胺（磷脂酰乙醇胺（PE） 二硬脂酰磷脂酰胆碱（二硬脂酰磷脂酰胆碱（DSPC） 二棕榈酰

2、磷脂酰胆碱（二棕榈酰磷脂酰胆碱（DPPC） 等等 胆固醇胆固醇 脂质体的简介脂质体的简介-脂质体的分类脂质体的分类 小单室脂质体小单室脂质体 大单室脂质体大单室脂质体 大单室脂质体大单室脂质体 多室脂质体多室脂质体 15um 100nm1000nm 2080nm DOXIL阿霉素脂质体阿霉素脂质体 脂质体的理化性质脂质体的理化性质 （1）相变温度：）相变温度： 当温度升高时，当温度升高时，脂质体双分子层中酰基侧脂质体双分子层中酰基侧 链可从有序排列变为无序排列，脂膜由链可从有序排列变为无序排列，脂膜由 胶晶态变为液晶态，胶晶态变为液晶态，膜流动性增加，这膜流动性增加，这 种转变时的温度称为种转

3、变时的温度称为相变温度相变温度(phase transition temperature) （2）电性）电性 （-） 磷脂酸、磷脂酰丝氨酸磷脂酸、磷脂酰丝氨酸 （+）磷脂酰十八胺）磷脂酰十八胺 （0）磷脂酰胆碱）磷脂酰胆碱 对包封率、稳定性、靶器官分布及对靶细对包封率、稳定性、靶器官分布及对靶细 胞的作用均有影响胞的作用均有影响 脂质体的作用特点脂质体的作用特点 提高药物稳定性提高药物稳定性 降低药物毒性降低药物毒性（教师科研）（教师科研） 长效作用（缓释性）长效作用（缓释性） 靶向性靶向性 细胞亲和性，组织相容性细胞亲和性，组织相容性 脂质体靶向原理脂质体靶向原理 EPR效应效应：增强透过和

4、滞留效应（增强透过和滞留效应（the enhanced permeability and retention effect ，EPR） 脂质体作为药物载体的应用脂质体作为药物载体的应用 抗肿瘤药物 抗寄生虫药物 抗菌药物 各种酶 解毒剂 免疫激活剂 抗结核药物 生物工程技术药物 二、脂质体的制备方法二、脂质体的制备方法 薄膜分散法（薄膜分散法（film dispersion method） 逆相蒸发法（逆相蒸发法（reverse evaporation） 冷冻干燥法（冷冻干燥法（freeze-drying） 注入法（注入法（injection） 超声波分散法（超声波分散法（ultrasonic

5、 dispersion） pH梯度法（梯度法（ pH-gradient） 前提脂质体法（前提脂质体法（preliposomes） 薄膜蒸发法薄膜蒸发法 与有机溶剂共溶与有机溶剂共溶 减压蒸发形成薄膜减压蒸发形成薄膜 水合水合 粗混悬液粗混悬液高压匀化或挤出过高压匀化或挤出过 滤滤冷冻干燥冷冻干燥 逆相蒸发法逆相蒸发法 油水两相形成油水两相形成W/O 乳状液乳状液减压蒸发减压蒸发 形成胶形成胶 态态水合水合高压匀化或挤出过高压匀化或挤出过 滤滤 离心滤过离心滤过冷冻干燥冷冻干燥 冷冻干燥法冷冻干燥法 分散于缓冲盐溶液中分散于缓冲盐溶液中 超声波处理超声波处理冷冻干燥冷冻干燥分散分散 到含药的水性

6、介质到含药的水性介质 注入法注入法 与有机溶剂共溶与有机溶剂共溶注入磷注入磷 酸盐缓冲液酸盐缓冲液除尽乙醚除尽乙醚 超声波分散法超声波分散法 药物溶于磷酸盐缓冲药物溶于磷酸盐缓冲 液液加至有机溶液中加至有机溶液中除去有机除去有机 溶剂溶剂超声波处理超声波处理分离脂质分离脂质 体体混悬于磷酸盐缓冲液混悬于磷酸盐缓冲液 pH梯度法（主动载药梯度法（主动载药）（教师科研）（教师科研） 前提脂质体法前提脂质体法 颗粒状物或粉状颗粒状物或粉状 物物加水即可加水即可 两性霉素两性霉素B脂质体处方脂质体处方 每1000支量 两性霉素两性霉素B 50g HSPC 213g 胆固醇胆固醇 52g DSPG 34

7、g 生育酚生育酚 0.64g 蔗糖蔗糖 900g C4H4NaO4.6H2O 27g 两性霉素两性霉素B脂质体的制备脂质体的制备 制法制法 将两性霉素将两性霉素B、HSPC、胆固醇、胆固醇、 DSPG和生育酚用适当溶剂溶解，减压和生育酚用适当溶剂溶解，减压 除去有机溶剂，备用：除去有机溶剂，备用： 蔗糖、蔗糖、C4H4NaO4.6H2O用注射用水溶用注射用水溶 解解,得溶液得溶液,调调pH至至5,备用备用: 将将 “”加入加入“”中，水化，分散，中，水化，分散， 所得液体过均质机或采用所得液体过均质机或采用“挤压器挤压器”制制 备脂质体，控制粒度小于备脂质体，控制粒度小于100nm： 无菌过滤

8、，分装，冷冻干燥即得。无菌过滤，分装，冷冻干燥即得。 阿霉素脂质体处方（DOXIL，楷 来注射液） 阿霉素 2.0mg/mL MPEG-DSPE 3.19mg/mL HSPC 9.58mg/mL 胆固醇 3.19mg/mL 硫酸铵 2mg/mL 其它：盐酸、氢氧化钠、蔗糖 pH约6.5 三、脂质体的质量评价脂质体的质量评价 形态与粒径及其分布形态与粒径及其分布 包封率包封率 渗漏率渗漏率 磷脂的氧化程度磷脂的氧化程度(氧化指数的测定氧化指数的测定) 有机溶剂残留量有机溶剂残留量 脂质体制剂脂质体制剂 体外释放度测定体外释放度测定 体内分布实验体内分布实验 形态与粒径及其分布形态与粒径及其分布

9、光学显微镜光学显微镜(教师科研图片）教师科研图片） 扫描电镜或透射电镜扫描电镜或透射电镜(小于小于2m) 激光粒度仪激光粒度仪(Mastersizer 2000马尔马尔 文激光粒度仪文激光粒度仪) (教师科研图片）教师科研图片） 包封率包封率 包封率包封率=(脂质体中包封的药量脂质体中包封的药量/ 脂质脂质 体中包封的与未包封的总药体中包封的与未包封的总药 量量)100% 包封率常用的分离方法有包封率常用的分离方法有 葡聚糖凝胶过滤法葡聚糖凝胶过滤法(分子筛法分子筛法) 超滤膜过滤法超滤膜过滤法 超速离心法超速离心法 微型柱离心法微型柱离心法 透析法透析法 渗漏率渗漏率 渗漏率渗漏率=(产品贮

10、藏后渗漏到介质中产品贮藏后渗漏到介质中 的药量的药量/产品贮藏前包封的药产品贮藏前包封的药 量量)100% 磷脂的氧化程度磷脂的氧化程度(氧化指数的氧化指数的 测定测定) 氧化指数氧化指数=A233nm/ A215nm 小于小于0.2 有机溶剂残留量有机溶剂残留量 脂质体制剂脂质体制剂 应符合中国药典有关制剂应符合中国药典有关制剂 通则的规定通则的规定 四、泡囊（类脂质体）四、泡囊（类脂质体） 泡囊泡囊(niosomes)：又称类脂质体，也有：又称类脂质体，也有 人称囊泡。泡囊由非离子型表面活性剂人称囊泡。泡囊由非离子型表面活性剂 组成，也有类似脂质体封闭的双层结构，组成，也有类似脂质体封闭的

11、双层结构， 但比较不易泄漏，也比脂质体稳定。但比较不易泄漏，也比脂质体稳定。 泡囊也可由两亲性嵌段共聚物在溶液中泡囊也可由两亲性嵌段共聚物在溶液中 自主装形成，称为聚合物泡囊自主装形成，称为聚合物泡囊 （polymericniosomes）。聚合物泡囊）。聚合物泡囊 较一般泡囊更为稳定。膜是单分子层。较一般泡囊更为稳定。膜是单分子层。 特点特点 靶向性靶向性 缓释性缓释性 降低药物毒性降低药物毒性 提高药物稳定性提高药物稳定性 比脂质体稳定，不易泄露比脂质体稳定，不易泄露 粒径较小的泡囊（粒径较小的泡囊（50m），可延长在体内），可延长在体内 的时间，并具有增强透过和滞留效应（的时间，并具有增

12、强透过和滞留效应（the enhanced permeability and retention effect ， EPR） 不易被肾排泄不易被肾排泄 材料与制备方法材料与制备方法 材料材料 膜材料膜材料 非离子型表面活性剂非离子型表面活性剂 单（双）烷基聚丙三醇醚类单（双）烷基聚丙三醇醚类 Span类类 Tween类类 Brij类类 合成的双亲性嵌段不共聚物合成的双亲性嵌段不共聚物 其它材料其它材料 胆固醇胆固醇 提高膜稳定性、降低药物的通透性、提提高膜稳定性、降低药物的通透性、提 高包封率与载药量高包封率与载药量 磷酸二鲸蜡酯磷酸二鲸蜡酯 提高泡囊荷电性、提高膜稳定性、增大提高泡囊荷电性、提高膜稳定性、增大 泡囊双分子层的间距、增大泡囊的容积、泡囊双分子层的间距、增大泡囊的容积、 增大粒径与包封率增大粒径与包封率 制备方法制备方法 薄膜分散法（薄膜分散法（film dispersion method） 逆相蒸发法（逆相蒸发法（reverse evaporation） 前体泡囊法前体泡囊法 思考题 简述脂质体的概念、特点与用途。 简述制备脂质体的常用的材料。 简述热敏性脂质体含义与用途。 一、脂质体一、脂质体 概述概述 制备方法制备方法 质量评价分类质量评价分类 脂质体的组成与结构脂质体的组成与结构 脂质体脂质体