分子发光分析法(1)ppt课件

1、第五章第五章 分子发光分析法分子发光分析法第五章第五章 分子发光分析法分子发光分析法基态分子吸收了一定的能量后，跃迁至激发基态分子吸收了一定的能量后，跃迁至激发态，当激发态分子以辐射跃迁方式将其能量态，当激发态分子以辐射跃迁方式将其能量释放前往基态时便产生分子发光释放前往基态时便产生分子发光(Molecular (Molecular Luminescence)Luminescence)。本章主要包括以下内容：。本章主要包括以下内容： 分子荧光分子荧光(Molecular Fluorescence)(Molecular Fluorescence) 分子磷光分子磷光(Molecular Phosp

2、horescence)(Molecular Phosphorescence) 化学发光化学发光(Chemiluminescence)(Chemiluminescence)一、荧光分析法一、荧光分析法1 1、根本原理、根本原理 是根据物质的分子荧光光谱进展定性，是根据物质的分子荧光光谱进展定性，以荧光强度进展定量的一种分析法。以荧光强度进展定量的一种分析法。 无论分子被激发到哪一个电子激发态无论分子被激发到哪一个电子激发态, ,在在10-1310-1310-11s10-11s内经振动弛豫和系内跨越都会跃内经振动弛豫和系内跨越都会跃迁到最低电子激发态的最低振动能级上。迁到最低电子激发态的最低振动能

3、级上。 对于同一物质，荧光比磷光强的多，对于同一物质，荧光比磷光强的多，但但寿命短。寿命短。一、荧光分析法一、荧光分析法2 2、荧光量子效率、荧光量子效率( (产率产率) ) f ff ffffff ff f光速率常 光速率常 K K光的分子光的分子=激分子K +K激分子K +K 非的速率常之和非的速率常之和分子构K 分子构K 影因素：影因素：化境K化境K发荧数发荧数发荧数发荧数发态总数发态总数辐射跃迁数辐射跃迁数结结响响学环学环一、荧光分析法一、荧光分析法3 3、荧光激发与发射光谱：、荧光激发与发射光谱：4 4、荧光光谱的特征：、荧光光谱的特征：m ma ax xm ma ax xm ma

4、ax x ( (p p) ) ( (F F) ) ( (激激) )f f激激f f发发( (1 1) )固固定定发发射射光光波波长长：测测定定I I 的的光光谱谱- -激激发发( (吸吸收收) )光光谱谱( (2 2) )固固定定激激发发光光波波长长：测测定定I I 的的光光谱谱- -发发射射( (荧荧光光) )光光谱谱mma ax xmma ax x( (1 1) ) ( (F F) ) ( (激激) )( (2 2) )荧荧光光激激发发光光谱谱与与发发射射光光谱谱呈呈镜镜像像对对称称关关系系。( (3 3) )荧荧光光发发射射光光谱谱的的形形状状与与激激发发波波长长无无关关。一、荧光分析法

5、一、荧光分析法5 5、荧光定量分析：、荧光定量分析：( (A A 0 0. .0 05 5时时，对对于于一一给给定定物物质质，当当激激发发波波长长和和强强度度一一定定时时) ) f ff f0 0* *f ff fI I = = 2 2. .3 3I I b bc c = = K Kc c产产生生荧荧光光的的主主要要跃跃迁迁类类型型： 影影响响荧荧光光分分子子结结构构( (共共轭轭、刚刚性性平平面面结结构构、重重原原子子效效应应) )强强度度的的因因素素溶溶剂剂的的极极性性( (大大) ) I I ， 温温度度( (低低) )， 化化学学环环境境p pH H值值 表表面面活活性性剂剂， 顺顺磁

6、磁性性物物质质， 一、荧光分析法一、荧光分析法6 6、荧光分析仪器：、荧光分析仪器：2 2个单色器个单色器( (激发光、荧光激发光、荧光) )吸收池吸收池( (四面透明四面透明) )检测器方向与激发光成直角检测器方向与激发光成直角7 7、运用、运用无机化合物分析无机化合物分析有机化合物分析有机化合物分析二、磷光分析法二、磷光分析法1 1、磷光的产生和磷光强度：、磷光的产生和磷光强度：2 2、温度对、温度对IpIp的影响：的影响：T IpT Ip3 3、重原子效应、重原子效应( (外部、内部外部、内部) Ip) Ip 是提高磷光分析灵敏度简单而有效是提高磷光分析灵敏度简单而有效的手段。的手段。

7、p pp p0 0I I = =2 2. .3 3I I b bc c= =K Kc c二、磷光分析法二、磷光分析法试试样样室室 磷磷光光分分析析仪仪器器磷磷光光镜镜消消除除荧荧光光的的干干扰扰4 4、5 5、6 6、运用：与荧光分析法相互补充。、运用：与荧光分析法相互补充。胶胶束束增增稳稳室室温温磷磷光光室室温温磷磷光光固固体体表表面面磷磷光光 三、化学发光分析法三、化学发光分析法 化学发光是由化学反响激发物质所产生的光辐射。1、产生条件：(1)反响必需释放足够的能量(2)能量必需能被反响中间体或某一产物吸收由基态激发态。(3)由激发态基态，必需以光的方式释放能量。三、化学发光分析法三、化学

8、发光分析法2 2、类型：、类型：直接化学发光：直接化学发光：A+BCA+BC* *+D+D，C C* *C+hvC+hv间接化学发光：间接化学发光： C C* * +F C+F +F C+F* *， F F* *F+hvF+hv气相化学发光：气相化学发光：2O3+C2H4 2HCHO2O3+C2H4 2HCHO* *+2O2+2O2 CH2O+hv(435nm) CH2O+hv(435nm)三、化学发光分析法三、化学发光分析法液相化学发光：液相化学发光：a a、鲁米诺、鲁米诺( (发光效率发光效率0.010.010.5)0.5) 拓拓宽宽2 22 2金金属属离离子子催催化化2 22 2氨氨基基酸酸氧氧化化酶酶2 23 32 22 2鲁鲁米米诺诺测测H H OO金金属属离离子子3 3- -氨氨基基苯苯二二甲甲酸酸肼肼测测生生物物物物质质( (有有机机物物) ) 鲁鲁米米诺诺+ +H H OO产产物物+ +h hv v( (4 42 25 5n nmm) )氨氨基基酸酸+ +OO酮酮酸酸+ +N NH H + +H H OO 产产物物+ +h hv v三、化学发光分析法三、化学发光分析法b b、光泽精、没食子酸、洛粉碱