基础医学概要三：分枝杆菌属

1、结核分枝杆菌（Mycobacterium tuberculosis) Medical microbiology 掌握掌握 生物学性状、致病物质及免疫性生物学性状、致病物质及免疫性 结核菌素实验及防治原则结核菌素实验及防治原则 熟悉熟悉 致病性和免疫机制、微生物学检查法致病性和免疫机制、微生物学检查法 了解了解 分枝杆菌属的特点分枝杆菌属的特点 Mycobacterium tuberculosis 结核分枝杆菌结核分枝杆菌 结核分枝杆菌（Mycobacterium tuberculosis) Medical microbiology 分枝杆菌属共同特点分枝杆菌属共同特点 是一类细长略弯曲的杆菌是

2、一类细长略弯曲的杆菌, ,有有分枝生长分枝生长的趋势的趋势 无鞭毛和芽胞，不产内、外毒素和侵袭性酶类，无鞭毛和芽胞，不产内、外毒素和侵袭性酶类， 致病性与菌成分有关致病性与菌成分有关，引起的疾病都呈，引起的疾病都呈慢性慢性， 并伴有并伴有肉芽肿。肉芽肿。 抗酸染色（抗酸染色（+ +） 细胞壁含有细胞壁含有大量的脂质大量的脂质，与染色性、抵抗力、致，与染色性、抵抗力、致 病性等密切相关病性等密切相关 结核分枝杆菌（Mycobacterium tuberculosis) Medical microbiology 分分 类类 分分 类类 对人致病的主要分枝杆菌对人致病的主要分枝杆菌 结核分枝杆菌结核

3、分枝杆菌 人型、牛型人型、牛型结核分枝杆菌结核分枝杆菌 非结核分枝杆菌非结核分枝杆菌 堪萨斯分枝杆菌、海分枝杆菌、堪萨斯分枝杆菌、海分枝杆菌、 瘰痨分枝杆菌、鸟瘰痨分枝杆菌、鸟- -胞内分枝杆胞内分枝杆 菌、蟾分枝杆菌、偶发分枝杆菌菌、蟾分枝杆菌、偶发分枝杆菌 麻风分枝杆菌麻风分枝杆菌 麻风麻风分枝杆菌分枝杆菌 结核分枝杆菌（Mycobacterium tuberculosis) Medical microbiology 3 3月月2424日世界防治结核病日日世界防治结核病日 结核分枝杆菌（Mycobacterium tuberculosis) Medical microbiology 结核分

4、枝杆菌（Mycobacterium tuberculosis) Medical microbiology 结核分枝杆菌（Mycobacterium tuberculosis) Medical microbiology WHO1993WHO1993年宣布全球处于结核病紧急状态，回升原因年宣布全球处于结核病紧急状态，回升原因 （1 1）AIDSAIDS、吸毒、酗酒、贫困、吸毒、酗酒、贫困 （2 2）高危人群的流动及移民）高危人群的流动及移民 （3 3）耐药率上升，预防治疗上不规范）耐药率上升，预防治疗上不规范 （4 4）免疫抑制剂的使用）免疫抑制剂的使用 非洲结核病人非洲结核病人 结核分枝杆菌（M

5、ycobacterium tuberculosis) Medical microbiology 我国的流行现状我国的流行现状 n我国属于全球22个TB高负担国家之一，TB的患病人数在世 界各国中居于第2位。我国TB的流行具有“五多一高”的特 点： nMTB感染人数多。 n现患肺TB病人多。 nTB死亡人数多。 n耐药TB人多。 n农村TB人多。 n传染性肺TB患者疫情居高不下。 结核分枝杆菌（Mycobacterium tuberculosis) Medical microbiology 1 1、形态与染色、形态与染色 形态形态：细长略带弯曲（：细长略带弯曲（典型典型），有），有 时有分枝生长

6、时有分枝生长在不同条件下在不同条件下 形态不尽相同（多形性）形态不尽相同（多形性） 染色染色：抗酸染色：抗酸染色阳性阳性 大小大小：1 1 排列排列：常聚集成团：常聚集成团 MuchMuch 颗粒颗粒 一、生物学性状一、生物学性状 （cell wallcell wall中含有大量脂质，中含有大量脂质，60%60%） 结核分枝杆菌（Mycobacterium tuberculosis) Medical microbiology 2 2、培养特性、培养特性-娇、娇、馋、懒、丑馋、懒、丑 一、生物学性状一、生物学性状 4馋馋：营养要求高，：营养要求高，罗琴氏培养基罗琴氏培养基(Lowenstein

7、Jensen(Lowenstein Jensen）。）。 4懒懒：生长缓慢，：生长缓慢，141418h/18h/代代，2-6W2-6W可见菌落生长。可见菌落生长。 4 液体，液体，1 12 2周，周，菌膜菌膜 4丑丑：菌落呈乳白色或米黄色，表面：菌落呈乳白色或米黄色，表面粗糙呈菜花样粗糙呈菜花样。 4娇娇：专性需氧，：专性需氧，低于低于3030或或高于高于4242均不长，均不长， 最适最适PH6.5 PH6.5 。 结核分枝杆菌（Mycobacterium tuberculosis) Medical microbiology 一、生物学性状一、生物学性状 3、生化反应：不活跃 糖发酵（糖发酵（

8、- -） 结核杆菌触酶（结核杆菌触酶（+ +）、耐热触酶（）、耐热触酶（- -），而非结核分枝），而非结核分枝 杆菌均为（杆菌均为（+ +） 人型可合成烟酸和还原硝酸盐，而人型可合成烟酸和还原硝酸盐，而牛型不能牛型不能。 结核分枝杆菌（Mycobacterium tuberculosis) Medical microbiology 4 4、抵抗力、抵抗力- -四怕、四不怕四怕、四不怕 一、生物学性状一、生物学性状 四怕四怕：湿热、紫外线、：湿热、紫外线、75%75%乙醇、抗结乙醇、抗结 核药物（链霉素、异烟肼、利福平等）核药物（链霉素、异烟肼、利福平等） 四不怕四不怕：干燥、酸、碱、化学消毒剂

9、：干燥、酸、碱、化学消毒剂 结核分枝杆菌（Mycobacterium tuberculosis) Medical microbiology 5 5、变异性、变异性 一、生物学性状一、生物学性状 甘油、胆汁、马铃薯培养基甘油、胆汁、马铃薯培养基 牛型结核杆菌牛型结核杆菌- 卡介苗卡介苗 1313年年(230(230代代) ) 卡介苗卡介苗：使用：使用毒力很弱毒力很弱而而抗原性保留抗原性保留的的活活的牛型的牛型 结核杆菌，制成疫苗用于结核病的预防。结核杆菌，制成疫苗用于结核病的预防。 形态、菌落变异形态、菌落变异 毒力变异毒力变异 耐药性的变异耐药性的变异 二、致病性与免疫性 1、致病物质菌体成分

10、，机体免疫病理损伤 w脂肪酸脂肪酸: :在脂质中含量较大，与在脂质中含量较大，与TBTB的抗酸性有关。的抗酸性有关。 其中其中索状因子索状因子破坏线粒体膜，毒害微粒体酶，破坏线粒体膜，毒害微粒体酶， 抑制中性粒细胞游走和吞噬抑制中性粒细胞游走和吞噬, ,引起慢性肉芽肿引起慢性肉芽肿。 w磷脂磷脂: :促单核细胞增生，抑制蛋白酶的分解作用，使病灶促单核细胞增生，抑制蛋白酶的分解作用，使病灶 组织溶解不完全，组织溶解不完全，形成结核结节和干酪样坏死形成结核结节和干酪样坏死。 w蜡质蜡质D D：细胞壁中的主要成分，是一种肽糖脂与分枝菌酸：细胞壁中的主要成分，是一种肽糖脂与分枝菌酸 的复合物激发机体产

11、生的复合物激发机体产生迟发型超敏反应迟发型超敏反应。 w硫酸脑苷脂和硫酸多酰基化海藻糖硫酸脑苷脂和硫酸多酰基化海藻糖: :有毒菌株有毒菌株能在吞噬细能在吞噬细 胞中长期存活。胞中长期存活。 （1 1）脂质脂质 结核分枝杆菌（Mycobacterium tuberculosis) Medical microbiology 二、致病性与免疫性 1、致病物质菌体成分，机体免疫病理损伤 （2 2）蛋白质）蛋白质: :重要代表是结核菌素重要代表是结核菌素 引起迟发型超敏反应引起迟发型超敏反应, ,局部组织坏死。局部组织坏死。 （3 3）荚膜：助菌黏附入侵，抗吞噬。）荚膜：助菌黏附入侵，抗吞噬。 （4 4

12、）分枝杆菌生长素：脂溶性铁螯合物，将环）分枝杆菌生长素：脂溶性铁螯合物，将环 境中境中铁铁转运到菌体内。转运到菌体内。 结核分枝杆菌（Mycobacterium tuberculosis) Medical microbiology 2 2、所致疾病、所致疾病- -以肺结核为主以肺结核为主 途径：途径：呼吸道、消化道、破损的皮肤黏膜。呼吸道、消化道、破损的皮肤黏膜。 传染源：传染源：排菌的患者排菌的患者 二、二、致病性致病性与免疫性与免疫性 结核分枝杆菌（Mycobacterium tuberculosis) Medical microbiology 2 2、所致疾病、所致疾病- -以肺结核为主

13、以肺结核为主 n原发感染原发感染-原发综合征原发综合征 n继发感染继发感染 二、二、致病性致病性与免疫性与免疫性 多发生于儿童及成年多发生于儿童及成年 细菌细菌 肺泡肺泡 巨噬细胞巨噬细胞 繁殖释放繁殖释放 肺泡渗出性肺泡渗出性 炎症（炎症（原发灶原发灶） 肺门淋巴结肺门淋巴结 淋巴结肿大（淋巴结肿大（原发综合原发综合 征征） 纤维化和钙化。纤维化和钙化。 复发、内源性感染的来源复发、内源性感染的来源 结核分枝杆菌（Mycobacterium tuberculosis) Medical microbiology 2 2、所致疾病、所致疾病- -以肺结核为主以肺结核为主 n原发感染原发感染 n继

14、发感染继发感染- -慢性肉芽肿炎症慢性肉芽肿炎症 二、二、致病性致病性与免疫性与免疫性 空洞空洞 干酪样坏死干酪样坏死 多发生于成人多发生于成人 菌体（内源、外源）菌体（内源、外源） 再次感染再次感染 病灶局限病灶局限 干干 酪样坏死酪样坏死 空洞空洞 慢性过程。慢性过程。 结核分枝杆菌（Mycobacterium tuberculosis) Medical microbiology 肺结核的两种表现肺结核的两种表现 原发综合征：原发灶、淋巴 管炎、肺门淋巴结肿大 。 原发后感染：原发后感染：伴有乏力、体重减轻、 咳嗽、盗汗、午后潮热、胸痛等。病 灶多局限，呈干酪样结节，若结节破 溃，则可形成

15、空洞，传染性强。 结核分枝杆菌（Mycobacterium tuberculosis) Medical microbiology 进入血液循环进入血液循环引起肺内、外播散，如脑、引起肺内、外播散，如脑、 肾、肠、腹腔引起脑结核、肾结核、肠结核、肾、肠、腹腔引起脑结核、肾结核、肠结核、 结核性腹膜炎等结核性腹膜炎等 呼吸道外感染引起的肠，咽喉，皮肤结核等呼吸道外感染引起的肠，咽喉，皮肤结核等 大多与大多与结核分枝杆菌结核分枝杆菌L型型有关有关 结核分枝杆菌（Mycobacterium tuberculosis) Medical microbiology 胞内感染菌，以胞内感染菌，以T T细胞介导

16、的细胞免疫为主。细胞介导的细胞免疫为主。 二、致病性与免疫性二、致病性与免疫性 3 3、免疫性、免疫性 （1 1）免疫机制）免疫机制 只有当只有当TBTB菌在体内存在时才有免疫力，一旦体内的菌在体内存在时才有免疫力，一旦体内的TBTB菌被杀菌被杀 灭，免疫也随之消失灭，免疫也随之消失。 感染免疫感染免疫(infection immunity)(infection immunity)，又称，又称有菌免疫有菌免疫 结核分枝杆菌（Mycobacterium tuberculosis) Medical microbiology 郭霍现象郭霍现象 再感染时溃疡浅、易愈合、不扩散，表明机体已有一定免疫力再

17、感染时溃疡浅、易愈合、不扩散，表明机体已有一定免疫力 但再感染时溃疡发生快，说明在产生免疫的同时有超敏反应的参与但再感染时溃疡发生快，说明在产生免疫的同时有超敏反应的参与 原发后感染原发后感染 原发感染原发感染 二、致病性与免疫性二、致病性与免疫性 3 3、免疫性、免疫性 （2 2）迟发型超敏反应伴随细胞免疫同时存在）迟发型超敏反应伴随细胞免疫同时存在 局 部 红 肿 、 浅 溃 疡 不 扩 散 以 前 感 染 过 或 免 疫 豚 鼠正 常 豚 鼠 局 部 红 肿 、 溃 疡 坏 死 ， 经 久 不 愈 全 身 扩 散 有 毒 TB菌 1 12d2d 101014d14d 易愈合易愈合 细菌细

18、菌 结核分枝杆菌（Mycobacterium tuberculosis) Medical microbiology 试剂试剂 n旧结核菌素旧结核菌素（old tuberculinold tuberculin，OT)OT) 含结核分枝杆菌的甘油肉汤培养物加热过滤液含结核分枝杆菌的甘油肉汤培养物加热过滤液，主要成分是结核蛋，主要成分是结核蛋 白，也含细菌的其他代谢产物和培养基成分。白，也含细菌的其他代谢产物和培养基成分。 n纯蛋白衍化物纯蛋白衍化物(purified protein derivative(purified protein derivative，PPD)PPD) OTOT三氯醋酸沉淀

19、后的纯化物三氯醋酸沉淀后的纯化物 二、致病性与免疫性二、致病性与免疫性 3 3、免疫性、免疫性 （3 3）结核菌素试验）结核菌素试验 是应用结核菌素进行皮肤试验来测定机体对结核杆菌是应用结核菌素进行皮肤试验来测定机体对结核杆菌 是否能引起变态反应的一种试验。是否能引起变态反应的一种试验。 结核分枝杆菌（Mycobacterium tuberculosis) Medical microbiology 二、致病性与免疫性二、致病性与免疫性 3 3、免疫性、免疫性 （3 3）结核菌素试验）结核菌素试验 测红肿硬结直径测红肿硬结直径 5mm5mm为为“+ +” 15mm15mm为为“+” 结核分枝杆菌

20、（Mycobacterium tuberculosis) Medical microbiology - -未感染过结核杆菌，但还要考虑是否感染未感染过结核杆菌，但还要考虑是否感染 初期、初期、 老年人、细胞免疫功能低下。老年人、细胞免疫功能低下。 + +已感染过结核杆菌或预防接种。已感染过结核杆菌或预防接种。 +可能有活动性感染。可能有活动性感染。 二、致病性与免疫性二、致病性与免疫性 3 3、免疫性、免疫性 （3 3）结核菌素试验）结核菌素试验 意义意义 结核分枝杆菌（Mycobacterium tuberculosis) Medical microbiology 选择选择BCGBCG接种对

21、象和免疫效果的测定接种对象和免疫效果的测定 作为婴幼儿结核病诊断的参考作为婴幼儿结核病诊断的参考 测定肿瘤患者的非特异细胞免疫功能测定肿瘤患者的非特异细胞免疫功能 在未接种在未接种BCGBCG的人群中调查结核病的流行情况的人群中调查结核病的流行情况 二、致病性与免疫性二、致病性与免疫性 3 3、免疫性、免疫性 （3 3）结核菌素试验）结核菌素试验 应用应用 结核分枝杆菌（Mycobacterium tuberculosis) Medical microbiology 三、微生物学检查三、微生物学检查 临床资料、细菌学检查、放射学诊断仍是目前肺结核诊断的临床资料、细菌学检查、放射学诊断仍是目前肺结核诊断的 主要依据，其中主要依据，其中细菌学检查具有确诊意义细菌学检查具有确诊意义。 1.1.标本的选择标本的选择 2.2.直接涂片镜检直接涂片镜检: :初步诊断初步诊断 3.3.分离培养分离培养: :一般需一般需2 26 6周长成肉眼可见的菌落。周长成肉眼可见的菌落。 4.4.动物试验：豚鼠腹股沟皮下，动物试验：豚鼠腹股沟皮下，3-4w3-4w，有无结核病变。，有无结核病变。 5.5.快速诊断快速诊断:PCR:PCR 结核病人痰经抗酸染色后，显