药物鉴别1完整版

1、 2 第一节 药物的性状 v外观：感观规定，一般性的描述。外观：感观规定，一般性的描述。 v溶解度：反映了在某种溶剂中的溶解性能。溶解度：反映了在某种溶剂中的溶解性能。 v物理常数物理常数: 评价药品质量的重要指标，评价药品质量的重要指标， 反映药品的纯净程度。反映药品的纯净程度。 熔点、熔点、 比旋度、吸收系数比旋度、吸收系数、凝点、折光率、凝点、折光率 相对密度、馏程、黏度、酸值、皂化值、羟值、碘值等相对密度、馏程、黏度、酸值、皂化值、羟值、碘值等 3 外观：外观：指药品的外表感观和色泽，指药品的外表感观和色泽， 包括聚集状态、晶型、色泽以及臭、味包括聚集状态、晶型、色泽以及臭、味 如：如

2、： 维生素维生素B1 “本品为白色本品为白色 结晶或结晶粉末；结晶或结晶粉末； 有微弱的特臭，味苦；有微弱的特臭，味苦； 干燥品在空气中迅即吸收约干燥品在空气中迅即吸收约4%的水分的水分” （色泽）（色泽）（聚集状态）（聚集状态） （臭）（臭）（味）（味） 4 溶解度溶解度 试验法：试验法：供试品准确称取研成细粉供试品准确称取研成细粉 在在252 ，加溶剂，加溶剂 每隔每隔5min振摇振摇30s 无目视可见的无目视可见的溶质颗粒或液滴时，即视为完全溶解溶质颗粒或液滴时，即视为完全溶解 极易溶解极易溶解 系指溶质系指溶质1g(ml)能在溶剂不到能在溶剂不到1ml中溶解；中溶解； 易溶易溶 系指溶

3、质系指溶质1g(ml)能在溶剂能在溶剂1不到不到10ml中溶解；中溶解； 溶解溶解 系指溶质系指溶质1g(ml)能在溶剂能在溶剂10不到不到30ml中溶解；中溶解； 略溶略溶 系指溶质系指溶质1g(ml)能在溶剂能在溶剂30不到不到100ml中溶解；中溶解； 微溶微溶 系指溶质系指溶质1g(ml)能在溶剂能在溶剂100不到不到1000ml中溶解中溶解; 极微溶解极微溶解 系指溶质系指溶质1g(ml)能在溶剂能在溶剂1000不到不到10000ml中溶解；中溶解； 几乎不溶或不溶系指溶质几乎不溶或不溶系指溶质1g(ml)在溶剂在溶剂10000ml中不能完全溶解。中不能完全溶解。 5 第二节第二节

4、药物的鉴别实验药物的鉴别实验 一、一、药物鉴别的目的、意义药物鉴别的目的、意义 根据药物的分子结构、理化性质根据药物的分子结构、理化性质, ,采用化学、物理采用化学、物理 化学或生物学方法来化学或生物学方法来证明已知药物的真伪证明已知药物的真伪。 v而而不是不是对未知物进行定性分析。对未知物进行定性分析。 v是药检工作的是药检工作的首要任务首要任务，杂质检查、含量测定的，杂质检查、含量测定的前提前提。 二、药物鉴别实验分类二、药物鉴别实验分类 一般鉴别实验一般鉴别实验 专属鉴别实验专属鉴别实验 7 一般鉴别试验一般鉴别试验 （general identification test） v是指依据

5、是指依据某一类某一类药物的共同的化学结构或药物的共同的化学结构或 相同的理化特性，来鉴别药物的真伪。相同的理化特性，来鉴别药物的真伪。 有机药物有机药物-官能团官能团 无机药物无机药物-阴离子、阳离子阴离子、阳离子 一般鉴别试验用于证实药物是哪一类，一般鉴别试验用于证实药物是哪一类， 要进一步证实是哪一种药物，还需要结合专属鉴别试验要进一步证实是哪一种药物，还需要结合专属鉴别试验 8 一般鉴别试验一般鉴别试验 （general identification test） Ch.P附录附录中有：中有： 9 1.1.有机氟化物有机氟化物 有机氟有机氟 氧瓶燃烧氧瓶燃烧 无机氟离子无机氟离子 pH4.

6、3 茜素氟蓝茜素氟蓝硝酸亚铈硝酸亚铈 蓝紫色蓝紫色络合物络合物 +F-+Ce3+ pH4.3 碱液吸收碱液吸收 10 2. 有机酸盐有机酸盐 (1)(1) 水杨酸盐水杨酸盐 水杨酸水杨酸 + FeCl3 中性条件中性条件 弱酸性条件弱酸性条件 红色配位化合物红色配位化合物 紫色配位化合物紫色配位化合物 6 + 4FeCl3 + 12HCl 水杨酸盐水杨酸盐+稀盐酸稀盐酸水杨酸（白色沉淀）水杨酸（白色沉淀） 溶于醋酸铵溶于醋酸铵 11 (2) (2) 酒石酸盐酒石酸盐 供试品溶液（中性）供试品溶液（中性）+ 氨制硝酸银氨制硝酸银 银镜银镜 水浴中水浴中 HOCHCOOH HOCHCOOH +2A

7、g(NH3)2OH HOCCOONH4 HOCCOONH4 2Ag+ +2NH3+2H2O 水浴中水浴中 12 3.3.芳香第一胺类芳香第一胺类 供试品供试品 + 稀盐酸稀盐酸 0.1mol/L亚硝酸钠亚硝酸钠 碱性碱性 - -萘酚试液萘酚试液 橙黄色橙黄色到到猩红色猩红色 沉淀沉淀 N2+Cl-. +NaNO2+2HCl+NaCl+2H2O N2+Cl-. + +NaOH +NaCl+2H2O 13 4.4.托烷生物碱类托烷生物碱类 此类生物碱中具有莨菪酸结构，此类生物碱中具有莨菪酸结构，有有Vitali反应反应, ,显紫色显紫色。 水解水解 3HNO3HNO3 3 三硝基衍生物三硝基衍生物

8、 KOHKOH (C(C2 2H H5 5OH)OH) KOHKOH 深紫色深紫色 莨菪酸莨菪酸 14 5.5.无机金属盐无机金属盐（Na, K, Ca, NH4+) 焰色反应：焰色反应：Na显鲜黄色显鲜黄色；K显紫色显紫色；CaCa显砖红色显砖红色 铵盐：铵盐： 供试品供试品 + NaOH 氨气氨气 使湿润的使湿润的 红色红色石蕊石蕊 试纸变试纸变蓝蓝 使硝酸亚汞试液湿使硝酸亚汞试液湿 润的滤纸显润的滤纸显黑色黑色 15 6. 无机酸根无机酸根 氯化物：氯化物：Cl- + Ag+ AgCl 白色乳状白色乳状 Cl- + MnO2 Mn2+ + Cl2 硫酸盐：硫酸盐： SO42- + Ba2

9、+ BaSO4 白色白色 SO42- + Pb2+ PbSO4 白色白色 加盐酸，无白色沉淀加盐酸，无白色沉淀 硝酸盐：硝酸盐： Cu + NO3- Cu(NO3)2+2NO2 （红棕色红棕色） Fe2+ +NO3- Fe 3+ +NO 区分区分 NO3- 、NO2- H2SO4 使湿润的使湿润的KI_ _淀淀 粉试纸粉试纸变蓝变蓝 KMnO4 褪色褪色 NO2- 不褪色不褪色 NO3- H2SO4 H2SO4 16 专属鉴别试验专属鉴别试验 （specific identification test） v是证实是证实某一种某一种药物的依据。药物的依据。 v根据一类药物中根据一类药物中每一种每

10、一种药物化学结构的差异理化特性，药物化学结构的差异理化特性， 选用某些特有的灵敏的定性反应，来鉴别药物的真伪。选用某些特有的灵敏的定性反应，来鉴别药物的真伪。 v一般鉴别试验依据某类药物共同的特点，区别不同类药物。一般鉴别试验依据某类药物共同的特点，区别不同类药物。 v专属鉴别试验在一般鉴别试验的基础上，利用各种药物的化学结专属鉴别试验在一般鉴别试验的基础上，利用各种药物的化学结 构差异，鉴别各个药物单体。构差异，鉴别各个药物单体。 17 共性共性丙二酰脲丙二酰脲-CONHCONHCO- -CONHCONHCO- 可与某些金属离子（可与某些金属离子（AgAg+ +、 CuCu2+ 2+、 、H

11、gHg2+ 2+等）反应呈色或 等）反应呈色或 产生沉淀产生沉淀 巴比妥类药物巴比妥类药物 R +2AgNO3 +2HNO3 一般鉴别试验一般鉴别试验 18 与与Pb2+反应生成黑色反应生成黑色PbS 甲醛硫酸反应甲醛硫酸反应 碘取代反应碘取代反应 专属鉴别试验专属鉴别试验 硫喷妥钠硫喷妥钠 司可巴司可巴 比妥比妥 苯巴苯巴 比妥比妥 19 三、鉴别方法三、鉴别方法 （一）化学鉴别法（一）化学鉴别法 （二）光谱鉴别法（二）光谱鉴别法 （三）（三）X射线衍射法射线衍射法 （四）（四） 色谱鉴别法色谱鉴别法 （五）生物法（五）生物法 20 （一）化学鉴别法（一）化学鉴别法 供试品加入适当的试剂，在

12、一定条件下，发生化学反应，供试品加入适当的试剂，在一定条件下，发生化学反应， 通过产生可观测到的明显现象，来鉴别药物真伪的方法。通过产生可观测到的明显现象，来鉴别药物真伪的方法。 化学鉴别法特点化学鉴别法特点 操作简便、反应快速、实验成本低、应用广操作简便、反应快速、实验成本低、应用广 但专属性比仪器分析法差但专属性比仪器分析法差 分为：分为： （1）呈色反应鉴别法）呈色反应鉴别法 （2）沉淀生成反应鉴别法）沉淀生成反应鉴别法 （3）荧光反应鉴别法）荧光反应鉴别法 （4）气体生成反应鉴别法）气体生成反应鉴别法 （5）试剂褪色的鉴别法）试剂褪色的鉴别法 21 （一）化学鉴别法（一）化学鉴别法 （

13、1）呈色反应鉴别法）呈色反应鉴别法 供试品加入适当的试剂，在一定条件下，反应生成有色产物供试品加入适当的试剂，在一定条件下，反应生成有色产物 三氯化铁呈色反应（酚羟基）三氯化铁呈色反应（酚羟基） 有机氟化物的茜素氟蓝法有机氟化物的茜素氟蓝法 芳香第一胺类重氮化芳香第一胺类重氮化-偶合反应偶合反应 托烷生物碱类托烷生物碱类-Vitali反应反应 肾上腺皮质激素类的四氮唑肾上腺皮质激素类的四氮唑 含羰基结构的苯肼反应含羰基结构的苯肼反应 氨基酸及氨基糖苷类的茚三酮呈色反应氨基酸及氨基糖苷类的茚三酮呈色反应 双缩脲反应双缩脲反应 22 芳香第一胺类芳香第一胺类 芳伯胺芳伯胺 + 稀盐酸稀盐酸 0.1

14、mol/L亚硝酸钠亚硝酸钠 碱性碱性 - -萘酚试液萘酚试液 橙黄色橙黄色到到猩红色猩红色 重氮化重氮化-偶合反应偶合反应 对乙酰氨基酚对乙酰氨基酚红色红色 23 三氯化铁呈色反应（酚羟基）三氯化铁呈色反应（酚羟基） 蓝紫色蓝紫色 对乙酰氨基酚对乙酰氨基酚 （一）化学鉴别法（一）化学鉴别法 （1）呈色反应鉴别法）呈色反应鉴别法 有机氟化物有机氟化物 氧瓶燃烧氧瓶燃烧 无机氟离子无机氟离子 pH4.3 茜素氟蓝茜素氟蓝硝酸亚铈硝酸亚铈 碱液吸收碱液吸收 蓝紫色蓝紫色络合物络合物 有机氟有机氟 24 托烷生物碱类托烷生物碱类-Vitali-Vitali反应反应 此类生物碱中具有莨菪酸结构，此类生物

15、碱中具有莨菪酸结构，有有Vitali反应反应, ,显紫色显紫色。 水解水解 3HNO3HNO3 3 三硝基衍生物三硝基衍生物 KOHKOH (C(C2 2H H5 5OH)OH) KOHKOH 深紫色深紫色 25 肾上腺皮质激素类的四氮唑肾上腺皮质激素类的四氮唑 +2e+2e HH 四氮唑四氮唑 甲甲臜臜 皮质激素具有还原性，能将四氮唑还原为有色皮质激素具有还原性，能将四氮唑还原为有色甲甲臜臜 26 含羰基结构的苯肼反应含羰基结构的苯肼反应 + + +H+H2 2O O 苯肼苯肼 苯腙苯腙 27 氨基酸及氨基糖苷类的茚三酮呈色反应氨基酸及氨基糖苷类的茚三酮呈色反应 左旋多巴左旋多巴 +CO2+

16、3H2O + 例如：例如： 28 双缩脲反应双缩脲反应 紫内酰胺类 碱性酒石酸铜 （开环分解）（开环分解） 2 O H CO N H 2 C u C O H N C C H 3 C O O N a C H 3 S N H N C H 3 C H 3 C O O N a C S N O H O H O O C H 2 N H 2 C H 2 H H 蓝紫色蓝紫色 29 （2 2）沉淀生成反应鉴别法）沉淀生成反应鉴别法 供试品加入适当的试剂，在一定条件下，反应生成沉淀供试品加入适当的试剂，在一定条件下，反应生成沉淀 （一）化学鉴别法（一）化学鉴别法 还原性基团的银镜反应还原性基团的银镜反应 丙二酰

17、脲类的硝酸银反应丙二酰脲类的硝酸银反应 氯化物的银盐沉淀氯化物的银盐沉淀 含氮杂环类与生物碱沉淀剂（碘化铋钾、硅钨酸）的沉含氮杂环类与生物碱沉淀剂（碘化铋钾、硅钨酸）的沉 淀反应淀反应 苯甲酸盐类的三氯化铁反应苯甲酸盐类的三氯化铁反应 生成氧化亚铜红色沉淀反应生成氧化亚铜红色沉淀反应 与重金属离子的沉淀反应与重金属离子的沉淀反应 磺胺类药物的铜盐反应磺胺类药物的铜盐反应 30 丙二酰脲类的硝酸银反应丙二酰脲类的硝酸银反应 +2AgNO3 +2HNO3 Cl- +Ag+AgCl 氯化物的银盐沉淀氯化物的银盐沉淀 31 含有还原性基团的药物含有还原性基团的药物银镜反应银镜反应 +AgNO3+NH3

18、H2O Ag 异烟肼异烟肼 葡萄糖葡萄糖 + 碱性酒石酸铜试液碱性酒石酸铜试液 （Fehling试液试液 ） 氧化亚铜氧化亚铜+葡萄糖酸葡萄糖酸 32 苯甲酸盐类的三氯化铁反应苯甲酸盐类的三氯化铁反应 +3FeCl3+OH- +7NaCl+2Cl- 赭色沉淀赭色沉淀 33 利多卡因与重金属离子反应利多卡因与重金属离子反应 2 +CoCl2 H+ 亮绿色细小钴盐沉淀亮绿色细小钴盐沉淀 34 含氮杂环类的生物碱的沉淀反应含氮杂环类的生物碱的沉淀反应 苯并二氮杂苯并二氮杂 类类 +BiI3 橙红色沉淀橙红色沉淀 氯氮氯氮 氟西泮氟西泮 氯硝西泮氯硝西泮 + 12W03Si02 灰白色沉淀灰白色沉淀

19、4KI C2H5OH 白色白色 C2H5OH 黄色黄色 阿托品阿托品+HgCl2 东莨菪碱东莨菪碱+HgCl2 托烷类生物碱托烷类生物碱 35 吡啶环类吡啶环类 2 +CuSO4+2NH4SCN Cu(SCN)2 +(NH4)2SO4 草绿色配合物沉淀草绿色配合物沉淀 36 磺胺类药物的磺胺类药物的成铜盐反应成铜盐反应 磺酰氨基上的活泼氢原子，可被某些金属离子取代，磺酰氨基上的活泼氢原子，可被某些金属离子取代， 生成有色的金属盐沉淀。磺胺类药物钠盐溶液，加硫酸生成有色的金属盐沉淀。磺胺类药物钠盐溶液，加硫酸 铜试液生成不同颜色的铜盐沉淀，可供区别及鉴别。铜试液生成不同颜色的铜盐沉淀，可供区别及

20、鉴别。 37 (3)(3)荧光反应鉴别法荧光反应鉴别法 药物本身在可见光下发射荧光药物本身在可见光下发射荧光 如：硫酸奎宁溶液显蓝色荧光如：硫酸奎宁溶液显蓝色荧光 药物与适当试剂反应后发射荧光药物与适当试剂反应后发射荧光 如：氯普噻吨如：氯普噻吨+HNO+HNO3 3后，紫外下显绿色后，紫外下显绿色 VB1硫色素（蓝色荧光）硫色素（蓝色荧光） 碱性碱性 K3Fe(CN)6 （一）化学鉴别法（一）化学鉴别法 38 （4 4）气体生成反应鉴别法）气体生成反应鉴别法 大多数伯胺（铵）类药物、酰尿类以及某些酰大多数伯胺（铵）类药物、酰尿类以及某些酰 胺类药物，可经强碱处理后加热产生氨气。胺类药物，可经

21、强碱处理后加热产生氨气。 红色石蕊试纸变蓝红色石蕊试纸变蓝 硝酸亚汞试液湿润的试纸显黑色硝酸亚汞试液湿润的试纸显黑色 （一）化学鉴别法（一）化学鉴别法 39 化学结构含硫药物，可经强酸处理后加热产生化学结构含硫药物，可经强酸处理后加热产生 硫化氢气体硫化氢气体 硫鸟嘌呤硫鸟嘌呤 7H2O 强酸强酸 H2S （臭鸡蛋气味）（臭鸡蛋气味） 使醋酸铅试纸变黑使醋酸铅试纸变黑 40 含碘有机药物经直火加热可生成紫色碘蒸汽含碘有机药物经直火加热可生成紫色碘蒸汽 含醋酸酯和乙酰胺类的药物，经硫酸水解后，含醋酸酯和乙酰胺类的药物，经硫酸水解后， 加乙醇可产生醋酸乙酯的香味。加乙醇可产生醋酸乙酯的香味。 41

22、 （一）化学鉴别法（一）化学鉴别法 （5 5）试剂退色）试剂退色 维生素维生素C C与二氯靛酚反应与二氯靛酚反应 42 （6 6）测定生成物熔点法）测定生成物熔点法 制备衍生物测定熔点法制备衍生物测定熔点法 药物试剂药物试剂 新化合物有一定新化合物有一定mp;mp; 药物酸化或碱化生成游离酸或碱。药物酸化或碱化生成游离酸或碱。 操作繁琐费时间，应用较少。操作繁琐费时间，应用较少。 （一）化学鉴别法（一）化学鉴别法 43 紫外光谱紫外光谱（UV） 红外光谱红外光谱（IR） 近红外光谱法近红外光谱法（NIRS） 原子吸收法原子吸收法（AAS） 核磁共振法核磁共振法（NMR） （二）光谱鉴别法（二）

23、光谱鉴别法 44 1 1、紫外光谱鉴别法、紫外光谱鉴别法 紫外光谱法操作简便、快速。紫外光谱法操作简便、快速。 用作鉴别的专属性远不如红外光谱法。用作鉴别的专属性远不如红外光谱法。 紫外光谱相同的物质不一定是同一种物质紫外光谱相同的物质不一定是同一种物质。 （二）光谱鉴别法（二）光谱鉴别法 45 紫外光谱法常有的方法紫外光谱法常有的方法 v 测定最大吸收波长，或同时测定最小吸收波长；测定最大吸收波长，或同时测定最小吸收波长； v 规定浓度的供试液在最大吸收波长测定吸收度；规定浓度的供试液在最大吸收波长测定吸收度； v 规定吸收波长和吸收系数法；规定吸收波长和吸收系数法； v 规定吸收波长和吸光

24、度比值法；规定吸收波长和吸光度比值法； v 经化学处理后经化学处理后, 测定其反应产物吸收光谱特性测定其反应产物吸收光谱特性 以上方法可单用，也可几个结合起来使用，以提高专属性以上方法可单用，也可几个结合起来使用，以提高专属性 46 测定最大吸收波长测定最大吸收波长, ,或同时测定最小吸收波长或同时测定最小吸收波长 乙胺嘧啶乙胺嘧啶 供试品在供试品在0.1mol/L0.1mol/L盐酸介质盐酸介质 中的紫外吸收在中的紫外吸收在272nm272nm处为峰处为峰,216nm,216nm处为谷。处为谷。 47 规定吸收波长和吸光度比值法规定吸收波长和吸光度比值法 两性霉素在两性霉素在362nm362

25、nm、381nm381nm、405nm405nm波长处有最大吸收波长处有最大吸收. . 规定规定362nm362nm/ /381nm381nm处吸光度比值不大于处吸光度比值不大于0.60.6 381nm381nm/ /405nm405nm波长比值不大于波长比值不大于0.90.9 VBVB12 12 361nm/278nm 1.70 361nm/278nm 1.701.881.88 361nm/550nm 3.15 361nm/550nm 3.15 3.453.45 48 己稀雌酚注射液用供试品溶液己稀雌酚注射液用供试品溶液250-450nm250-450nm 波长吸收光谱与对照品是否一致鉴别。

26、波长吸收光谱与对照品是否一致鉴别。 与对照品比较与对照品比较, ,对比吸收光谱的一致性对比吸收光谱的一致性 49 Ch.P 示例一示例一 盐酸布比卡因的鉴别试验盐酸布比卡因的鉴别试验 0.40mg/ml max: 263nm、271nm A: 0.530.58;0.430.48 规定一定浓度的供试液在最大吸收波长处的吸光度规定一定浓度的供试液在最大吸收波长处的吸光度 示例二示例二 地蒽酚的鉴别试验地蒽酚的鉴别试验 max: 257nm、289nm、 356nm A257/ A289=1.061.10 A356/ A289=0.900.94 规定最大吸收波长和吸光度比值法规定最大吸收波长和吸光度

27、比值法 50 示例三示例三 氯贝丁酯的鉴别试验氯贝丁酯的鉴别试验 0.10mg/ml max: 280nm、288nm 10g/ml max: 226nm 规定一定浓度下的供试液的最大吸收波长规定一定浓度下的供试液的最大吸收波长 示例二示例二 专属性相对较好专属性相对较好 51 vUSP USP 采用对照品法采用对照品法 供试药与其对照品按同一方法处理，在同样条件下供试药与其对照品按同一方法处理，在同样条件下 紫外光谱图一致紫外光谱图一致。 vBP BP 规定一定波长范围内，仅有一个最大或规定一定波长范围内，仅有一个最大或 最小吸收最小吸收 vJP JP 与与Ch.PCh.P相似相似 各国紫外

28、鉴别法比较各国紫外鉴别法比较 52 2 2、红外分析法、红外分析法 IRIR光谱法光谱法是有机药物分子的振动是有机药物分子的振动- -转动光谱，能转动光谱，能反映药物分子的反映药物分子的 结构结构特点，分子中每个基团一般都由相应的吸收峰，且特征性强，特点，分子中每个基团一般都由相应的吸收峰，且特征性强， （除光学异构体及长链烷烃同系物外）几乎没有两种化合物具有完（除光学异构体及长链烷烃同系物外）几乎没有两种化合物具有完 全相同的红外吸收光谱，即红外吸收光谱具有全相同的红外吸收光谱，即红外吸收光谱具有“指纹性指纹性” ，被广被广 泛地应用于化合物的鉴别。泛地应用于化合物的鉴别。 特点特点 专属性

29、强、准确度高的特点，应用广（固、液、气）专属性强、准确度高的特点，应用广（固、液、气） 主要用于组分单一、结构明确的原料药以及结构相近的主要用于组分单一、结构明确的原料药以及结构相近的 同类物质。同类物质。 （二）光谱鉴别法（二）光谱鉴别法 53 2 2、红外分析法、红外分析法 标准图谱法：标准图谱法：Ch.PCh.P要求按指定条件绘制供试品的红外要求按指定条件绘制供试品的红外 光吸收图谱，与光吸收图谱，与药品红外光谱集药品红外光谱集中的相应标准图谱中的相应标准图谱 对比，如果峰位、峰形、相对强度都一致时，即为同一对比，如果峰位、峰形、相对强度都一致时，即为同一 种药物。种药物。 对照品法：对

30、照品法：将供试品与对照品在同样的条件下绘制红将供试品与对照品在同样的条件下绘制红 外图谱，彼此对比是否一致的方法。可消除不同仪器和外图谱，彼此对比是否一致的方法。可消除不同仪器和 操作条件造成的误差。操作条件造成的误差。 54 试样的制备方法试样的制备方法 v压片法压片法 供试品（约供试品（约1mg) + 干燥干燥KBr/KCl (约约200mg) 研磨均匀研磨均匀 （玛瑙研钵）（玛瑙研钵） 置压膜中置压膜中 真空真空 加压至加压至0.8-1GPa 2-3min 均匀透明片均匀透明片 无明显颗粒无明显颗粒 供试片供试片 同法制空白同法制空白KBr/KCl片，做空白校正，扣除背景干扰片，做空白校

31、正，扣除背景干扰 55 v糊法糊法 供试品（约供试品（约5mg ）,滴加少量液体石蜡或其他液体滴加少量液体石蜡或其他液体 制成糊状物制成糊状物 玛瑙研钵玛瑙研钵 取适量取适量 夹于两个夹于两个KBr片片 （150mg/片）片）之间之间 供试片供试片 KBr（约（约300mg）制成空白片，作背景校正）制成空白片，作背景校正 56 v 膜法膜法 供试品多为高分子聚合物，可做成液膜铺展于供试品多为高分子聚合物，可做成液膜铺展于 适宜的盐片上。适宜的盐片上。 v 溶液法溶液法 液体供试品（或溶于适宜的溶剂内），液体供试品（或溶于适宜的溶剂内）， 制成制成1%-10%1%-10%的溶液，置于的溶液，置于

32、0.1-0.5mm0.1-0.5mm厚的液体池厚的液体池 中，即可测得。中，即可测得。 57 应用光谱图比对时应注意的问题应用光谱图比对时应注意的问题 1 1）固体药品应按规定的方法进行预处理）固体药品应按规定的方法进行预处理 2 2）盐酸盐类的药品制片时一般使用）盐酸盐类的药品制片时一般使用KClKCl做基质做基质 3 3）注意仪器自身的影响）注意仪器自身的影响 可与标准的聚苯乙烯薄膜比对，校正可与标准的聚苯乙烯薄膜比对，校正 4 4）不适用多组分、多晶形药物）不适用多组分、多晶形药物 5 5）以新版）以新版药品红外光谱集药品红外光谱集为准为准 6 6）制剂鉴别，应消除辅料干扰，提取分离后再

33、制片）制剂鉴别，应消除辅料干扰，提取分离后再制片 7 7）Ch.P 4000-400cmCh.P 4000-400cm-1 -1 BP 2000-400cm BP 2000-400cm-1 -1 58 各国红外光谱法比较各国红外光谱法比较 Ch.P Ch.P 采用标准图谱对照法采用标准图谱对照法 BP BP 采用标准图谱对照法、对照品法采用标准图谱对照法、对照品法 USP USP 采用对照品法采用对照品法 JP JP 规定条件下测定一定波长处特征吸收峰。规定条件下测定一定波长处特征吸收峰。 59 （二）光谱鉴别法（二）光谱鉴别法 3、近红外光谱法、近红外光谱法 近红外谱区近红外谱区:12800

34、-4000cm-1 750-2500nm 通过测定被测物在近红外区的特征光谱，进行定性、定通过测定被测物在近红外区的特征光谱，进行定性、定 量分析的一种分析技术。量分析的一种分析技术。 特点特点 1、获得信息多、获得信息多: 密度、粒子尺寸、直径、大分子聚合度等密度、粒子尺寸、直径、大分子聚合度等 2、样品无需预处理，可直接装入样品池测定、样品无需预处理，可直接装入样品池测定 3、分析速度要快、分析速度要快 扫描：扫描：5次次/s，一般扫描，一般扫描50次次 分析一次分析一次2-3min 4、灵敏度高，应用范围广、灵敏度高，应用范围广 60 板蓝根注射液和川芎注射液的近红外图谱板蓝根注射液和川

35、芎注射液的近红外图谱 三个产地的异穗三个产地的异穗 卷柏近红外谱图卷柏近红外谱图 61 4、原子吸收法原子吸收法 利用原子蒸气可以吸收由该元素作为阴极的空心利用原子蒸气可以吸收由该元素作为阴极的空心 阴极灯发出的特征谱线的特性，根据供试溶液在特阴极灯发出的特征谱线的特性，根据供试溶液在特 征谱线处的最大吸收和特征谱线的强度减弱程度进征谱线处的最大吸收和特征谱线的强度减弱程度进 行定量、定性分析。行定量、定性分析。 主要用于元素分析主要用于元素分析 5、核磁共振核磁共振 通过测定供试品指定基团上的质子峰的化学位移通过测定供试品指定基团上的质子峰的化学位移 和偶合常数进行鉴别。和偶合常数进行鉴别。

36、 （二）光谱鉴别法（二）光谱鉴别法 62 （三）（三）X射线粉末衍射法射线粉末衍射法 X射线波长射线波长0.01-1nm的电磁波的电磁波 利用晶体对利用晶体对X射线的衍射效应来进行定性、定量分析的射线的衍射效应来进行定性、定量分析的 方法。方法。 用于结晶物质的鉴别，供试品与参照品的用于结晶物质的鉴别，供试品与参照品的X衍射图比较衍射图比较 衍射角衍射角 面间距面间距d 相对强度相对强度 63 （三）（三）X射线粉末衍射法射线粉末衍射法 影响因素：影响因素： 药物本身的特性药物本身的特性 入射入射X射线的波长及强度射线的波长及强度 供试品的结晶度、密度、体积供试品的结晶度、密度、体积 室验温度

37、室验温度 研磨压力等研磨压力等 64 （四）色谱鉴别法（四）色谱鉴别法 利用不同物质在不同的色谱条件下，产生各自的特利用不同物质在不同的色谱条件下，产生各自的特 征色谱行为（保留时间，比移值）进行的鉴别试验。征色谱行为（保留时间，比移值）进行的鉴别试验。 常采用对比法常采用对比法 与对照品、已知药品，在相同条件下进行色谱分离与对照品、已知药品，在相同条件下进行色谱分离 并比较。并比较。 lTLC lHPLC lGC 65 （四）色谱鉴别法（四）色谱鉴别法 1 1、薄层色谱鉴别法、薄层色谱鉴别法(TLC) (TLC) 薄层色谱法具有专属性强、操作简便、实验成本低等优点。薄层色谱法具有专属性强、操

38、作简便、实验成本低等优点。 在鉴别试验中，薄层色谱法是色谱法中应用最广的一种方在鉴别试验中，薄层色谱法是色谱法中应用最广的一种方 法。法。Ch.pCh.p（20052005）一部，）一部，15231523项项 通过通过R Rf f值，斑点颜色进行定性。值，斑点颜色进行定性。 66 67 （四）色谱鉴别法（四）色谱鉴别法 2 2、HPLCHPLC、GCGC色谱分析法色谱分析法 供试品和对照色谱峰保留时间一致。供试品和对照色谱峰保留时间一致。 在鉴别试验中，通常含量测定同时用于鉴别的一种方法。在鉴别试验中，通常含量测定同时用于鉴别的一种方法。 68 （四）色谱鉴别法（四）色谱鉴别法 3 3、质谱鉴

39、别法质谱鉴别法 在高真空状态下将被测物离子化，按离子的质荷比大小在高真空状态下将被测物离子化，按离子的质荷比大小 分离，通过离子谱峰强度及相互关系，提供分子结构相分离，通过离子谱峰强度及相互关系，提供分子结构相 关信息，从而进行定性分析。关信息，从而进行定性分析。 离子的精确质量数离子的精确质量数 化合物的分子式化合物的分子式 碎片离子碎片离子 化合物的结构化合物的结构 69 色谱谱鉴别法小结色谱谱鉴别法小结 适用于复杂环境下药物有效成分及杂质鉴别适用于复杂环境下药物有效成分及杂质鉴别, ,具具 有分离、分析同时进行的特点有分离、分析同时进行的特点. . 高效液相色谱法高效液相色谱法(HPLC

40、)(HPLC)、气相色谱法、气相色谱法(GC)(GC) 供试品和对照品色谱峰保留时间一致供试品和对照品色谱峰保留时间一致. . 薄层扫描法薄层扫描法(TLC)(TLC)对照品比较法，供试对照品比较法，供试 品斑点与对照品的品斑点与对照品的R Rf f值及斑点的颜色应一致值及斑点的颜色应一致. . 色谱法（色谱法（ HPLC GC TLC)HPLC GC TLC) 70 （五）（五） 生物学法生物学法 是利用微生物或实验动物鉴别法是利用微生物或实验动物鉴别法 v胰岛素生物检定法胰岛素生物检定法 v肝素生物检定法肝素生物检定法 71 药物鉴别方法新动向药物鉴别方法新动向 1 1、仪器方法用于药物鉴

41、别的数量大大增加，、仪器方法用于药物鉴别的数量大大增加， USPUSP、BP BP 仪器鉴别法：化学鉴别法（仪器鉴别法：化学鉴别法（2:12:1） BP BP ：主要用：主要用TLCTLC USP USP：HPLCHPLC 2 2、制剂广泛采用、制剂广泛采用IRIR法鉴别法鉴别 72 例例1.1.维生素维生素C C的鉴别的鉴别 （1 1）药典中规定：）药典中规定： 维生素维生素C C的比旋度应为的比旋度应为 +20.5+20.5+21.5+21.5 (2)(2)在维生素在维生素C C的分子中具有烯二醇的结构，的分子中具有烯二醇的结构， 这个结构具有很强的还原性，可以和一些氧化剂作用。这个结构具

42、有很强的还原性，可以和一些氧化剂作用。 样品（样品（0.2g0.2g）10ml10ml 水水 5ml5ml黑色黑色AgAg AgNOAgNO3 3 （3 3）红外光谱与对照图谱一致。）红外光谱与对照图谱一致。 药物药物 鉴别方法举例鉴别方法举例 73 四、鉴别试验条件四、鉴别试验条件 （一）溶液的浓度（一）溶液的浓度 溶液的浓度溶液的浓度主要指被鉴别物质的浓度，其大小影响结果的判断。主要指被鉴别物质的浓度，其大小影响结果的判断。 （如化学法中要观察沉淀、颜色；（如化学法中要观察沉淀、颜色；UV法中法中max, A, E1%1cm) （二）溶液的温度（二）溶液的温度 温度温度过高过高可使产物分解，导致颜色变浅，沉淀溶解，甚至观察可使产物分解，导致颜色变浅，沉淀溶解，甚至观察 不到结果，故试验中应注意温度的控制。不到结果，故试验中应注意温度的控制。 74 （三）溶液的酸碱度（三）溶液的酸碱度 许多鉴别反应都需要在一定酸碱度的条件下进行，溶液的酸许多鉴别反应都需要在一定酸碱度的条件下进行，溶液的酸 碱度能够使各反应物