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文档简介
1、物质的提取、分离和鉴定专题主讲教师:毕诗秀实验要求(1)检测生物组织中还原糖和蛋白质(2)叶绿体色素的提取和分离(3)从生物材料中提取某些特定的成 分(4)蛋白质的提取和分离(5)DNA的粗提取与鉴定掌握程度 参考本考 试大纲中 的:二、考试的 能力要求2.实验与 探究能力【考试说明“生物知识内容表”与此专题有关的实验】、物质的提取、分离和鉴定实验流程及方法迄W逹免材养左身虞色干捉it浚察畜占Tit塞逵致水1.叶绿体色素的提取和分离纽眾十提嵬克分J番定畀液 II层析材新鲜、撮竦的叶片I 菊晖叶片(自的?)J Si6的作用?研虜 JCaCOjWffi? 丙嚴(#)釣作閉? I注霑事顼(込匕炫)J
2、 正警齡渡淹藤色?I过盜浦液为負竦色可能的原因? |丨遊液几半无色可能的療因 厂制备酒妖華画溢液剜线沒盍爭頊? 虜析液的成介 注盍爭頊分雷叶蜂体色 呆的虑理?2. DNA粗提取和鉴定实验取玛全血SDS:畛杯细颐EDTA* 护 DNA 15mol/LNaCL:津辭DNA理血轴絶液 戸是愉tt#踱雑Jfe禹心pmol/LNCL浊滾會DNANaCL.二苯按界彥焙水析出DNAfl* jlmol/LNaCL甲落解DNA*孺勵兰空析出DNAU#二、典型例题1以下有关生物组织中还原糖、脂肪和蛋白质鉴定的实验中,叙述错误 的是A 红色的西瓜汁是鉴定还原性糖的理想材料B 花生子叶中脂肪的鉴定需要使用显微镜C 用
3、双缩脲试剂检测蛋白质不需要加热D 还原糖的鉴定需热水浴才产生砖红色沉淀2 在叶绿体色素的提取和分离实验中,收集到的滤液绿色过浅,其原因 可能是未加石英砂、研磨不充分一次加入大量的无水酒精提取分次加入少量无水酒精提取使用放置数天的菠菜叶A. B . C . D .3. 某研究组获得了水稻的叶黄素缺失突变体。将其叶片进行了红光照射光 吸收测定和色素层析条带分析(从上至下),与正常叶片相比,实验结果是A. 光吸收差异显著,色素带缺第 2条B. 光吸收差异不显著,色素带缺第 2条C. 光吸收差异显著,色素带缺第 3条D. 光吸收差异不显著,色素带缺第 3条4中国的饮食讲究“色香味”,颜色会影响消费。某
4、同学拟研发“绿色” 食用色素,他以生长很快的入侵植物水葫芦为材料进行如下实验。根据所 学知识和实验结果,请回答:I.提取叶绿素片磊* 熬敢浪 *0*(1)提取食用叶绿素的 X应该为,原因是II.探究pH对叶绿素稳定性的影响取一些叶绿素粗产品,配成一定浓度的溶液,于室温(约25 C)下进行实验,方法和结果如下表。实验 组号叶绿素 溶液(mL)调pH至处理时间(min)溶液颜色3.0Y10绿色3.07.010绿色3.06.010黄绿色3.05.010黄褐色注:叶绿素被破坏后变成黄褐色。(2)表中Y应该为,原因是(3 )若用作食品色素,天然叶绿素色素不适用于 食品,否则(4)该同学想了解叶绿素产品中
5、是否含有其他色素,请你提供检测方法并写出主要步骤。5. 在利用鸡血进行“ DNA的粗提取与鉴定”的实验中,相关叙述正确的是A. 用蒸馏水将NaCI溶液浓度调至0.14 mol/L ,滤去析出物B. 调节NaCI溶液浓度或加入木瓜蛋白酶,都可以去除部分杂质C. 将丝状物溶解在 2 mol/L NaCl溶液中,加入二苯胺试剂即呈蓝色D. 用菜花替代鸡血作为实验材料,其实验操作步骤相同6. 某生物小组开展 DNA粗提取的相关探究活动。具体步骤如下:材料处理:称取新鲜的花菜、辣椒和蒜黄各2份,每份10 g。剪碎后分成两组,一组置于 20C、另一组置于-20 C条件下保存 24 h。DNA粗提取:第一步
6、:将上述材料分别放入研钵中,各加入15mL研磨液,充分研磨。用两层纱布过滤。取滤液备用。第二步:先向6个小烧杯中分别注入 10mL滤液,再加入20 mL体积分数 为95%的冷酒精溶液,然后用玻璃棒缓缓地向一个方向搅拌,使絮状物 缠绕在玻璃棒上。第三步:取6支试管,分别加入等量的2 mol/L NaCl溶液溶解上述絮状物。DNA检测:在上述试管中各加入4 mL二苯胺试剂。混合均匀后,置于沸水中加热5 min,待试管冷却后比较溶液的颜色深浅,结果如下表。材料保存温度花菜辣椒蒜黄20C+ + + +-20C+ + + + + + +分析上述实验过程,回答下列问题:该探究性实验课题名称是 第二步中”缓
7、缓地”搅拌,这是为了减少 。根据实验结果,得出结论并分析。结论1与20 C相比,相同实验材料在-20 C条件下保存,DNA勺提取 量较多。结论2: 针对结论1请提出合理的解释:DNA粗提取:第一步:将上述材料分别放入研钵中,各加入15mL研磨液,充分研磨。用两层纱布过滤。取滤液备用。第二步:先向6个小烧杯中分别注入 10mL滤液,再加入20 mL体积分数 为95%的冷酒精溶液,然后用玻璃棒缓缓地向一个方向搅拌,使絮状物 缠绕在玻璃棒上。第三步:取6支试管,分别加入等量的 2 mol/L NaCI溶液溶解上述絮状 物。DNA佥测:在上述试管中各加入 4 mL二苯胺试剂。混合均匀后,置于沸水 中加
8、热5 min,待试管冷却后比较溶液的颜色深浅,结果如下表。氯仿密度大于水,能使蛋白质变性沉淀,与水和DNA均不相溶,且对DNA影响极小。为了进一步提高 DNA纯度,依据氯仿的特性.在DNA粗提取第三步的基础上继续操作的步骤是:。然后用体积分数为 95 % 的冷酒精溶液使DNA析出。7某生物小组研究萝卜贮藏根组织细胞中是否存在蛋白质和DNA他们从查阅资料得知:蛋白质在10%NaCI溶液中可沉淀析出;在蛋白质溶液中,加入双缩脲试剂,溶液呈现特有的颜色;DNA溶于10%NaCI溶液但在95%酒精中呈白色絮状沉淀,析出;DNA可以被甲基绿染液染成蓝绿色实验材料和实验用具:略药品及试剂:蒸馏水、10%
9、NaCl溶液、95%酒精、甲基绿染液、双缩脲试剂、蛋白质标准样品。请你根据所提供的条件完善实验方案。一、材料处理:称取 50g萝卜冼净切块,加水 30ml,粉碎机粉碎,将匀浆经纱布过滤。二、提取:提取蛋白质:向经纱布过滤得到的滤液中加入 ,直至。经滤纸过滤,将 放入试管中,加入1ml蒸馏水,振荡,用于蛋白质鉴定。提取 DNA向除去 的滤液中,加入 :用玻棒轻轻搅拌,见有 产生,经滤纸过滤,用镊子将置于载玻片,用于 DNA鉴定。三、鉴定及结果:在用于蛋白质鉴定的实验试管中,加入 ,产生色反应;同时将 和1ml蒸馏水 放入另一试管,也加相同的试剂作为对照实验。观察到 ,说明实验试管中有蛋白质存在。
10、在用于 DNA鉴定的载玻片上,滴加 ,呈现,说明该白色絮状沉淀为 DNA通过对白萝卜贮藏根匀浆液的检测,说明有 的存在。四、讨论:蛋白质在萝卜贮藏根组织细胞中所起的作用有 DNA主要来自萝卜贮藏根组织细胞的 8.请回答下列与实验室提取芳香油有关的问题:植物芳香油的提取可采用的方法有萃取法、 和。芳香油溶解性的特点是不溶于 ,易溶于,因此可用 作为提取剂来提取芳香油。橘子果实含有芳香油,通常选用新鲜 作为材料提取芳香油,原因是。对材料压榨后可得到糊状液体,为除去其中的固体物获得乳状液可采用的方法是。用水蒸汽蒸馏法提取芳香油时,在油水混合物中加入氯化钠并放置一段时间后,芳香油将分布于液体的 层,原因是 。加入氯化钠的作用是 。常用于分离油层和水层的器皿是 。分离出的油层中加入无水硫酸钠的作用是。用蒸馏法提取芳香油过程中,加热时需安装冷凝回流装置,其目的是 当蒸馏瓶
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