药物检测技术 第3章 药物的性状检测和鉴别技术

1、药物的鉴别：药物的鉴别：指根据药物质量标准中指根据药物质量标准中性状和鉴别性状和鉴别项下的规项下的规 定或方法，依据药物的理化性质观测外观、臭、味等性状，定或方法，依据药物的理化性质观测外观、臭、味等性状， 测定某些理化常数或特征光谱，同时结合药物的化学结构测定某些理化常数或特征光谱，同时结合药物的化学结构 特点进行某些化学反应，从而对特点进行某些化学反应，从而对药物的真伪药物的真伪作出判断的过作出判断的过 程。程。 真伪鉴别必须通过一组试验真伪鉴别必须通过一组试验 才能完成！才能完成！ 目的目的 判断药物的真伪，是药物检验工作判断药物的真伪，是药物检验工作 的首项任务。的首项任务。 内容内容

2、 性状性状 鉴别鉴别 外观、物理常数外观、物理常数 化学鉴别法化学鉴别法 光谱鉴别法光谱鉴别法 色谱鉴别色谱鉴别 生物学生物学 课堂活动课堂活动标准规定标准规定 甲硝唑原料甲硝唑原料 药药 对乙酰氨基对乙酰氨基 酚片酚片 复方板蓝根复方板蓝根 颗粒颗粒 （2010版药典）版药典） 本品为棕色的颗粒；味甜、微苦。本品为棕色的颗粒；味甜、微苦。 （部颁标准十二册）（部颁标准十二册） 第一节第一节 药物的性状检测技术药物的性状检测技术 外观外观 稳定性稳定性 剂剂 型型 化药制剂化药制剂 臭、味臭、味 溶解性溶解性 物理常数物理常数 酸碱性酸碱性 稳定性稳定性 外观外观 原料药原料药 二、溶解度二、

3、溶解度 v溶解度溶解度是指药物在一定温度下在规定溶剂中的溶 解性能，他是药物的一种物理性质，在一定程度 上反映了药物的纯度。 相对密度相对密度 熔点熔点 pH值值 折光率折光率 比旋度比旋度 黏度测定黏度测定 吸收系数吸收系数 凝点测定法凝点测定法 馏程测定法馏程测定法 酸值、碘值、皂化值酸值、碘值、皂化值 v定义、意义定义、意义 v测定方法种类，适应范围测定方法种类，适应范围 v仪器与试药仪器与试药 v测定步骤测定步骤 v数据处理数据处理 v注意事项（关键点）注意事项（关键点） 光谱鉴别法光谱鉴别法 2 色谱鉴别法色谱鉴别法3 其它鉴别法其它鉴别法4 化学鉴别法化学鉴别法1 概概 述述 目的

4、：鉴别药物真伪。目的：鉴别药物真伪。 化学反应化学反应仪器分析仪器分析 测定物理测定物理 常数常数 综合分析综合分析 药物鉴别特点药物鉴别特点 已知物确证已知物确证 试验试验 1 鉴别试验为鉴别试验为 个别分析，个别分析， 非系统分析非系统分析 2 通常采用不通常采用不 同方法鉴别，同方法鉴别， 综合分析综合分析 3 原料药鉴别项下原料药鉴别项下 试验项目为试验项目为3 34 4 有的仅有的仅1 12 2个，个， 制剂鉴别项目一制剂鉴别项目一 般比原料药少般比原料药少 4 药物鉴别方法药物鉴别方法 化学鉴别法化学鉴别法 光谱鉴别法光谱鉴别法 色谱鉴别法色谱鉴别法 其它鉴别法其它鉴别法 化学鉴别

5、法化学鉴别法 Ch.P、USP 一般鉴别试验一般鉴别试验 不同的称号不同的称号 JP、BP 定性反应定性反应 一、一般鉴别试验（一、一般鉴别试验（general identification test） （一）概念、特点及试验项目（一）概念、特点及试验项目 l以药物的化学结构及其物理化学性质为依据，以药物的化学结构及其物理化学性质为依据， 通过化学反应来鉴别药物真伪的。通过化学反应来鉴别药物真伪的。 l无机药物：根据其组成的阴离子和阳离子的特无机药物：根据其组成的阴离子和阳离子的特 殊反应，并以药典附录殊反应，并以药典附录III项下的一般鉴别试验项下的一般鉴别试验 为依据。为依据。 l有机药物

6、：采用典型的官能团反应。有机药物：采用典型的官能团反应。 l一般鉴别试验的项目（一般鉴别试验的项目（2015版药典有版药典有35项）。项）。 l一般鉴别试验仅供确认单一的化学药物。一般鉴别试验仅供确认单一的化学药物。 l一般鉴别试验仅供确认单一的化学药物，如为一般鉴别试验仅供确认单一的化学药物，如为 数种化学药物的混合物或有干扰物质存在时，数种化学药物的混合物或有干扰物质存在时， 除另有规定外，均不适用。除另有规定外，均不适用。 l通过一般鉴别试验只能证实是某一类药物，而通过一般鉴别试验只能证实是某一类药物，而 不能证实是哪一种药物。不能证实是哪一种药物。 合合 适适 试试 剂剂 气体产生气体

7、产生荧光出现荧光出现沉淀生成沉淀生成颜色改变颜色改变 真伪真伪 药物有效成分的有无判断药物有效成分的有无判断 衍生物熔点衍生物熔点 1、干法、干法 l 将供试品加适当试剂在规定的温度条件下（一般将供试品加适当试剂在规定的温度条件下（一般 是高温）进行试验，观测此时所发生的特异现象。是高温）进行试验，观测此时所发生的特异现象。 l （1）焰色试验：常用干法。利用某些元素所具有）焰色试验：常用干法。利用某些元素所具有 的特异焰色，可鉴别它们为哪一类盐类药物。的特异焰色，可鉴别它们为哪一类盐类药物。 l 方法：取铂丝，用盐酸湿润后，蘸取供试品，在方法：取铂丝，用盐酸湿润后，蘸取供试品，在 无色火焰中

8、燃烧，使火焰显出特殊的颜色。无色火焰中燃烧，使火焰显出特殊的颜色。 l （2）加热分解：在适当的温度条件下，加热使供）加热分解：在适当的温度条件下，加热使供 试品分解，生成有特殊气味的气体。试品分解，生成有特殊气味的气体。 2、湿法、湿法 l 系指将供试品和试剂在适当的溶剂中，于一定条系指将供试品和试剂在适当的溶剂中，于一定条 件下进行反应，发生易于观测的化学变化，如颜件下进行反应，发生易于观测的化学变化，如颜 色、沉淀、气体、荧光等。色、沉淀、气体、荧光等。 （1）显色反应鉴别法）显色反应鉴别法 l 系指供试品溶液中加入适当的试剂溶液，在一定系指供试品溶液中加入适当的试剂溶液，在一定 条件下

9、进行反应，生成易于观测的有色产物。在条件下进行反应，生成易于观测的有色产物。在 鉴别试验中最为常用的反应类型有：鉴别试验中最为常用的反应类型有： l 1）三氯化铁呈色反应）三氯化铁呈色反应酚羟基或水解后产生酚酚羟基或水解后产生酚 羟基；羟基； l 2）异羟肟酸铁反应）异羟肟酸铁反应多为芳酸及其酯类、酰胺多为芳酸及其酯类、酰胺 类；类； l 3）茚三酮呈色反应）茚三酮呈色反应脂肪氨基；脂肪氨基； l 4）重氮化）重氮化-偶合显色反应偶合显色反应芳伯氨基或能产生芳伯氨基或能产生 芳伯氨基；芳伯氨基； l 5）氧化还原显色反应及其它颜色反应。）氧化还原显色反应及其它颜色反应。 （2）沉淀生成反应鉴别

10、法）沉淀生成反应鉴别法 常用的这类反应有：常用的这类反应有： l 1）与重金属离子的沉淀反应）与重金属离子的沉淀反应在一定条件下，在一定条件下， 药物和重金属离子反应，生成不同形式的沉淀；药物和重金属离子反应，生成不同形式的沉淀； l 2）与硫氰化铬铵（雷氏盐）的沉淀反应）与硫氰化铬铵（雷氏盐）的沉淀反应多为多为 生物碱及其盐，具有芳香环的有机碱及其盐；生物碱及其盐，具有芳香环的有机碱及其盐； l 3）其它沉淀反应。）其它沉淀反应。 （3）荧光反应鉴别法）荧光反应鉴别法 常用的荧光发射形式有以下类型：常用的荧光发射形式有以下类型： l 1）药物本身可在可见光下发射荧光；）药物本身可在可见光下发

11、射荧光； l 2）药物溶液加硫酸使呈酸性后，在可见光下发）药物溶液加硫酸使呈酸性后，在可见光下发 射荧光；射荧光； l 3）药物和溴反应后，于可见光下发射出荧光；）药物和溴反应后，于可见光下发射出荧光； l 4）药物和间苯二酚反应后，发射出荧光及药物）药物和间苯二酚反应后，发射出荧光及药物 经其它反应后，发射荧光。经其它反应后，发射荧光。 （4）气体生成反应鉴别法）气体生成反应鉴别法 l 1）大多数的胺（铵）类药物、酰脲类药物以及某）大多数的胺（铵）类药物、酰脲类药物以及某 些酰胺类药物，可经强碱处理后，加热，产生氨些酰胺类药物，可经强碱处理后，加热，产生氨 （胺）气；（胺）气； l 2）化学

12、结构中含硫的药物，可经强酸处理后，加）化学结构中含硫的药物，可经强酸处理后，加 热，发生硫化氢气体；热，发生硫化氢气体； l 3）含碘有机药物经直火加热，可生成紫色碘蒸气；）含碘有机药物经直火加热，可生成紫色碘蒸气； 含醋酸酯和乙酰胺类药物，经硫酸水解后，加乙含醋酸酯和乙酰胺类药物，经硫酸水解后，加乙 醇可产生乙酸乙酯的香味。醇可产生乙酸乙酯的香味。 橙黄到猩橙黄到猩 红色沉淀红色沉淀 供试品供试品稀盐酸稀盐酸1ml 0.1mol/L 亚硝酸钠亚硝酸钠 碱性碱性- 萘酚试液萘酚试液 NH2 R +HNO2 H+ R N+N + OH NN R OH NaOH 加三氯化铁加三氯化铁 试液试液1

13、1滴滴 即显紫色即显紫色 供试品供试品 加稀盐酸加稀盐酸 即析出白色即析出白色 水杨酸沉淀水杨酸沉淀 分离沉淀分离沉淀 在醋酸铵试液中溶解在醋酸铵试液中溶解 l 取供试品的中性溶液，加三氯化铁取供试品的中性溶液，加三氯化铁 试液，即生成赭色沉淀；加稀盐酸，变试液，即生成赭色沉淀；加稀盐酸，变 为白色沉淀。为白色沉淀。 l 取供试品，置干燥试管中，加硫酸取供试品，置干燥试管中，加硫酸 后，加热，不炭化，但析出苯甲酸，在后，加热，不炭化，但析出苯甲酸，在 试管内壁凝结成白色升华物。试管内壁凝结成白色升华物。 铂丝铂丝 盐酸盐酸 无色火焰中燃烧无色火焰中燃烧 供试品供试品 中性溶液中性溶液 醋酸氧铀

14、锌试液醋酸氧铀锌试液 火焰即显鲜黄色火焰即显鲜黄色发生黄色沉淀发生黄色沉淀 白色沉淀白色沉淀 分离分离 沉淀不溶解沉淀不溶解 供试品溶液供试品溶液 白色沉淀白色沉淀 分离分离 沉淀溶解沉淀溶解 加入氯化钡试液加入氯化钡试液 加入醋酸铅试液加入醋酸铅试液 二、专属鉴别试验（二、专属鉴别试验（specific identification test） 根据每一种药物化学结构的差异及其所根据每一种药物化学结构的差异及其所 引起的物理化学特性的不同，选用某些特有引起的物理化学特性的不同，选用某些特有 的灵敏定性反应，来鉴别药物真伪的。是证的灵敏定性反应，来鉴别药物真伪的。是证 实某一种药物的依据。实某

15、一种药物的依据。 光谱鉴别法光谱鉴别法 一、紫外光谱鉴别法一、紫外光谱鉴别法 1、原理、特点及适用范围、原理、特点及适用范围 l 原理：有机药物具有能吸收紫外可见光的基团，原理：有机药物具有能吸收紫外可见光的基团， 则显示特征的吸收光谱，不同结构的物质可产生则显示特征的吸收光谱，不同结构的物质可产生 不同的紫外可见吸收光谱不同的紫外可见吸收光谱 l 特点：具有一定的专属性，仪器普及率高，操作特点：具有一定的专属性，仪器普及率高，操作 简单，应用范围广。缺点是光谱较简单，曲线性简单，应用范围广。缺点是光谱较简单，曲线性 状变化不大，专属性小于状变化不大，专属性小于IR。 l 适用范围：含有适用范

16、围：含有芳环或共轭双键芳环或共轭双键的药物在紫外光区的药物在紫外光区 有特征吸收，含有生色团和助色团的药物在可见光有特征吸收，含有生色团和助色团的药物在可见光 区有吸收。区有吸收。 2、常用的方法、常用的方法 l 对比吸收曲线一致性对比吸收曲线一致性 l 对比最大吸收波长和相应吸光度的一致性对比最大吸收波长和相应吸光度的一致性 l 对比吸收系数的一致性对比吸收系数的一致性 l 对比最大、最小吸收波长和相应吸光度比值的一致对比最大、最小吸收波长和相应吸光度比值的一致 性经化学处理后，测定其反应产物的吸收光谱特性。性经化学处理后，测定其反应产物的吸收光谱特性。 l对比最大吸收波长和同时测定最小吸收

17、波长对比最大吸收波长和同时测定最小吸收波长 的一致性的一致性 l规定一定浓度的供试品在最大吸收波长处的规定一定浓度的供试品在最大吸收波长处的 吸收度吸收度 l规定吸收波长和吸收系数法规定吸收波长和吸收系数法 l规定吸收波长和吸收度比值法规定吸收波长和吸收度比值法 二、红外光谱鉴别法二、红外光谱鉴别法 l特点：能反映出药物分子的结构特点，专特点：能反映出药物分子的结构特点，专 属性强，准确率高。不单独使用本方法进属性强，准确率高。不单独使用本方法进 行鉴别。行鉴别。 l方法：标准图谱对照法方法：标准图谱对照法 l试样制备方法：压片法、糊法、膜法、溶试样制备方法：压片法、糊法、膜法、溶 液法液法

18、色谱鉴别法色谱鉴别法 进行进行 鉴别鉴别比移值比移值Rf 保留时间保留时间 色谱鉴别法色谱鉴别法 l原理：不同物质在不同色谱条件下，产生各原理：不同物质在不同色谱条件下，产生各 自的特征色谱行为。与对照品在相同条件下自的特征色谱行为。与对照品在相同条件下 进行色谱分离，并比较其保留行为和检测结进行色谱分离，并比较其保留行为和检测结 果是否一致来验证真伪。果是否一致来验证真伪。 l方法：方法： （1）薄层色谱鉴别法）薄层色谱鉴别法 l在实际工作中，一般采用对照品（或标准品）在实际工作中，一般采用对照品（或标准品） 比较法，要求供试品斑点的比较法，要求供试品斑点的Rf值应与对照品值应与对照品 斑点

19、一致。斑点一致。 （2）高效液相色谱鉴别法和气相色谱鉴别法）高效液相色谱鉴别法和气相色谱鉴别法 l一般规定按供试品含量测定项下的高效液一般规定按供试品含量测定项下的高效液 相色谱条件进行试验。要求供试品和对照相色谱条件进行试验。要求供试品和对照 品色谱峰的保留时间应一致。含量测定方品色谱峰的保留时间应一致。含量测定方 法为内标法时，可要求供试品溶液和对照法为内标法时，可要求供试品溶液和对照 品溶液色谱图中药物峰保留时间与内标物品溶液色谱图中药物峰保留时间与内标物 峰的保留时间比值应相同。峰的保留时间比值应相同。 (Rf的最佳范围的最佳范围 0.3-0.5,可用范可用范 围围0.2-0.8) 薄层色谱法薄层色谱法 比移值比移值(Rf)定性参数定性参数 原点到斑点中心距离原点到斑点中心距离 原点到溶剂前沿距离原点到溶剂前沿距离 Rf= l l0 原点原点 l l0 0 l l1 1 l l2 2 前沿前沿 1、2样品样品 3标准品标准品 前沿前沿 原点原点 1.5-2.0cm 2.0cm 1 2 3 0.5-1.0cm h W1/2 0.5h0.60