紫外分光光度法测定维生素B片的含量

1、紫外分光光度法测定维生素Bi片的含量维生素B1及其制剂及其制剂常采用的方法有非水滴定法，紫外分光光度法和硫色素荧光法。中国药典用非水溶液滴定法测定原料药，片剂和注射剂采用紫外分光光度法， USP采用硫色素荧光法。采用非水溶液滴定法可能受到氢卤酸盐的干扰，对操作人员要 求较高，采用硫色素滴定法不受氧化破坏产物的干扰，测定准确但操作繁琐，且荧光 测定受干扰因素较多，本实验采用紫外分光光度法进行含量测定。1实验装置及试剂1.1 仪器BS210S型天平，UV751G型紫外/可见分光光度计。1.2 实验材料 维生素B1片（来源：成都第一制药，规格：1-00片*10mg,批号： 061204）,维生素B1

2、标准品（分析纯），维生素B1对照品（200ug/ml，2.0mg/ml）,维 生素B1标准溶液（0.250mg/ml），空白辅料，盐酸溶液（9-1000）。2 实验方法处方分析：组成处方量（g）比例（%）维生素B11016.39淀粉2032.78糊精3049.18硬脂酸镁1.01.639生产1000 片根据处方量分析，维生素 B1含16.39%辅料含83.61%。平均片重约61mg取相当于25mg维生素B1的片粉约0.151、测定方法：取供试品20片，精密称定，研细，称取片粉适量（约相当于维生素B125mg）,置100ml量瓶中，加盐酸溶液（9-1000）约70ml，振摇15min使维生素B1

3、溶解，再加盐 酸溶液（9-1000）稀释至刻度，摇匀，用干燥滤纸滤过，精密量取续滤液5ml，置另一 100ml量瓶中，加盐酸溶液（9-1000）稀释至刻度，摇匀，照分光光度法，在246nm 的波长处测定吸收度，按C12H7CIN4OS.HCI的吸收系数（E醫）为421计算，即得。2、方法验证2.1. 线性和范围精密称取维生素B对照品约25mg置100 ml量瓶中，加盐酸溶液（9-1000）溶 解并稀释至刻度，制备成含维生素 B 250/ml的对照溶液。分别精密量取该溶液 3、 4、5、6、7ml置100ml量瓶中，加盐酸溶液（9-1000）稀释至刻度，摇匀，即得系列 浓度的对照品溶液，照分光光

4、度法，在 246nm的波长处测定吸收度，以吸收度（A）对 浓度（C）回归处理，得标准曲线和回归方程。2.2. 回收试验（准确度试验）对照品溶液的制备：对照品溶液的制备，同2.1项下。供试品溶液的制备：精密称取维生素 B精制原料约0.25g置50ml量瓶中，加入 盐酸溶液（9-1000）稀释至刻度，摇匀，制成5.0mg/m维生素B溶液储备液；分别精 密量取该溶液4、5、6ml置已加入比例量辅料（0.15g 1/100天平）的100ml量瓶中（一 式三份），加盐酸溶液（9-1000）约70ml，振摇使之溶解，再加盐酸溶液（9-1000） 稀释至刻度，滤过，精密量取续滤液 5ml，置另一 100ml

5、量瓶中，摇匀，得高、中、低 三种浓度的试验溶液，照分光光度法，在 246nm的波长处测定吸收度，用对照品比较 法计算含量。2.3、精密度试验取供试品20片，精密称定，研细，称取片粉适量（约相当于维生素B125mg）, 式5份，置100ml量瓶中，加盐酸溶液（9-1000）适量，振摇15min,再加盐酸溶液（9-1000）稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液5ml，置另一 100ml量瓶中，加盐酸溶液（91000）稀释至刻度，摇匀，即得约含维生素B12.5ug/ml的供试品溶液。另取维生素B1对照品适量，用盐酸溶液（9-1000）稀释制成12.5 旧/ml的对照品 溶液。照分光光度法（ChF2

6、005二部附录IVA）在246nm处分别测定供试品溶液和对照 品溶液的吸光度，用百分吸光度和对照品比较法分别进行计算，即得。表1维生素B1标准曲线的制备编号12345对照液浓度 7.5010.0012.5015.0017.50(ug/ml)吸光度 A0.3120.3910.4800.5590.640图2维生素B1标准曲线图由图2可得，采用此法进行维生素 B1含量的测定，在浓度为8.00-16.00ug/ml 范围内线性关系较好(R2=0.9997) 0表2维生素B1片回收率实验结果编加入对照液吸测得对回收率号量浓度光照液浓(% )(mg(ug/度度)ml)A(ug/ml)110.0010.00

7、0.3709.2692.6210.0010.000.3709.2692.6310.0010.000.3709.2692.6412.5012.500.45511.8494.7512.5012.500.45611.8795.0612.5012.500.45511.8494.7715.0015.000.53914.3895.9815.0015.000.53914.3895.9915.0015.000.54114.4496.3123XRSDRSD高95.9%95.9%96.3%96%0.241.6%中94.7%95.0%94.7%94.8%0.18%低92.6%92.6%92.6%92.6%0回收率平

8、均值（）=94.48%RSD=1.6%由表2可得，采用此法进行维生素B1含量的测定，加入量在10.00-15.00mg范围内，对照液浓度在10.00-15.00ug/ml范围内时，回收率较高。表3维生素B1片精密度考察实验结果编号加入片粉量（g）吸光度A浓度百分吸对照品比较法标准曲线%（ug/ml）光度法（%）（%）10.17240.43112.5781.4495.8888.3820.17300.42712.6180.4394.6987.1430.17230.42812.6180.6294.9187.3840.17160.42512.5180.7095.0087.3550.17230.43312.5681.8996.4089.03对照0.44712.50品当 m=0.1715g 维 B1 浓度 12.50ug/mlRSD1 （百分吸光度法）=0.8%RSD2 （对照品比较法）=0.8%RSD3 （标准曲线法）=0.9%表4维生素B1片含量测定结果测定方法含量为标示量的百分数范围含量为标示量的百分数均值百分吸光度