实验七-水体铵态氮、亚硝态氮和硝态氮的测定精编版

1、一、氨态氮的测定一、氨态氮的测定纳氏试剂法纳氏试剂法Nesslers reagent SpectrophotometricNesslers reagent Spectrophotometric实验目的实验目的实验原理实验原理实验仪器和试剂实验仪器和试剂主要操作步骤主要操作步骤结果与计算结果与计算结果分析结果分析（一）实验目的复习分光光度计的使用复习分光光度计的使用学习其中一种比色法测定水中氨氮含量的学习其中一种比色法测定水中氨氮含量的原理和操作方法原理和操作方法（二）实验原理纳氏试剂是碘化汞钾（纳氏试剂是碘化汞钾（K K2 2HgIHgI4 4）的强碱性溶液，它能与氨）的强碱性溶液，它能与氨氮

2、反应生成棕色的难溶络合物，浓度很小时，在水中以胶氮反应生成棕色的难溶络合物，浓度很小时，在水中以胶态形式存在，呈现为橙黄色。反应如下式所示：态形式存在，呈现为橙黄色。反应如下式所示：（三）主要操作步骤样品预处理（凝聚法）样品预处理（凝聚法）2.0 mL硫酸锌溶液硫酸锌溶液 200 mL水样水样23滴滴NaOH溶液溶液 中性滤纸过滤中性滤纸过滤于于250 mL锥形瓶锥形瓶弃去最初弃去最初滤出的滤出的25 25 mLmL滤液滤液混匀混匀 标准曲线及样品的制作与测定标准曲线及样品的制作与测定 取6支50 mL具塞比色管，分别按下表的量加入氨氮标准使用液（Vs ），加无氨纯水至标线，混匀3TNH -N

3、 管号123456 /（mg/L）00.400.801.202.00水样VS /mL02.004.006.0010.00V水样加入加入1.0mL酒石酸钾钠溶液酒石酸钾钠溶液加入加入1.0 mL纳氏试剂纳氏试剂 混匀混匀 显色显色10 min 溶液呈黄色溶液呈黄色420 nm处比色处比色实验注意事项本方法只能用于较清洁的水样，污水需采用蒸馏发将氨分离收集后再加纳氏试剂比色鱼池水常有色且浑浊，多数是由于水中生物或泥沙所造成，经Zn(OH)2 吸附处理后，一般可用此法测定 （五）结果计算与分析二、亚硝酸态氮的测定Spectrophotometric method with sulphanilamid

4、e and coupling with N-(1-naphthyl)-ethylenediamine （一）实验目的 掌握水样预处理方法、亚硝酸氮的测定方法以及同一养殖水体中亚硝酸氮与氨氮和硝酸氮之间含量大小的关系。（二）实验原理在酸性介质中亚硝酸盐与磺胺进行重氮化反应，其产物再与盐酸萘乙二胺偶合生成红色红色偶氮染料，该染料在波长543 nm附近有最大吸收。（三）仪器与试材仪器分光光度计及配套比色皿50mL具塞比色管容量瓶移液管试剂试剂 磺胺溶液磺胺溶液 盐酸萘乙二胺溶液盐酸萘乙二胺溶液 亚硝酸盐氮贮备溶液亚硝酸盐氮贮备溶液 亚硝酸盐氮使用溶液亚硝酸盐氮使用溶液 氢氧化铝悬浮液氢氧化铝悬浮液2

5、 mL2 mL氢氧化铝悬浮液氢氧化铝悬浮液（四）主要操作步骤样品预处理（凝聚法）200 mL200 mL水样水样中性滤纸过滤中性滤纸过滤于于250 mL250 mL锥形瓶锥形瓶弃去最初滤出弃去最初滤出的的25 mL滤液滤液制作标准曲线及样品测定 取6支50 mL具塞比色管，分别按下表的量加入亚硝酸态氮标准使用液（Vs ），加无氨纯水至标线，混匀 管号管号123456 /（mg/L）00.0100.0200.0400.080水样水样VS /mL00.501.002.004.00V水样水样-2NO -N混匀混匀 分别加入分别加入1.0 mL1.0 mL磺胺溶液磺胺溶液分别加入分别加入1.0 mL1

6、.0 mL盐酸萘乙二胺溶液盐酸萘乙二胺溶液混匀混匀 显色显色15 min 15 min 543 nm543 nm处比色处比色溶液呈红色溶液呈红色（五）结果分析与计算三、硝酸氮的测定- -酚二磺酸比色法Determination of nitrate nitrogen -Spectrophotometric Determination of nitrate nitrogen -Spectrophotometric method with phenol disulfonic acidmethod with phenol disulfonic acid（一）实验目的了解养殖水体硝酸盐的垂直分布特点掌

7、握硝酸盐测定的方法酚二磺酸法（二）实验原理硝酸盐在无水情况下与酚二磺酸反应，生成黄色的硝基二磺酸酚，溶解后溶液在410nm处吸光度与硝酸氮的含量呈线性关系。（三）仪器与试材仪器瓷蒸发皿水浴锅玻璃漏斗50 mL具塞比色管分光光度计比色皿等试剂试剂 酚二磺酸酚二磺酸 氢氧化钠溶液氢氧化钠溶液 硝酸盐氮贮备标准溶液硝酸盐氮贮备标准溶液 硫酸银溶液硫酸银溶液 EDTA二钠溶液二钠溶液 氢氧化铝混悬液等氢氧化铝混悬液等2 mL2 mL氢氧化铝悬浮液氢氧化铝悬浮液（四）主要操作步骤样品预处理（凝聚法）200 mL200 mL水样水样中性滤纸过滤中性滤纸过滤于于250 mL250 mL锥形瓶锥形瓶弃去最初滤

8、出弃去最初滤出的的25 mL滤液滤液制作标准曲线制作（由老师负责完成） 在 6个清洁、干燥的蒸发皿内分别移入硝酸盐氮标准使用液0、0.50、1.00、2.00、3.00 、5.00 mL，以氢氧化钠溶液调节pH至微碱性（pH8），置水浴上蒸发至干。玻棒研磨玻棒研磨 冷却后加入冷却后加入酚二磺酸试剂酚二磺酸试剂1.0 mL1.0 mL再研磨一次再研磨一次放置放置10 min10 min转移至比色管转移至比色管410 nm410 nm处比色处比色溶液呈黄色溶液呈黄色管号123456/(mg/L)00.200.400.600.801.00VS /mL01.002.003.004.005.00放置片刻放置片刻加加10ml10ml纯水纯水加加34mL34mL氢氧化钠氢氧化钠定容至标线定容至标线样品测定 将过滤后的水样50.0 mL置于干燥的蒸发皿内，以氢氧化钠溶液调节pH至微碱性（pH8），置水浴上蒸发至干。玻棒研磨玻棒研磨 冷却后加入冷却后加入酚二磺酸试剂酚二磺酸试剂1.0 mL1.0 mL再研磨一次再研磨一次放置放置10 min10