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文档简介

1、2021/6/161 2021/6/162 一、实验目的一、实验目的 1、学习利用平板分离法从土壤分离微生物的基、学习利用平板分离法从土壤分离微生物的基 本操作。本操作。 2、掌握微生物平板计数的方法。、掌握微生物平板计数的方法。 2021/6/163 二、实验原理二、实验原理 稀释到适量浓度稀释到适量浓度 倾注或涂布平板倾注或涂布平板 培养培养 菌落计数菌落计数 2021/6/164 样品充分混匀；样品充分混匀； 同一稀释度三个以上重复，同一稀释度三个以上重复， 取平均值；取平均值； 每个平板上的菌落数目合适，每个平板上的菌落数目合适， 便于准确计数。便于准确计数。 2021/6/165 一

2、般用菌落形成单位（一般用菌落形成单位（colony forming units， CFU）来表示）来表示 原样品中的细胞数。原样品中的细胞数。 2021/6/166 2021/6/167 1、倒平板、倒平板 2、土壤菌悬液的制备、土壤菌悬液的制备 四、实验方法四、实验方法 10g土样土样 + 90ml无菌水无菌水 振荡振荡20min 3、梯度稀释、梯度稀释 取取1ml土壤菌悬液土壤菌悬液移入含移入含9ml无菌水的试管中，吹吸均匀，无菌水的试管中，吹吸均匀， 为稀释为稀释10倍的样品，依次进行梯度稀释倍的样品，依次进行梯度稀释10-110-6 2021/6/168 4、涂布：取、涂布：取0.1m

3、l适当浓度的稀释液涂布于相应平板，每个适当浓度的稀释液涂布于相应平板，每个 稀释度做稀释度做3个平行，个平行， 静置静置10分钟。分钟。 2021/6/169 5、培养、培养 将细菌、真菌、放线菌培养基倒置于将细菌、真菌、放线菌培养基倒置于30培养箱中培养箱中 培养培养3-5d。 6、计数、计数 7、挑菌（纯化）挑菌（纯化） 将培养后长出的单菌落数量、形态、培养特征进行将培养后长出的单菌落数量、形态、培养特征进行 观察，分别挑取单菌落于相应平板上划线、分离，观察，分别挑取单菌落于相应平板上划线、分离， 培养，培养， 检查菌落是否一致、单纯（也可以用显微镜涂片染色镜检查菌落是否一致、单纯（也可以用显微镜涂片染色镜 检是否是单一的微生物），如有杂菌需进一步纯化、分检是否是单一的微生物），如有杂菌需进一步纯化、分 离。离。 每毫升菌落形成单位同一稀释度的三次重复平均数每毫升菌落形成单位同一稀释度的三次重复平均数稀释倍数稀释倍数

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