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文档简介

1、一、一、实验目的:实验目的: 1.蛙离体神经干的制备蛙离体神经干的制备 2.学习生物电信号的引导,观察并学习生物电信号的引导,观察并 分析神经干复合动作电位波形。分析神经干复合动作电位波形。 二、制备蛙离体坐骨神经干标本二、制备蛙离体坐骨神经干标本 1.1.破坏脑脊髓破坏脑脊髓 2.2.剪除躯干上部及内脏剪除躯干上部及内脏: : 骶髂关节水平以骶髂关节水平以上上1cm1cm处剪断脊柱处剪断脊柱 3.3.剥皮剥皮, ,并洗净手和用过的器械并洗净手和用过的器械 4.4.游离坐骨神经游离坐骨神经, ,至踝关节至踝关节(神经分离干净、(神经分离干净、 足够长、滴加任氏液)足够长、滴加任氏液) 5.仪器

2、的连接:仪器的连接: 12 粗粗 细细 r1 r2 r3r4 红红红红红红黑黑黑黑绿绿绿绿 仪器连接 RM6240C微机生物信号处理系统 神经干标本盒。 S+ S- E R1 - R1+ R2- R2+ 神经干标本盒两对引导电极分别接微机生物信号处理系统1、2通道 三三.实验观察项目实验观察项目 1. 引导双相动作电位;引导双相动作电位; 阈强度、最大刺激阈强度、最大刺激 强度强度(同步触发同步触发) 2. 神经干动作电位传导速度的测定神经干动作电位传导速度的测定 3. 神经兴奋性周期变化的检测神经兴奋性周期变化的检测(最大刺激强度)(最大刺激强度) 4. 单相动作电位单相动作电位 1.引导双

3、相动作电位引导双相动作电位 刺激伪迹 AP 刺激器 放大器 + 地 刺激电流 i-i+ R+ R- 地 刺激伪迹刺激伪迹是刺激电流通过导电介质扩散至两引导电极而形 成的电位差信号。与刺激同步,随刺激强度增大而增大。 双相动作电位原理?双相动作电位原理? - + -+- +-+ R 1 = R 2 R 1 R 2 R 1 = R 2 +-+ -+-+- +-+ R 1 R 2 外外 内内 外外 内内 内内 外外 内内 外外 阈强度阈强度:对神经干而言,指神经干刚对神经干而言,指神经干刚 好能产生动作电位的刺激强度好能产生动作电位的刺激强度 (恰能诱发动作电位时的刺激强度)(恰能诱发动作电位时的刺

4、激强度) 最大刺激强度最大刺激强度:能产生最大动作电位能产生最大动作电位 的最小刺激强度的最小刺激强度 (动作电位幅度不随刺激强度增大而增加)(动作电位幅度不随刺激强度增大而增加) 阈强度、最大刺激强度阈强度、最大刺激强度 0V 0.25V 0.3V 0.4V 0.5V0.6V 0.7V 0.8V 0.9V A A 1.“全全”或或“无无” 2.不衰减传导不衰减传导 3.脉冲性脉冲性 复合动作电位复合动作电位 单个细胞单个细胞AP 胞外两点间电位差胞外两点间电位差 细胞内外电位差细胞内外电位差 阈强度阈强度 最大刺激强度最大刺激强度 阈强度阈强度 无最大刺激强度无最大刺激强度 为什么在一定范围

5、内(阈上刺激),为什么在一定范围内(阈上刺激), 刺激强度越大,神经干所形成的动作刺激强度越大,神经干所形成的动作 电位越大?电位越大? 这是因为随着刺激强度的增加,神经这是因为随着刺激强度的增加,神经 干上兴奋的神经纤维越来越多的缘故。干上兴奋的神经纤维越来越多的缘故。 2.测定传导速度测定传导速度(自动自动/手动手动) V=S/t(m/s) S1S2r1r4r3r2 S(cm) 3.检测兴奋性周期变化检测兴奋性周期变化 v绝对不应期绝对不应期 v相对不应期相对不应期 v超常期超常期 v低常期低常期 0 随着波间隔的缩随着波间隔的缩 小,越来越多神小,越来越多神 经纤维在接受第经纤维在接受第

6、 二个刺激时已处二个刺激时已处 于第一个刺激诱于第一个刺激诱 发的兴奋不应期,发的兴奋不应期, 所产生的复合动所产生的复合动 作电位波幅就减作电位波幅就减 小了。小了。 S1S2r1r4r3r2 4. 单相动作电位单相动作电位 (1)彻底夹伤)彻底夹伤r1与与r2之间神经干之间神经干 (2)产生单相)产生单相AP原因原因 兴奋不能传导至兴奋不能传导至B点点 注意事项:注意事项: 1 1)神经标本尽可能长,仔细除净附着于神经干)神经标本尽可能长,仔细除净附着于神经干 上的结缔组织膜及血管,不能损伤牵拉神经干。上的结缔组织膜及血管,不能损伤牵拉神经干。 2 2)神经干不可与标本盒壁接触,也不要把神

7、经)神经干不可与标本盒壁接触,也不要把神经 干两端折迭在电极上,以免影响动作电位波形。干两端折迭在电极上,以免影响动作电位波形。 3 3)每次刺激后,应注意休息半分钟,再进行下)每次刺激后,应注意休息半分钟,再进行下 次刺激。次刺激。 4 4)保持标本湿润,但电极和神经上不能带有水)保持标本湿润,但电极和神经上不能带有水 珠,以免短路。珠,以免短路。 单刺激方式,刺激幅度单刺激方式,刺激幅度0.13V,刺激波宽,刺激波宽0.1ms,延迟,延迟5ms,同步触发。,同步触发。 实验参数实验参数 采样频率 通道模式 扫描速度 灵敏度 滤波频率 时间常数 为什么为什么AP1AP1较较AP2AP2出现早

8、且波形幅度大呢?出现早且波形幅度大呢? 粗粗 细细 二、制备蛙离体坐骨神经干标本二、制备蛙离体坐骨神经干标本 1.1.破坏脑脊髓破坏脑脊髓 2.2.剪除躯干上部及内脏剪除躯干上部及内脏: : 骶髂关节水平以骶髂关节水平以上上1cm1cm处剪断脊柱处剪断脊柱 3.3.剥皮剥皮, ,并洗净手和用过的器械并洗净手和用过的器械 4.4.游离坐骨神经游离坐骨神经, ,至踝关节至踝关节(神经分离干净、(神经分离干净、 足够长、滴加任氏液)足够长、滴加任氏液) 三三.实验观察项目实验观察项目 1. 引导双相动作电位;引导双相动作电位; 阈强度、最大刺激阈强度、最大刺激 强度强度(同步触发同步触发) 2. 神经干动作电位传导速度的测定神经干动作电位传导速度的测定 3. 神经兴奋性周期变化的检测神经兴奋性周期变化的检测(最大刺激强度)(最大刺激强度) 4. 单相动作电位单相动作电位

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