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文档简介
1、哈尔滨工业大学(威海)低醇啤酒酿造工艺 姓 名: 张学森 学 号: 130750224 班 级: 1307701 院 系: 海洋科学与技术 专 业: 食品科学与工程 日 期: 2015年11月23日 低醇啤酒酿造工艺张学森(哈尔滨工业大学(威海) 海洋科学与技术学院 山东 威海 264200)【摘要】低醇啤酒具有啤酒应有的啤酒风味,不但营养丰富,富含多种矿物质、维生素以及糖类和氨基酸,并且有多饮不醉的优点,这也正符合当今消费者对身体健康、自然、个性的消费趋势,加上女性对低醇啤酒的喜爱,低醇啤酒得到了市场广泛的欢迎和喜爱。目前国际上无醇啤酒的酿造方法可分为两大类:限制发酵法和正常发酵后脱酒精法。
2、而限制发酵法的关键之一就是低醇啤酒酵母的选育。本文旨在简单地介绍低醇啤酒的发酵机制以及低醇啤酒的酿造工艺。【关键词】低醇啤酒;酿造工艺;菌种选育;营养价值Low alcohol beer brewing processZhang Xuesen(Harbin Institute of Technology (Weihai) Institute of marine science and technology, Weihai, Shandong 264200)Abstract:Low alcohol beer has beer the desired flavor of beer, not onl
3、y nutritious, rich variety of minerals, vitamins and carbohydrates and amino acids and drink not drunk the advantages. This is in line with todays consumers of health, natural, personality consumption trends, women love of low alcohol beer, low alcohol beer get the market widely welcomed and loved.
4、At present, there are two main types of brewing method for beer brewing, which can be divided into categories: restricted fermentation and normal fermentation. One of the key and the breeding of limited fermentation is low alcohol beer yeast. The purpose of this paper is to introduce the fermentatio
5、n mechanism of low alcohol beer and brewing technology of low alcohol beer.Key words :Low alcohol beer; Brewing technology; Screening; Nutritional value引言 啤酒是一种历史悠久的国际通用性饮料,因为啤酒营养价值高,口感较好,现在已经成为世界上饮用最广泛饮料之一。啤酒的主要原料有大麦、啤酒花以及啤酒酵母和各式各样的辅料,它们不但使啤酒具有独特的香气和苦味,让人感到心情愉悦,还让啤酒具有可观的营养价值和药理价值。啤酒中碳水化合物和蛋白质的比例约为1
6、5: 1, 最符合人类的营养平衡。啤酒中的无机盐、维生素、抗衰老物质以及生物活性物质,如多酚和黄酮类化合物都十分丰富。并且啤酒具有活化胃、促进胃液和消化酶分泌、抑制胃溃疡、利尿、解除疲劳、防止脚气病、防止动脉硬化和心脏病等功效。1972 年世界第九次营养食品会议曾推荐啤酒被为营养食品之一,啤酒也被人们亲切地称为“液体面包”。世界卫生组织倡导人们减少对酒精类饮品的消费,人们也更加注意酗酒带来的危害。现代社会普遍推崇健康、自由、个性化的生活方式, 再由于驾驶条例、法律法规、宗教、社会舆论等方面的原因, 让低醇、清爽的低醇啤酒成为更加主流的啤酒类型。低醇啤酒不但在外观上、感官上与普通啤酒十分相似 ,
7、 而且在口感上也与普通啤酒无妨。啤酒发酵是复杂的生化反应过程, 它把糖化麦汁中的糖类分解产生乙醇等多种物质并放出生化反应热, 同时产生多种有机物质。发酵过程的工艺流程和参数将对啤酒的口感与风味产生直接影响, 通过自动控制技术控制啤酒生产, 可以让发酵过程的温度、压力严格按照工艺曲线进行, 对保证啤酒的质量, 减少酒损, 减少操作工人,降低生产成本有重要的意义。下面,本文将对酿造低醇啤酒中的啤酒酵母发酵机理、低醇啤酒酵母菌种选育的研究、酿造啤酒原料选择以及低醇啤酒发酵过程中的工艺控制要点进行简单的介绍。一、啤酒发酵的机理(一)糖类发酵 EMP C2H5OH+CO2+能量+4ATP无O2糖发酵糖丙
8、酮酸 CO2+H2O+能量+38ATP有O2TCA循环巴士德效应:糖经EMP代谢至丙酮酸,在有氧条件下酵母经TCA循环可获得更多的生物能,此时,无氧发酵被抑制,这种氧抑制嫌氧发酵代谢过程。糖代谢反应式:100g麦芽糖理论上可产酒精53.8g,实际只有9596%糖转化为酒精,其余形成高级醇、有机酸、脂类等以及酵母新细胞。C12H22O11+H2O+4ADP+4Pi-4C2H5OH+4CO2+4ATP+Q (二)含氮物的变化下降 麦汁接种后,酵母必需吸收麦汁中的含氮物,用于合成酵母蛋白、核酸和其它含氮化合物,形成新酵母细胞。啤酒中残存含N物影响酒的风味。(三)啤酒中的风味物质含量少,影响大1、连二
9、酮类VDK 连二酮和啤酒风味:2.3-戊二酮和丁二酮双乙酰总称,在酒中口味相似,但量比为1:36,且口味阀值:双0.10.2mg/L;戊1.0mg/L,故生产中以双乙酰作为啤酒是否成熟的限制性指标.GB4927-2001规定:优质啤酒双乙酰0.10mg/L 双乙酰是具挥发性、强烈刺激性的化合物,啤酒中含量0.5mg/l以上时,具有明显的馊饭味。目前国内外优质啤酒一般将双乙酰控制在0.05mg/L以下。 2、高级醇 高级醇主要指异丁醇、异戊醇及活性异戊醇,它是各种酒的香味和风味物质之一,适量可促进酒类香味,口味丰满,并促进协调性;过量产生异杂味,容易上头。3、挥发酯 来源:酯化反应;酵母生物合成
10、。4、醛类已检出的达20余种,乙醛由丙酮酸脱羧形成,但啤酒中含量一般很低。5、有机酸 使口味活泼,爽口;缺乏,口味呆滞,粘稠,不爽口;过量:口感粗糙,不柔和,不协调,也意谓着污染。了产酸细菌。6、含硫化合物 SO2、H2S、CH3SCH3、CH3S-S-CH3、CH3SH、乙硫醇CH3CH3SH等,含量10-610-9,但有不良气味。二、低醇啤酒酵母菌种选育优良低醇啤酒酵母菌的基本要求1、能有效地从麦汁中摄取所需要的各种营养物质,发酵速度快2、能代谢产生CO2、乙醇较低及能赋予啤酒良好风味的物质3、发酵完毕后,分离容易,使发酵液澄清快(一)准备工作1.确定出发菌种:1.1取样:从酒厂取得啤酒酵
11、母,使用产酒率较低的菌种1.2培养基1.2.1低醇啤酒酵母培养基(g/L) 蛋白胨6g 果糖0.5g 酵母浸粉4.0g 蔗糖2.6g 酪蛋白1.2g 麦芽糖62.0g 硫酸锌1.2g麦芽三糖16.2g 葡萄糖3.6g 琼脂 20g PH 5.86.21.2.2低双乙酰峰值筛选培养基(WLN平板)(g/L) 葡萄糖50 酵母膏4 蛋白胨5 氯化钙0.125 0.0025 KCl 0.425 溴甲酚绿 0.02 琼脂 20 磷酸二氢钾 0.55 水合硫酸镁0.125 FeCl3.6H2O 0.55 PH5.51.3诱变处理取分离后的样品,用脱脂棉过滤得浓度为106-108个/毫升的单孢子悬浮液。紫
12、外线诱变:将单孢子悬浮液在暗室中装在9cm培养皿中,置于15W紫外灯下,照射距离30cm,用磁力搅拌保持悬液均匀,选择不同的照射时间,吸取样品适当稀释后涂布分离平板,35恒温避光培养,挑取单菌落,分离培养后将产酸最高的菌种选出并制成孢子悬浮液。亚硝基胍(NTG)诱变:吸取1% NTG丙酮溶液1mL与9mL磷酸缓冲液混合配制成NTG处理液。取1mL处理液与10mL孢子悬浮液2混合,30保温30-60min,每5min取样一次,经缓冲液多次离心洗涤后,适当稀释涂布分离平板,35培养,挑取单菌落;同上,在分离培养后选出产酸最高的菌株,并制备孢子悬浮液。硫酸二乙酯(DES)诱变:吸取50% DES乙醇
13、溶液0.2mL,置于100mL三角瓶中,另吸取10mL单孢子悬液3与DES溶液混合,振荡处理50min、60min、70min,立即加入25%的硫代硫酸钠溶液中止反应,适当稀释后涂布分离平板,35培养,挑取单菌落,重复上诉操作,得到孢子悬浮液。60Co诱变:取5mL单孢子悬液4于灭菌试管中,用不同剂量60Co射线照射,适当稀释后涂布平板,35培养,挑取单菌落分离培养,将产酸最高的菌种再涂布到麦芽汁,琼脂平板上。(二)实验方法菌种选育路线(见图2-1)2.1低双乙酰峰值菌株的分离2.2初筛菌种在低醇麦汁中的低温发酵实验选择双乙酰浓度和发酵度低的菌种进行下一轮筛选。2.3复筛菌株在低醇啤酒麦汁中的
14、低温发酵试验2.3.1菌种扩大培养程序2.3.2 E、B、C管发酵 控制发酵温度为9。对发酵液中细胞密度、酒精含量、外观浓度、双乙酰含量为指标。待主发酵结束,进行双乙酰还原,待双乙酰降至0.1mg/mg一下,即成品啤酒,进行品尝。2.4 优质低醇啤酒酵母标准(1)形态学的要求:选择长宽比1:1.11.3,细胞大小:6.88.0 8.09.0m 生理要求:繁殖速度:快, 15:繁殖迟缓期2.0h,平均世代时间8.0h。15和10:平均世代时间差值小。增殖倍数和细胞浓度:接种后细胞浓度1106;经23级培养浓度达到6070 106 。发酵力的要求:酵母麦汁极限发酵度:2527,803%起酵速度快,
15、起酵时间短 (从接种到起白沫时间称起酵时间。)发酵速度:高泡期降糖速度(2.5oP/d)2-3d啤酒主酵发酵度:淡爽型12oP,6568% 麦汁极限发酵度F极和啤酒发酵度F啤1.0%凝聚力和沉淀能力强 双乙酰峰值低和还原速度快 挥发性物质丰富酵母对压力耐受能力强酵母的稳定性好三、酿造啤酒原料选择 在原料选择时,既要考虑在酿造过程中如何降低酒精含量,同时又要满足酵母菌正常生长的营养物质。因此选择物质的原则时麦芽-淀粉酶活性相对低,-淀粉酶活性又相对高,麦芽的蛋白质适中的。辅料中采用一部分低聚糖。大米使用支链淀粉比较多的粳米。3.1大麦 大麦,别名牟麦、饭麦、赤膊麦,与小麦的营养成分近似,但纤维素
16、含量略高。1拉丁文名:Hordeum vulgare L.禾本科、大麦属一年生禾本、秆粗壮,光滑无毛,直立,叶鞘松弛抱茎,多无毛或基部具柔毛;两侧有两披针形叶耳;叶舌膜质,具坚果香味,碳水化合物含量较高,蛋白质、钙、磷含量中等,含少量B族维生素。 大麦的化学成分主要包括淀粉、半纤维素和麦胶物质、蛋白质和多酚类物质。 3.1.1啤酒酿造对大麦的要求:(1)色泽:良好大麦有色泽,淡黄色,不成熟大麦则微绿色;受潮大麦发暗;霉变大麦则发灰。(2)气味:良好大麦具有新鲜稻草香味,受潮大麦则有霉臭味。(3)谷皮:良好大麦皮薄,有细密纹道;厚皮大麦则纹道粗糙。(4)麦粒形态:良好大麦以瘦长型为佳(5)夹杂物
17、:谷杂粒砂土等含量在2%以下。3.1.2大麦的贮藏 新收获大麦水分高,具有休眠期,发芽率低。需要经过一段后熟期后才可以使用,一般为68周,才可以达到应有的发芽率。 大麦的贮藏方法包括袋装贮藏、散装贮藏、立仓贮藏。在贮藏前需要做到(1)水分控制到12%以下。(2)必须要预先除尘除杂,精选分级(3)入仓前尽可能降温。(4)仓库需要配备通风、喷药、测温等装置。在贮藏期间,需要及时记录麦温,按时通风、倒仓。严格防潮、防虫、防鼠。3.2啤酒酿造用水 啤酒的酿造需要大量的清洁水,水大约占啤酒的90左右。纯净的水是无法酿造啤酒的,啤酒酿造用水必须是天然水。水的来源一般有以下几种途径降雨、降雪;地表水(江、河
18、、湖、水库水和浅井水);地下水(深井水、泉水);冰水;海水等。啤酒厂选择水源的原则应既要考虑水量充沛和稳定,又要基本符合我国生活饮用水标准(GB574985)。综合各种水源的水质特性,啤酒厂的水源应优先考虑采用地下水。因为地下水具有水质清洁、有机物含量低、悬浮物、胶体物质少;水温恒定,很少会受到季节的影响;水中生物、微生物较少、致病菌也较少;溶解盐类高,硬度高等特点。但要注意的是,地下水一般选择浅层地下水,其次是深层地下水。因为,某些地下水经含矿盐层时,会受到金属矿岩的污染,同时水的硬度高,因此生产应用时,应根据具体要求做相应处理。选择其它水源的次序是:(1)城市自来水;(2)湖泊水、水库水;
19、(3)河水。3.2.1酿造用水中影响啤酒质量的主要因素(1) 水的硬度。水的硬度是指水中碳酸钙的含量的对少。我国规定1升水中含有10mg氧化钙为1d(德国度)。淡色啤酒要求使用8d以下的软水,深色啤酒可用12d以上的硬水。硬度的法定计量单位是以mmol/L表示的,1mmol/L = 2.804d。水的硬度分为暂时硬度(也称为碳酸盐硬度,指水中钙、镁的碳酸氢盐浓度)、永久硬度(也称为非碳酸盐硬度,指水中钙、镁的硫酸盐、碳酸盐、硝酸盐等浓度)和负硬度(含钾、钠的碳酸氢盐浓度),也可以钙硬和镁硬来分类。(2)水的PH值。一般以6.8-7.2中性为好,PH值过高或者过低容易造成酿造过程糖化阶段困难,酿
20、造的啤酒口味欠佳。(3)水中的含盐度。水中含盐度过高,会导致啤酒口味的粗涩。 水中所含有的无机盐离子对啤酒整个酿造过程中如酶促反应,酵母菌的生长和酵母菌的酒精发酵,以至于啤酒的风味品质起十分重要的作用。因此对啤酒用水的选择也就十分重要。酿造浅色啤酒最佳总溶解盐类应在150mg/L左右。3.2.2对酿造用水的改良措施 通过调节钙离子来调节发酵液的PH、加酸改良、离子交换法处理水等方法,以及加入麦汁和糖化调浆水等措施使麦汁PH保持在5.5左右。3.2.3水的活性炭处理对于低度啤酒,啤酒的涩味更加容易露头,而啤酒涩味的原因之一就是酿造用水,尤其是采用高浓酿造的话,因此水中的涩味将直接影响到啤酒的口味
21、。因此应该对水进行过滤。通过应用机械过滤和活性炭过滤的方法除去水中杂质和涩味。通过感官性测试,表3-2-3结果显示,使用椰壳炭的处理效果最好。3.3麦芽品种的选择和焙焦工艺的选择3.3.1麦芽的选择 麦芽中的-淀粉酶是糖化过程的主要酶源,选用-淀粉酶比较低的麦芽。同时。-淀粉酶的活性还与制麦过程的焙焦温度有关。一般来说,蛋白质含量高的麦芽酶体系一般比较丰富,各种酶的活性也比较高。对于低度啤酒来说,蛋白质分解过度虽然对非生物稳定性有好处,但不利于啤酒泡沫。分解不足,又导致蛋白质沉淀,影响保质期和产品形象。3.3.2 麦芽焙焦温度和时间的影响 随着麦芽焙焦温度上升,麦芽糖化力降,-淀粉酶活性变化不
22、大,-淀粉酶下降明显。3.4辅料的选择和使用 考虑到低醇啤酒酒精含量较低,发酵度较低的情况,根据啤酒的性质,使用麦芽低聚糖。麦芽低聚糖是一种混合糖,主要由麦芽糖、麦芽三糖至麦芽八糖组成,不含糊精,是由特异的麦芽低聚糖酶作用于淀粉而得致电的一种新型营养甜味剂。具有抑制人们肠道有害菌生长繁殖作用并且有特殊的生理功能。 使用低聚糖,如果其发酵度达不到标准,将对整个生产带来十分严重的影响,导致酒精度达不到低醇啤酒的要求。另一方面,低聚糖生产是如果淀粉自身分解不够,碘值过高,也会使酒品出现非生物稳定性的问题。因此对发酵度和碘值这两个指标一定要慎重。3.3大米的选择 随着我国啤酒品质的不断提高,对大米辅料
23、的品质要求也越来越高。大米应选用支链淀粉比较多的品种。因为支链淀粉在淀粉酶的作用下,出了生成麦芽糖和葡萄糖以外,还生成大量糊精和异麦芽糖。因此使用粳米或糯米酿制的啤酒口感比较柔和饱满。另外,大米粉的使用要现用现磨,且储存时间不能超过三天。3.5酒花的选择 在麦汁煮沸时添加酒花的作用使啤酒香味和苦味,提高啤酒非生物稳定性,有利于啤酒泡沫,具有杀菌和防腐的作用。低醇啤酒的缓冲体系相对较弱,各种香味杂味极易露头,因此最好选用多种酒花混合使用的方法使酿造的啤酒具有细柔苦味和纯正协调的酒花香。四、低醇啤酒发酵过程的工艺控制要点4.1啤酒工艺基本流程4.2啤酒发酵工艺控制的基本原则4.2.1酵母菌株的选择
24、 啤酒酵母菌特性深深影响糖类的发酵、氨基酸的同化、酒精和副产物的形成、啤酒的风味、啤酒的稳定性等方面,所以,在选择酵母时,应考虑酵母发酵速度、发酵度、凝聚性、回收性、稳定性等方面。 4.2.2麦汁组成 啤酒是发酵后直接饮用的饮料酒,因此,麦汁的颜色,芳香味、麦汁组成有一些会直接影响啤酒的风味,有一些影响发酵、最终也影响啤酒的风味。麦汁组成中影响发酵的主要因子是: 原麦汁浓度、溶氧水平、pH值、麦汁可发酵性糖含量、-氨基氮、麦汁中不饱和脂肪酸含量等。 原麦汁浓度: 1015%正常,9% ,15% 。溶氧水平:溶氧高增殖快,在正常溶氧水平39mg/L下,酵母浓度差50%;溶氧缺乏时,繁殖前期受到麦
25、汁中不饱和脂肪酸含量的调节,从0.5mg/L10mg/L,明显促进酵母增殖。4.2.3接种量 啤酒在生产过程中常用上一批回收酵母泥接种,接种量是以每百升中的千克数表示,一般为0.41.0kg(100L),酵母泥中细胞浓度为(1520)108个/g。提高接种量,分批发酵的营养成分不变,发酵时酵母最高细胞浓度相应增加,新生细胞浓度反尔减少,VDK峰值降低,高级醇生成减少。但接种量过高,新生细胞过少,导致后酵不彻底。4.2.4发酵工艺条件控制发酵温度是指主发酵阶段的最高发酵温度。传统原因,啤酒发酵温度远低于啤酒酵母的最适温度。上面啤酒发酵采用822C,下面啤酒发酵采用715C。采用低温发酵可以防止或
26、减少细菌的污染,代谢副产物减少,有利于啤酒的风味。 罐压、CO2浓度对发酵也有影响。为了回收CO2 ,主酵采用带压发酵,发现绝大多数啤酒酵母菌株,增殖浓度减少,发酵迟缓,代谢产物减少。主要是CO2浓度的影响。发酵初, CO2浓度对发酵速度略有影响,但明显会抑制风味物质乙酸乙脂和异戊醇的生成,这是加压发酵的基础。4.3低醇啤酒工艺控制发酵控制法:特殊酵母控制发酵 路德类酵母(Saccharomycodes ludgwigii) , 此酵母能发酵果糖、蔗糖、葡萄糖, 但是不能发酵麦芽糖和麦芽三糖。因此, 一般麦汁用此酵母发酵只能产生少量的酒精, 尤其麦汁中的总糖有15%为蔗糖、果糖、葡萄糖时最终的
27、发酵酒精度仅为0.4%(V/V)。但是用此方法酿造出来的啤酒由于醪液中含有大量的未发酵麦芽糖而具有很浓的甜味。而且, 发酵过程中由于低酒精高糖的醪液环境, 使发酵醪的微生物控制要求非常严格, 必须保证在发酵过程中醪液仅此一种酵母的存在, 否则都将导致发酵的失败。4.3.1糖化工艺的控制 酿造低醇啤酒时,麦汁碘值硬控制在0.45以内,发酵度应该在50%左右;蛋白质的休眠温度在4546;糖化的温度应该在7073。在此温度下,低醇啤酒的可发酵性糖处于比较合适的浓度。糖化终了温度应控制到7576。4.3.2大米的糊化 不同的大米,糊化温度不同。一般保证在65-77。4.3.3糖化液料比 麦芽缪料液比比
28、较高,一般在1:3-3.5左右;辅料液料比比较低,一般在1:50左右。4.3.4过滤工艺的条件 啤酒过滤的目的是为了得到稳定透明澄清的液体。经过贮酒后的发酵液,大颗粒蛋白和酵母等固形物已经沉淀分离,酒品也逐渐清亮,二氧化碳饱和、口感也逐渐成熟,但仍然有一部分固形物在啤酒里,因此要通过机械方法进行过滤。4.3.5成品低醇啤酒理化性质一览表,见表4-25其后修饰法生产低醇啤酒的方法5.1常压蒸馏 采用常压下将澄清啤酒缓慢加入预先装了沸水的酿造锅中恒温煮沸, 至啤酒体积减少30%, 啤酒所损失的体积由原锅中沸水取代, 一般这种方法使啤酒中的酒精浆至0.5 %(V/V)。在早期的去酒精方法中, 经常使
29、用此方法。但是, 由于这种方法使啤酒长时间加热, 啤酒中的各种风味物质发生了很大的变化, 导致口味不容易被广大消费者接受。Brenner 曾经叙述了一种蒸馏方法,主要内容是将常压蒸馏后的去酒精啤酒与一种或几种传统啤酒进行调和, 以减少风上的不适。5.2真空蒸馏 所谓真空蒸馏是相对常压蒸馏而言, 这种方法优点是蒸馏温度低, 对啤酒的风味影响相对较少, 真空蒸馏改良法是将啤酒去酯后再返添加(de/ re - esterrification of thebeer) 。啤酒中风味化合物在去酯蒸馏锅(de -esterificationstill)中分离, 分离后的风味化合物在啤酒真空蒸馏后再混合。具体
30、方法是先将啤酒在50左右密闭预热, 再泵入高真空度的去酯设备, 使风味化合物瞬间蒸发。这一过程是可以控制的, 因此啤酒中各种风味物质的分离也可以控制。分离后的啤酒进入脱酒精管柱, 仍在真空下进行操作, 使酒精从啤酒中脱除, 管柱底部流出的无醇啤酒经冷却后与去酯设备分离出的风味物质混合。最终产品的酒精含量受去酯设备中风味物质的分离程度影响, 根据需要一般可以控制在0 1 %(V/V)之间。这种脱醇方法虽然有热处理, 但是对风味的影响已经非常小。5.3蒸发 以升降膜蒸发技术采用低压短时间蒸发法去除啤酒中的酒精, 一般所用的标准压力在30mmHg 温度在30以下。主要工艺控制点为啤酒薄膜与蒸汽间尽可
31、能保持小的温差,避免对啤酒造成热伤害。一般啤酒在通过蒸发器之前并未先分离风味物质, 因此处理啤酒的温度应尽量保持温和。操作方式可以分批也可连续操作。分批操作通常采用单效蒸发器, 但啤酒可以多次处理, 最终酒精含量可以降到0.05 %(V/ V)以下。采用这种方法除去了啤酒中的酒精以外, 同时也去除了大量的二氧化碳和水, 因为去除过程实际上是个浓缩过程。去除酒精后的啤酒需要稀释(Hochberg), 即对酒体进行后修饰才能得到完整的产品。这种方法最大的优点是可以很好地控制啤酒中酒精的含量。在20 世纪80 年代末, 英国已经采用此方法生产出了酒精含量低达0.01%(V/V)的啤酒, 澳大利亚也通过此方法并采用后修饰工艺生产出了酒精含量0.9 %(V/V)的啤酒。在我国目前已经有些啤酒企业尝试用此方
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