高效液相色谱法测定对乙酰氨基酚颗粒的含量

1、高效液相色谱法测定对乙酰氨基酚颗粒的含量1218?安徽医药 AnhuiMedicalandPharmaceuticalJournal2011Oct;15(10) 高效液相色谱法测定对乙酰氨基酚颗粒的含量邵超,沈黎(安徽省阜阳市食品药品检验所 ,安徽阜阳 236015)摘要 : 目的建立对乙酰氨基酚颗粒含量的高效液相测定方法 .方法色谱柱为WatersSuufireC 柱(4.6mm x 150mill,5m),流动相为磷酸盐缓冲液(pH4.5) 甲醇(80:20),流速为1.0ml?min，检测波长为254am柱温为30C.结果对乙酰氨基酚在 0.050.40g?L 浓度范围内呈良好线性关系

2、(r=1 .0) ,平均加样回收率为99.9%(n:5),RSD 为 0.59%.结论该方法准确 ,可靠,可用于对乙酰氨基酚颗粒的含量测定 . 关键词:高效液相色谱法 ;对乙酰氨基酚颗粒 ;含量测定 DeterminationofparacetamolgranulesbyHPLCSHA0Chao,SHENLi(InstituteforFoodandDrugControl,Fuyang,Anhui236015,China) Abstract;AinlToestablishanHPLCmethodforthedeterminationofparacetamolgranules. MethodsWa

3、tersSunfireCI8column(4.6millX150mm,5Ixm)wasusedwitIlphosphatebufferingsolution(pH4.5)一methanol(80:20)asthemobilephase.Theflowratewas1.0mL?min .TheUVdetectionwavelengthwas254nm.andthecoumntemperaturewas30C.ResultsThecalibrationcurveofparacetamolWaslinearintherangeof0.050.40gL(r:1.0).Theaveragerecover

4、y(n=5)was99.9%andRSDwas0.59%.ConclusionThemethodisaccurate,reliable,andcanbeusedforthedeterminationofparaceta molgranules.Keywords:HPLC;paracetamolgranules;determination 对乙酰氨基酚颗粒是目前临床中常用的一种解热镇痛 药，适用于感冒,发烧等症状.中国药典2010年版J,对 乙酰氨基酚颗粒的含量测定采用紫外分光光度法 ,该方法 繁琐影响因素较多 .本文建立了高效液相色谱法测定对乙 酰氨基酚颗粒含量的方法 ,并进行了方法学考察 ,

5、同时用高 效液相色谱法与中国药典规定的检验方法进行比较 ,结果 致.本方法操作简便 ,专属性高 ,重现性好,可以替代紫 外分光光度法 .1 仪器与试药Waterse2695高效液相色谱仪，Waters2998紫外检测器, Empower色谱数据处理系统（美国Waters公司）.对乙酰氨 基酚对照品 （批号:100018200408,中国药品生物制品检定 所），对乙酰氨基酚颗粒，规格为0.1g（某制药有限公司，批 号:101001;100806;100413）甲. 醇为色谱纯 ,磷酸二氢钠 ,磷 酸氢二钠等均为分析纯 .2 方法与结果2.1 色谱条件及系统适应性试验色谱柱为 watersSun-

6、fireC.柱（4.6mmx 150mill,5m）;流动相为磷酸盐缓冲液 （pH4.5）（取磷酸二氢钠二水合物15.o4g磷酸氢二钠0.062 7g,加水溶解并稀释至1000ml,调节pH值至4.5） 甲醇 （80:20）,流速为1.0ml?min，检测波长为254nm,柱温为 30C,进样量为10l.在此条件下，理论塔板数按对乙酰氨 基酚峰计算不低于 5000,与其他峰的分离度符合要求 .见图1.O.o01.OO2.003.004.005.00/min0.001.002.003.004.005.00/minAB 图 1 对照品及样品色谱图注:A.空白溶液色谱图；B.对照品溶液色谱图；C.样

7、品溶液色谱图;1对乙酰氨基酚 准上升国家标准 ,第 1 6册,2003: 1 73.4孙旌文.HPLC法测定醋酸地塞米松片含量的不确定度分析J.药物分析杂志，2010,30(9):1777 80.孙莉.HPLC法测定药物含量的不确定度分析J.安徽医药， 2010,14(7):77677.6 崔冬梅.HPLC测定诺氟沙星胶囊含量的不确定度评定J.安77 徽医药,2010,14(12):1398400.范文莉，刘会艳.HPLC法测定叶酸片含量的测量不确定度评定J.中国医药导报,2010,7(26):48 9.孙莉.HPLC法测定炔诺酮片含量及含量均匀度的不确定度分析J.中国药房,2009,20(4

8、):294-6. (收稿日期:20110225)安徽医药 AnhuiMedicalandPharmaceuticalJournal2011Oct；15(10)?1219?2.2溶液的制备2.2.1 对照品溶液精密称取对乙酰氨基酚对照品 25mg, 置50ml容量瓶中，用流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，精取5 m1,置25m1容量瓶中,用流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，作 为对照品溶液 .2.2.2供试品溶液取本品 10袋内容物,混合均匀 ,精密称 取适量(约相当于对乙酰氨基酚25mg),置50ml容量瓶中， 用流动相溶解并稀释至刻度，滤过，精密量取续滤液5ml,置 25ml 容量瓶中 ,用流动相稀

9、释至刻度 ,摇匀,取续滤液作为供 试品溶液 .2.2.3空白溶液按处方工艺要求配制不含主药的阴性样 品,同供试品溶液的制备方法制成空白溶液后进样.结果表明 ,空白溶液对测定无干扰 .2.3 方法学考察线性关系考察 :按上述色谱条件 ,取对照 品溶液 ,分别进样 5,10,15,20,25,30,401注, 入液相色谱 仪 ,记录色谱图 .测得的峰面积分别为 1577456,3243281, 4909373,6562990,8207217,9882370,13189794以, 浓度（C）为横坐标,峰面积（A）为纵坐标进行线性回归.得回归 方程为A=33167813.8C 74407,r=1.0结

10、果表明,对乙 酰氨基酚在0.050.40g?l浓度范围内，其浓度与峰面积 呈良好的线性关系进样精密度试验 :按上述色谱条件 ,取对照品溶液 ,重复 进样6次,每次 10,注入液相色谱仪 ,记录色谱图 ,其峰面 积分别为 3245227,3231728,3248963,3244262,3250063,3242289测得RSD值为0.21%.结果表明,本方法精 密度良好.稳定性试验 :按上述色谱条件 ,取对照品溶液 ,分别在 0,3,6,9,12,24h每次101,注入液相色谱仪，记录色谱图，其 峰面积分别为 3244262,3229452,3217395,3222396,3218215, 318

11、4652,测得 RSD 值为 0.62%.结果表明 ,对乙酰氨基酚在 24h内稳定.精密度一重现性试验 :精密称取同一样品 （批号为 101001）5份,按上述色谱条件测定 .按供试品溶液的制备的 方法操作 ,测得其峰面积分别为 3038957,3044185,3006 901,3038600,3005220,3036015,RSD为 0.58%.结果表 明 ,本方法重现性良好 .加样回收率试验 :精密称取已知含量的样品 （批号为101001）细粉适量（约相当于对乙酰氨基酚25mg）5份,置50 ml 容量瓶中 ,用流动相溶解并稀释至刻度 ,滤过,精密量取续 滤液5m1,置50ml容量瓶中，再

12、分别精密加入浓度为0.5g? L的对照品溶液5ml,加流动相稀释至刻度，摇匀.按上述 色谱条件，每次101,注入液相色谱仪，记录色谱图，测定加 样回收率结果见表1.表 1 对乙酰氨基酚加样回收率试验 2.4样品含量测定的对比试验分别取 3 批样品(批号: 101001,100806,100413)按, 上述溶液的制备方法操作 ,取对 照品溶液与样品溶液各101,注入液相色谱仪，记录色谱 图,按外标法以峰面积计算含量，并与中国药典规定的 紫外分光光度法 (UV 法)测定的结果比较 .结果见表 2.表 2 样品测定结果比较3 讨论本文建立了 HPLC 法测定对乙酰氨基酚颗粒含量的方 法,重现性好

13、,准确度高 .该高效液相色谱条件是参考相关文 献对乙酰氨基酚泡腾片而确定的 .曾对流动相用 0.05 moL-L 醋酸铵溶液一甲醇 (85:15)检测波长 257nm 进行多 次比较，本文流动相在254nm波长处溶剂峰千扰小，主峰吸 收强,此流动相比例能使主峰在较短时间内出峰 ,且分离度 好,最后确定使用本文流动相 .本文使用的检测器为二极管阵列检测器 ,采用高效液相 色谱法,操作简单易行 ,线性关系良好 ,提高了含量测定结果 的准确度 ,与中国药典紫外分光光度法测定的结果无明显差 异,可用于对乙酰氨基酚颗粒的含量测定 .参考文献 :1国家药典委员会中国药典:二部S北京:中国医药科技出版 社,2010:237.2国家药典委员会中国药典:二部S.北京:中国医药科技出版 社,2010:236.3田磊.HPLC法同时测定复方银翘氢敏胶囊中维生素C及对乙酰氨基酚的含量J.安徽医药，2010,14(9):1026-7.4甄录旭，吴海林,方宗华，等.HPLC法测定对乙酰氨基酚维生素C分散片中的对乙酰氨基酚和维生素C含量J.安徽医药,2007,11(9):7924.夏方亮,王青青.HPLC法测定复方感冒灵胶囊中对乙酰氨基酚 和绿原酸的含量J中国药事,2009,23(10):1009-10.胡海廷敬永升，王莹.HPLC法测定治感佳胶囊中对乙酰氨 基酚的含量Jj河南大学,2009,