专题222动物细胞融合与单克隆抗体文档资料

1、2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体动物细胞融合与单克隆抗体一、动物细胞融合一、动物细胞融合1 1、概念：、概念： 动物细胞融合也称细胞杂交。是指两个或多动物细胞融合也称细胞杂交。是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。个动物细胞结合形成一个细胞的过程。2 2、特点：、特点： 突破了有性杂交的局限，实现远源杂交。突破了有性杂交的局限，实现远源杂交。 融合后形成的单核细胞具有原来两个或多融合后形成的单核细胞具有原来两个或多个细胞的遗传信息。个细胞的遗传信息。3 3、原理：、原理： 细胞膜的流动性。细胞膜的流动性。4 4、诱导方法：、诱导方法： 物理方法物理方法( (电激电激) )、化学方法

2、、化学方法( (聚乙二醇等聚乙二醇等) )、生物方法、生物方法( (灭活的病毒灭活的病毒) )2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体动物细胞融合与单克隆抗体一、动物细胞融合一、动物细胞融合5 5、过程：、过程：以灭活病毒诱导动物细胞融合为例以灭活病毒诱导动物细胞融合为例灭活的灭活的病毒病毒融合融合有丝分裂有丝分裂两个完整的两个完整的杂交细胞杂交细胞不同不同dnadna的两个细胞的两个细胞想一想想一想灭活病毒为什么能够诱导细胞融合？灭活病毒为什么能够诱导细胞融合？2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体动物细胞融合与单克隆抗体一、动物细胞融合一、动物细胞融合6 6、动物细胞融合技术的应用：、动物细胞融

3、合技术的应用： 已成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤已成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种的培育等的主要手段。特别和生物新品种的培育等的主要手段。特别是利用细胞融合技术而发展起来的杂交瘤是利用细胞融合技术而发展起来的杂交瘤细胞技术，为制造单克隆抗体开辟了新途细胞技术，为制造单克隆抗体开辟了新途径。径。动物动物抗体抗体抗原抗原常规方法制备的抗体的缺点常规方法制备的抗体的缺点产量低、纯度低、特异性差产量低、纯度低、特异性差。2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体动物细胞融合与单克隆抗体二、单克隆抗体二、单克隆抗体常规方法：常规方法：2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体动物细胞融合与单克隆抗体二

4、、单克隆抗体二、单克隆抗体1 1、单克隆抗体的概念：、单克隆抗体的概念： 由经过特定的抗原处理过的效应由经过特定的抗原处理过的效应b b细胞和骨细胞和骨髓瘤细胞杂交得到的杂交瘤细胞产生的具有特异髓瘤细胞杂交得到的杂交瘤细胞产生的具有特异性识别某抗原上的某一个特定抗原的抗体。由于性识别某抗原上的某一个特定抗原的抗体。由于是由单一杂交瘤细胞产生的纯抗体，故称单克隆是由单一杂交瘤细胞产生的纯抗体，故称单克隆抗体。抗体。 2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体动物细胞融合与单克隆抗体二、单克隆抗体二、单克隆抗体2 2、单克隆抗体的制备、单克隆抗体的制备1)1)单克隆抗体的制备原理：单克隆抗体的制备原理：

5、 一个效应一个效应b b淋巴细胞只能产生一种单一抗体，一个淋巴细胞只能产生一种单一抗体，一个b b淋巴细胞在体外是不能无限增殖的，而骨髓瘤细胞却淋巴细胞在体外是不能无限增殖的，而骨髓瘤细胞却具有无限增殖的特点，将一个具有无限增殖的特点，将一个b b淋巴细胞与一个骨髓瘤淋巴细胞与一个骨髓瘤细胞融合，可以使杂种细胞具有两个亲本的遗传特点，细胞融合，可以使杂种细胞具有两个亲本的遗传特点，既能无限增殖又能产生专一的抗体。既能无限增殖又能产生专一的抗体。2)2)杂交瘤细胞的特点：杂交瘤细胞的特点： 既能无限增殖又能产生专一的抗体。既能无限增殖又能产生专一的抗体。3 3）单克隆抗体的特点：）单克隆抗体的特

6、点：特异性强特异性强灵敏度高灵敏度高产量大产量大培养骨髓培养骨髓瘤细胞瘤细胞免疫免疫小鼠小鼠多种杂多种杂交细胞交细胞细胞细胞融合融合筛筛选选检检验验分开分开检验检验体外培养体外培养体内培养体内培养单单克克隆隆抗抗体体2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体动物细胞融合与单克隆抗体二、单克隆抗体二、单克隆抗体2 2、单克隆抗体的制备、单克隆抗体的制备4)4)单克隆抗体的制备过程：单克隆抗体的制备过程：细胞融合细胞融合( (杂交杂交) )法法骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞b b淋巴细胞淋巴细胞2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体动物细胞融合与单克隆抗体二、单克隆抗体二、单克隆抗体4 4、单克隆抗体在生产实践中的

7、应用、单克隆抗体在生产实践中的应用1)1)作为诊断试剂：作为诊断试剂： 由于单克隆抗体纯度高、特异性强，能准确由于单克隆抗体纯度高、特异性强，能准确地识别各种抗原物质的细微差异，并跟一定抗原地识别各种抗原物质的细微差异，并跟一定抗原发生特异性结合，应用时具有准确、高效、简易、发生特异性结合，应用时具有准确、高效、简易、快速等优点，所以用于诊断人类疾病和动植物病快速等优点，所以用于诊断人类疾病和动植物病害。害。2)2)用于治疗疾病和运载药物用于治疗疾病和运载药物癌细胞癌细胞生物生物导弹导弹抗癌单克隆抗抗癌单克隆抗体跟放射性同体跟放射性同位素、化学药位素、化学药物或细胞毒素物或细胞毒素原位杀死癌细

8、胞原位杀死癌细胞不损伤正常细胞不损伤正常细胞又减少用药剂量又减少用药剂量利用利用_产生特异性抗体的功能。产生特异性抗体的功能。 利用利用_无限增殖的特性。无限增殖的特性。 利用利用_术将两种细胞融合获得术将两种细胞融合获得 杂交瘤细胞。杂交瘤细胞。 利用利用_术大量培养杂交瘤细胞。术大量培养杂交瘤细胞。b b淋巴细胞淋巴细胞骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞动物细胞融合动物细胞融合动物细胞培养动物细胞培养2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体动物细胞融合与单克隆抗体做一做做一做c1 1、下列关于细胞工程的有关叙述，不正确的是、下列关于细胞工程的有关叙述，不正确的是 ( )( )a a利用花药离体培养得到单倍体

9、植株，从紫草的愈伤组织中提利用花药离体培养得到单倍体植株，从紫草的愈伤组织中提取紫草素，利用细胞工程培育取紫草素，利用细胞工程培育“番茄番茄- -马铃薯马铃薯”杂种植株，都利杂种植株，都利用了植物组织培养技术，而利用秋水仙素处理萌发的种子或幼用了植物组织培养技术，而利用秋水仙素处理萌发的种子或幼苗得到多倍体植株没有采用植物组织培养技术苗得到多倍体植株没有采用植物组织培养技术b b在进行组织培养时，由根尖细胞形成愈伤组织的过程中，可在进行组织培养时，由根尖细胞形成愈伤组织的过程中，可能会发生细胞脱分化，染色体变异或基因突变，而不可能发生能会发生细胞脱分化，染色体变异或基因突变，而不可能发生细胞分

10、化和基因重组细胞分化和基因重组c c动物细胞融合与植物体细胞杂交相比，诱导融合的方法，所动物细胞融合与植物体细胞杂交相比，诱导融合的方法，所用的技术手段，所依据的原理均相同，都能形成杂种细胞和杂用的技术手段，所依据的原理均相同，都能形成杂种细胞和杂种个体种个体dd“试管婴儿试管婴儿”实质上就是实质上就是“体外受精体外受精”和和“胚胎移植胚胎移植”的的“产物产物”，不能使不能产生精子或卵细胞的夫妇能得到自己的，不能使不能产生精子或卵细胞的夫妇能得到自己的孩子；单克隆抗体的制备采用了动物细胞融合技术和动物细胞孩子；单克隆抗体的制备采用了动物细胞融合技术和动物细胞培养技术培养技术2.2.2 动物细胞

11、融合与单克隆抗体动物细胞融合与单克隆抗体做一做做一做2. 2. 基因型为基因型为aaaa与基因型为与基因型为bbbb的动物体细胞的动物体细胞混合，用灭活的仙台病毒处理后，不可能获混合，用灭活的仙台病毒处理后，不可能获得下列哪种基因型的细胞得下列哪种基因型的细胞 ( )( ) a aaaaa baaaa baabb aabb c caabb daabb dbbbbbbbb3. 3. 试管婴儿、试管苗、克隆羊三者均属于生试管婴儿、试管苗、克隆羊三者均属于生物工程技术的杰出成果物工程技术的杰出成果, ,下面对其生物学原理下面对其生物学原理及技术的叙述正确的是及技术的叙述正确的是 ( ) ( ) a

12、a都属于无性生殖都属于无性生殖, ,能保持母本性状能保持母本性状 b b都是细胞工程的技术范围都是细胞工程的技术范围c c都充分体现了体细胞的全能性都充分体现了体细胞的全能性 dd都不会发生基因重组和变异都不会发生基因重组和变异2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体动物细胞融合与单克隆抗体做一做做一做cb4.4.在克隆羊培育过程中，将雄羊的体细胞核移在克隆羊培育过程中，将雄羊的体细胞核移入雌羊的卵细胞中。产生该克隆羊的方式及该入雌羊的卵细胞中。产生该克隆羊的方式及该克隆羊发育成熟后所分泌的性激素依次是克隆羊发育成熟后所分泌的性激素依次是 ( )( ) a a无性生殖雄性激素无性生殖雄性激素 b

13、b无性生殖雌性激素无性生殖雌性激素 c c有性生殖雄性激素有性生殖雄性激素 dd有性生殖雌性激素有性生殖雌性激素a2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体动物细胞融合与单克隆抗体做一做做一做2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体动物细胞融合与单克隆抗体做一做做一做5.5.右图为某同学根据杂交瘤技术右图为某同学根据杂交瘤技术的方法，设计的生产破伤风杆菌的方法，设计的生产破伤风杆菌抗体的实验方案。据图回答：抗体的实验方案。据图回答：该方案能达到预期效果吗？该方案能达到预期效果吗？_。原因是。原因是_。不能 没有将抗原注入小鼠体内，无法获得产生单一抗体的b淋巴细胞 2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体动物

14、细胞融合与单克隆抗体做一做做一做5.5.右图为某同学根据杂交瘤技术右图为某同学根据杂交瘤技术的方法，设计的生产破伤风杆菌的方法，设计的生产破伤风杆菌抗体的实验方案。据图回答：抗体的实验方案。据图回答：图中图中为为 过程，过程，常用常用 作为诱导剂。该作为诱导剂。该细胞继承了细胞继承了_，因此不仅能分泌因此不仅能分泌 ，还有还有_本领。本领。动物细胞融合 灭活病毒 双亲细胞的遗传物质 在体外培养条件下大量增殖 特异性抗体2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体动物细胞融合与单克隆抗体做一做做一做5.5.右图为某同学根据杂交瘤技术右图为某同学根据杂交瘤技术的方法，设计的生产破伤风杆菌的方法，设计的生产

15、破伤风杆菌抗体的实验方案。据图回答：抗体的实验方案。据图回答：该方案的目的是该方案的目的是 。鼠的淋巴细胞和骨髓瘤细胞融鼠的淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合后合后, ,在培养在培养时通过时通过 分裂方式大量繁殖。分裂方式大量繁殖。细胞中染色体数目与淋巴细胞相细胞中染色体数目与淋巴细胞相比有何特点？比有何特点？ ；要观察融；要观察融合后的细胞中的染色体形态、数合后的细胞中的染色体形态、数目目, ,可用一定浓度的可用一定浓度的_处理。处理。制备单克隆抗体 有丝 加倍 龙胆紫 2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体动物细胞融合与单克隆抗体做一做做一做6.6.图是某种淋巴细胞，膜外颗粒状图是某种淋巴细胞，膜外颗

16、粒状物质为抗体。据图回答物质为抗体。据图回答: :（1 1）这是）这是 细胞，它是细胞，它是由由 分化而来的。分化而来的。（2 2）抗体从开始合成到分泌出细）抗体从开始合成到分泌出细胞，经过的细胞结构顺序是（填标胞，经过的细胞结构顺序是（填标号）号） 。抗体的分泌说明。抗体的分泌说明细胞的各种生物膜在结构上具细胞的各种生物膜在结构上具有有 ，并以，并以 的形式转变。的形式转变。浆细胞 b淋巴细胞或记忆细胞 一定的连续性 囊泡 22.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体动物细胞融合与单克隆抗体做一做做一做6.6.图是某种淋巴细胞，膜外颗粒状图是某种淋巴细胞，膜外颗粒状物质为抗体。据图回答物质为抗体。

17、据图回答: :（3 3）在分泌抗体时要消耗由）在分泌抗体时要消耗由 _ _ 提供的能量。提供的能量。（4 4）抗体的化学本质是）抗体的化学本质是 ，它能与它能与 发生特异性结合，发生特异性结合，发挥免疫效应，该过程属于发挥免疫效应，该过程属于 免免疫。疫。6 线粒体 球蛋白 抗原 体液 2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体动物细胞融合与单克隆抗体做一做做一做6.6.图是某种淋巴细胞，膜外颗粒状图是某种淋巴细胞，膜外颗粒状物质为抗体。据图回答物质为抗体。据图回答: :（5 5）若该抗体是单克隆抗体，则）若该抗体是单克隆抗体，则该细胞名称为该细胞名称为 。在制备。在制备单克隆抗体的过程中，要应用的

18、动单克隆抗体的过程中，要应用的动物细胞工程的技术手段物细胞工程的技术手段是是 。杂交瘤细胞 动物细胞融合 培养液培养液典型典型应用应用融合融合方法方法特殊特殊处理处理技术技术手段手段动物细胞工程动物细胞工程植物细胞工程植物细胞工程 2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体动物细胞融合与单克隆抗体四、植物细胞工程与细胞工程的区别四、植物细胞工程与细胞工程的区别血清或血浆血清或血浆蔗糖蔗糖单克隆抗体的制备单克隆抗体的制备人工种子人工种子杂种植物杂种植物物理方法物理方法化学方法化学方法生物方法生物方法物理方法物理方法化学方法化学方法胰蛋白酶处理胰蛋白酶处理制细胞悬浮液制细胞悬浮液纤维素酶和果胶纤维素酶和

19、果胶酶去除细胞壁酶去除细胞壁动物细胞培养动物细胞培养动物融合动物融合植物组织培养，植物组织培养，植物体细胞杂交植物体细胞杂交2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体动物细胞融合与单克隆抗体三、植物细胞杂交与细胞融合的区别三、植物细胞杂交与细胞融合的区别用途用途诱导诱导手段手段细胞融细胞融合方法合方法细胞融细胞融合原理合原理动物细胞融合动物细胞融合植物体细胞杂交植物体细胞杂交项目项目制备单克隆抗体等制备单克隆抗体等克服远缘杂交的障碍，克服远缘杂交的障碍，获得杂种植株获得杂种植株物理方法物理方法( (离心、电刺激离心、电刺激) )、化学方法化学方法( (聚乙二醇聚乙二醇) )、生物方法生物方法( (灭

20、活的仙台病毒灭活的仙台病毒) )物理方法物理方法( (离心、电刺激离心、电刺激) )、化学方法化学方法( (聚乙二醇等聚乙二醇等) )使细胞分散后，诱使细胞分散后，诱导细胞融合导细胞融合去除细胞壁后，诱导原去除细胞壁后，诱导原生质体融合生质体融合细胞膜的流动性细胞膜的流动性细胞膜的流动性细胞膜的流动性由单个b淋巴细胞 经 过 无 性 繁 殖（克隆），形成基因型相同的细胞群，这一细胞群所产生的化学性质单一、特异性强的抗体称为单克隆抗体。 特异性强、灵敏度高 1、本过程利用了哪些原理？、本过程利用了哪些原理？免疫原理，细胞融合原理和动物细胞培养原理. 单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和单克隆抗体制

21、备过程中，骨髓瘤细胞和b淋巴细胞淋巴细胞诱导融合后，要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞，诱导融合后，要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞，在这种培养基上不能存活增殖的细胞是（在这种培养基上不能存活增殖的细胞是（ ） 淋巴细胞淋巴细胞小鼠骨髓瘤细胞小鼠骨髓瘤细胞b淋巴细胞自身融合细胞淋巴细胞自身融合细胞小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞杂交瘤细胞杂交瘤细胞a bc d c1、动物细胞融合的目的中最重要的是、动物细胞融合的目的中最重要的是 （ ） a.克服远源杂交不亲和克服远源杂交不亲和 b.制备单克隆抗体制备单克隆抗体 c.培育新物种培育新物种 d.生产杂种细胞生产杂种细胞2、 动物细胞

22、融合过程中所用的诱导剂动物细胞融合过程中所用的诱导剂灭灭活的病毒，抗原性和感染力的有无是活的病毒，抗原性和感染力的有无是 （ ） a.失去抗原性，具有感染力失去抗原性，具有感染力 b.具有抗原性，也具有感染力具有抗原性，也具有感染力 c.失去抗原性，也失去感染力失去抗原性，也失去感染力 d.具有抗原性，失去感染力具有抗原性，失去感染力bd 3、单克隆抗体是指（、单克隆抗体是指（ ） a.单个骨髓瘤细胞增殖产生的抗体单个骨髓瘤细胞增殖产生的抗体 b.单个单个b淋巴细胞增殖产生的抗体淋巴细胞增殖产生的抗体 c.单个杂交瘤细胞增殖产生的高度单一的抗单个杂交瘤细胞增殖产生的高度单一的抗体体 d.单个抗

23、体通过克隆化，产生大量抗体单个抗体通过克隆化，产生大量抗体4、生产单克隆抗体时，在培养液中加入某种试、生产单克隆抗体时，在培养液中加入某种试剂能筛选出杂交瘤细胞，因为该试剂（剂能筛选出杂交瘤细胞，因为该试剂（ ） a.能抑制淋巴细胞和杂交瘤细胞的能抑制淋巴细胞和杂交瘤细胞的dna复制复制 b.能阻止淋巴细胞的原癌基因被激活能阻止淋巴细胞的原癌基因被激活 c.选择性抑制骨髓瘤细胞的选择性抑制骨髓瘤细胞的dna复制复制 d.能阻止杂交瘤细胞核糖体上所有蛋白质的能阻止杂交瘤细胞核糖体上所有蛋白质的合成合成cc5 5、“生物导弹生物导弹”是指是指 （ ） a. a.单克隆抗体单克隆抗体 b. b.杂交瘤细胞杂交瘤细胞 c. c.产生特定抗体的产生特定抗体的b b淋巴细胞淋巴细胞 d. d.在单克隆抗体上连接抗癌药物在单克隆抗体上连接抗癌药物 d6、科学家们用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合，、科学家们用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合，得到杂交瘤细胞，经培养可产生大量克隆抗体，得到杂交瘤细胞，经培养可产生大量克隆抗体，与骨髓瘤细胞融合的是与骨髓瘤细胞融合的是 （ ） a.经过免疫的经过免疫的t淋巴细胞淋巴细胞 b.未经过免疫的未经过免疫的t淋巴细胞淋巴细胞