第07章杂环类药物的

1、第七章第七章 杂环类药物的分析杂环类药物的分析 杂环化合物：指环状有机化合杂环化合物：指环状有机化合 物的碳环中夹杂有非碳元素原子物的碳环中夹杂有非碳元素原子 （如（如O、S、N等）的化合物等）的化合物 第一节第一节 吡啶类药物的分析吡啶类药物的分析 N C ONHNH2 N 异烟肼（异烟肼（isoniazid） 吡啶（吡啶（pyridine） N C O N(C2H5)2 尼可刹米（尼可刹米（nikethamide） N CONHN CH OH OCH3 异烟腙（异烟腙（ftivazide） N C SNH2 CH2CH2CH3 丙硫异烟胺（丙硫异烟胺（protionamide） 一、结构与

2、性质一、结构与性质 1. 吡啶环 弱碱性弱碱性 pKb8.8， 非水碱量法非水碱量法 含量测定或沉淀反应鉴别含量测定或沉淀反应鉴别 吡啶环可发生开环反应吡啶环可发生开环反应，可用于，可用于 吡啶类药物的鉴别吡啶类药物的鉴别 2. 取代基： （1）异烟肼 位上酰肼基 弱酸性弱酸性 非水酸量法非水酸量法 还原性还原性 鉴别或氧化还原滴定法含鉴别或氧化还原滴定法含 量测定量测定 可可与某些羰基试剂发生缩合反应与某些羰基试剂发生缩合反应 鉴别或比色法含量测定鉴别或比色法含量测定 酰胺键易水解酰胺键易水解引入特殊杂质引入特殊杂质游离肼游离肼 （2）尼可刹米 位上酰胺基 易水解，易水解，遇碱水解后，释放出

3、具有遇碱水解后，释放出具有 碱性的二乙胺，能使湿润的红色石蕊碱性的二乙胺，能使湿润的红色石蕊 试纸变蓝色，故可以此进行鉴别。试纸变蓝色，故可以此进行鉴别。 （3）丙硫异烟胺 位上硫代甲酰胺基 易水解，易水解，加酸水解后，释放出硫化加酸水解后，释放出硫化 氢，能使湿润的醋酸铅试纸显黑色，氢，能使湿润的醋酸铅试纸显黑色， 故可以此进行鉴别。故可以此进行鉴别。 3. UV和IR 二、鉴别试验二、鉴别试验 （一）吡啶环的反应 1. 沉淀反应 （1）与氯化汞的反应）与氯化汞的反应 白色 异烟肼 尼可刹米 2 HgCl （2）与铜盐的反应）与铜盐的反应 尼可刹米尼可刹米 ChP（2000） 草绿色尼可刹米

4、SCNNHCuSO 44 【鉴别】【鉴别】（3）取本品）取本品 2 滴，加水滴，加水 1 ml ，摇匀，加硫酸铜试液，摇匀，加硫酸铜试液 2 滴与硫氰滴与硫氰 酸胺试液酸胺试液 3 滴，即生成草绿色沉淀。滴，即生成草绿色沉淀。 2. 吡啶环的开环反应 适用于吡啶适用于吡啶 、 未取代，以及未取代，以及 、 为烷基或羧基的衍生物为烷基或羧基的衍生物 （1）戊烯二醛反应（Knig反应） 尼可刹米尼可刹米 ChP（2000） 【鉴别】【鉴别】（2）取本品）取本品 1 滴，加水滴，加水 50 ml，摇匀，分取，摇匀，分取 2 ml，加溴化氰试，加溴化氰试 液液 2 ml与与 2.5% 苯胺溶液苯胺溶液

5、 3 ml，摇匀，摇匀， 溶液渐显黄色。溶液渐显黄色。 黄色戊烯二醛衍生物 溴化氰尼可刹米 苯胺 OH2 HBr+NH2CN+ CHOHOCH CON(C2H5)2 H2O2 N CNBr CON(C2H5)2 BrCN N CON(C2H5)2 CON(C2H5)2 OCHCHOH + 2 NH2 N CON(C2H5)2 CHCHNH N CONHNH2 KMnO4或溴水 N COOH 淡红红色联苯胺戊烯二醛衍生物 黄黄棕色苯胺戊烯二醛衍生物 异烟肼：异烟肼： （2）二硝基氯苯反应 异烟腙异烟腙 ChP（2000） 【鉴别】【鉴别】 取异烟腙约取异烟腙约50 mg，加，加2,4 二硝基氯苯

6、二硝基氯苯50 mg与乙醇与乙醇3 m1，置水，置水 浴中煮沸浴中煮沸23 min，加，加10氢氧化钠氢氧化钠 溶液溶液2滴，静置后，即显鲜明的红色。滴，静置后，即显鲜明的红色。 N COONa NaOH N CONHN CH OCH3 OH 鲜明的红色 乙醇二硝基氯苯，异烟腙 滴，静置 2NaOH%10 min32 42 N COONa NO2 NO2 OH- N COONa Cl NO2 NO2 Cl NO2 NO2 + N COONa 紫红色 二硝基氯苯，异烟肼 乙醇 OH 42 异烟肼不经处理的反应异烟肼不经处理的反应： （二）酰肼基团的反应 1. 还原反应 2 3 NAg AgNO

7、、银镜）（黑色 异烟肼 异烟肼异烟肼 ChP（2000） 【鉴别】【鉴别】 （2）取异烟肼约）取异烟肼约10 mg， 置试管中，加水置试管中，加水2 ml溶解后，加氨制溶解后，加氨制 硝酸银试液硝酸银试液1 m1，即发生气泡与黑色，即发生气泡与黑色 浑浊，并在试管壁上生成银镜。浑浊，并在试管壁上生成银镜。 （红色）异烟肼SeSeO2 2. 缩合反应 测定熔点 异烟腙（黄色）香草醛异烟肼 、 OH2 N CONHNH2 + CHO OH OCH3 H2O N CONH N CH OCH3 OH 异烟肼异烟肼 ChP（2000） 【鉴别】【鉴别】 （1）取本品约）取本品约0.1 g，加水，加水 5

8、 ml溶解后，加溶解后，加10香草醛的乙醇溶香草醛的乙醇溶 液液1 m1，摇匀，微热，放冷，即析出，摇匀，微热，放冷，即析出 黄色结晶，滤过，用稀乙醇重结晶，黄色结晶，滤过，用稀乙醇重结晶， 在在105干燥后，测定熔点，其熔点干燥后，测定熔点，其熔点 为为228231，熔融时同时分解。，熔融时同时分解。 （三）分解产物的反应 二乙胺尼可刹米 NaOH 1. 尼可刹米尼可刹米 ChP（2000） 【鉴别】【鉴别】 （1）取本品）取本品 10 滴，加氢滴，加氢 氧化钠试液氧化钠试液 3 ml ，加热，即发生二，加热，即发生二 乙胺的臭气，能使湿润的红色石蕊试乙胺的臭气，能使湿润的红色石蕊试 纸变蓝

9、色。纸变蓝色。 2. 丙硫异烟胺丙硫异烟胺 ChP（2000） 【鉴别】【鉴别】（1）取本品约）取本品约 50 mg，加，加 盐酸溶液（盐酸溶液（9100）3 ml ，缓缓加，缓缓加 热，发生的气体可使湿润的醋酸铅试热，发生的气体可使湿润的醋酸铅试 纸显黑色。纸显黑色。 （黑色） 丙硫异烟胺 PbSPb(Ac)SH SHHCl 22 2 （四）紫外吸收光谱特征 丙硫异烟胺丙硫异烟胺 ChP（2000） 【鉴别】【鉴别】（1）取本品，加乙醇制成每）取本品，加乙醇制成每 1 ml 中含中含 20 g 的的溶液，照分光光度溶液，照分光光度 法（附录法（附录A）测定，在）测定，在 291 nm 的波的

10、波 长处有最大吸收，吸收度约为长处有最大吸收，吸收度约为0.78。 （五）（五）IR 尼可刹米尼可刹米 ChP（2000） 【鉴别】【鉴别】（4）本品的红外吸收图谱应）本品的红外吸收图谱应 与对照的图谱（光谱集与对照的图谱（光谱集 135 图）一致。图）一致。 三、杂质检查三、杂质检查 杂质来源杂质来源 原料引入、降解产生原料引入、降解产生 （一）异烟肼中游离肼的检查（一）异烟肼中游离肼的检查 1. 薄层色谱法（薄层色谱法（TLC） （1） ChP（2000） 杂质对照品法杂质对照品法 取本品，加水制成每取本品，加水制成每 1ml 中含中含 50mg 的溶液，作为供试品溶液。另取硫酸肼加的溶液

11、，作为供试品溶液。另取硫酸肼加 水制成每水制成每 1ml中含中含 0.20mg（相当于游离肼（相当于游离肼 50g 的溶液，作为对照溶液。吸取供试品的溶液，作为对照溶液。吸取供试品 溶液溶液 10l 与对照溶液与对照溶液 2l 分别点于同一硅分别点于同一硅 胶薄层板（用羧甲基纤维素钠溶液制备）胶薄层板（用羧甲基纤维素钠溶液制备） 上，以异丙醇丙酮（上，以异丙醇丙酮（3 2）为展开剂，）为展开剂， 展开后，晾干，喷以乙醇制对二甲氨基苯展开后，晾干，喷以乙醇制对二甲氨基苯 甲醛试液，甲醛试液，15min后检视，后检视，在供试品主斑在供试品主斑 点前方与硫酸肼斑点相应的位置上，不得点前方与硫酸肼斑点

12、相应的位置上，不得 显黄色斑点。显黄色斑点。 %02. 0%100 1050 21050 %100 3 供试品量 允许杂质存在的最大量 L （2） BP（1998） 游离肼游离肼 杂质对照品法杂质对照品法 有关物质有关物质 高低浓度对比法高低浓度对比法 2. 比浊法比浊法 JP（13） 检查方法检查方法 灵敏度法灵敏度法 反应原理反应原理 游离肼游离肼+水杨醛水杨醛水杨醛腙水杨醛腙 优点：优点：不用对照品，价廉、简单易不用对照品，价廉、简单易 行行 缺点：缺点：准确度差准确度差 3. 差示分光光度法差示分光光度法 游离肼游离肼+对二甲氨基苯甲醛对二甲氨基苯甲醛黄色缩合黄色缩合 物物 于于456

13、nm波长处有最大吸收波长处有最大吸收 异烟肼异烟肼+对二甲氨基苯甲醛对二甲氨基苯甲醛缩合物缩合物 于于 456nm波长处波长处无无吸收吸收 游离肼游离肼+3%丙酮丙酮无色无色的二甲基甲酮连的二甲基甲酮连 氮氮 参比：参比：异烟肼异烟肼+游离肼游离肼+对二甲氨基苯甲对二甲氨基苯甲 醛醛+3%丙酮丙酮 样品：样品：异烟肼异烟肼+游离肼游离肼+对二甲氨基苯甲对二甲氨基苯甲 醛醛 测定，对照法定量测定，对照法定量 （二）尼可刹米中有关物质的检查（二）尼可刹米中有关物质的检查 ChP（2000） TLC 高低浓度对比法高低浓度对比法 配制两种不同浓度的对照溶液配制两种不同浓度的对照溶液 四、含量测定四、

14、含量测定 （一）异烟肼的含量测定 1. 氧化还原滴定法 （1）溴酸钾法）溴酸钾法 ChP（2000）原料及制剂）原料及制剂 N CONHNH2 3 +2KBrO3 HCl N COOH 3 +3 N2 +3 H2O +2 KBr 反应摩尔比反应摩尔比 3 2 mlmg429. 3 32 14.13701667. 0 n cM T 取本品约取本品约 0.2g，精密称定，置，精密称定，置 100ml 量瓶中，加水使溶解并稀释至刻度，摇匀；量瓶中，加水使溶解并稀释至刻度，摇匀； 精密量取精密量取25m1，加水，加水50m1、盐酸、盐酸20ml与与 甲基橙指示剂甲基橙指示剂1滴，用溴酸钾滴定液滴，用溴

15、酸钾滴定液 （0.01667mo1/L）缓缓滴定（温度保持在）缓缓滴定（温度保持在 1825）至粉红色消失。每）至粉红色消失。每1ml的溴酸的溴酸 钾滴定液（钾滴定液（0.01667mol/L）相当于）相当于 3.429mg的的C6H7N3O。 （2）溴量法 反应摩尔比 1 4 mlmg429. 3 4 14.1371 . 0 n cM T N CONHNH2 +2 Br2+H2O HCl N COOH +N 2 +4HBr （3）剩余碘量法 反应摩尔比 1 4 N CONHNH2 +2 + N COOH +N 2 +4NaI+5I25NaHCO3 CO2 +4H 2O 2. 非水溶液滴定法

16、（1）非水酸量法 （2）非水碱量法 （二）尼可刹米的含量测定 1. 非水溶液滴定法非水溶液滴定法 ChP（2000）原料）原料 2. 紫外分光光度法紫外分光光度法 ChP（2000）注射液）注射液 内容量移液管内容量移液管 用内容量移液管精密量取本品用内容量移液管精密量取本品1m1， 置置 100ml 量瓶中，用量瓶中，用 0.5 硫酸溶液分次硫酸溶液分次 洗涤移液管内壁，洗液并入量瓶中，加洗涤移液管内壁，洗液并入量瓶中，加 0.5硫酸溶液稀释至刻度，摇匀，精密硫酸溶液稀释至刻度，摇匀，精密 量取适量，加量取适量，加0.5硫酸溶液稀释成每硫酸溶液稀释成每1ml 中约含尼可刹米中约含尼可刹米20

17、g的溶液，在的溶液，在263nm的的 波长处测定吸收度，按波长处测定吸收度，按C10H14N2O的吸收的吸收 系数（系数（ ）为）为292计算，即得。计算，即得。 1% 1cm E （三）异烟腙的含量测定 非水溶液滴定法非水溶液滴定法 电位法指示电位法指示 终点终点 ChP（2000）原料及片剂）原料及片剂 （四）丙硫异烟胺的含量测定 1. 非水溶液滴定法非水溶液滴定法 ChP（2000）原料）原料 2. 银量法银量法 ChP（2000）片剂）片剂 取本品取本品20片，精密称定，研细，精密片，精密称定，研细，精密 称取适量（约相当于丙硫异烟胺称取适量（约相当于丙硫异烟胺0.3g）置）置 具塞锥

18、形瓶中，加丙酮具塞锥形瓶中，加丙酮20ml使丙硫异烟胺使丙硫异烟胺 溶解，精密加入硝酸银滴定液（溶解，精密加入硝酸银滴定液（0.1mo1/L） 50m1，摇匀，放置，摇匀，放置15min，加水，加水50m1、硝、硝 酸酸3m1、硝基苯、硝基苯5ml与硫酸铁铵指示液与硫酸铁铵指示液2m1， 用硫氰酸铵滴定液（用硫氰酸铵滴定液（0.1mo1/L）滴定，并）滴定，并 将滴定的结果用空白试验校正。每将滴定的结果用空白试验校正。每lml的的 硝酸银滴定液（硝酸银滴定液（0.1mo1/L）相当于）相当于 9.014mg的的C9H12N2S。 99：79. 下列药物中，哪一个药物加 氨制硝酸银能产生银镜反应

19、 A. 地西泮 B. 阿司匹林 C. 异烟肼 D. 苯佐卡因 E. 苯巴比妥 97：132用于吡啶类药物鉴别的开 环反应有 A. 茚三酮反应 B戊烯二醛反应 C坂口反应 D. 硫色素反应 E二硝基氯苯反应 例1. ChP（2000）异烟肼的测定方法 为 A. 溴酸钾滴定法 B. 溴量法 C. TCL D. NaNO2 E. 比色法 例2. 能和2,4一二硝基氯苯发生呈色 反应的药物是 A. 异烟腙 B. 硫酸奎宁 C. 阿莫西林 D. 四环素 E. 炔孕酮 例3. 能和硫酸铜及硫氰酸铵反应，生 成草绿色沉淀的药物为 A. 对乙酰氨基酚 B. 异烟肼 C. 尼可刹米 D. 地西泮 E. 维生素E

20、 例4. 经高锰酸钾或溴水氧化后，可发生 开环形成戊烯二醛反应的药物为 A. 葡萄糖 B. 皮质酮 C. 维生素C D. 土酶素 E. 异烟肼 例5. 溴酸钾法测定异烟肼含量的方法是 A. 属于氧化还原滴定法 B. lmol溴酸钾相当于3/2mol的异烟肼 C. 采用永停滴定法指示终点 D. 在HCl酸性条件下进行滴定 E. 还可以用于异烟肼制剂的含量测定 例6. 异烟肼可由原料反应不完全或贮 藏中的降解反应而引入哪种杂质 A. 间氨基酚 B. 水杨酸 C. 对氨基苯甲酸 D. 游离肼 E. 其他甾体 例7. 可用于异烟肼鉴别的反应有 A. 与氨制硝酸银的反应 B. 戊烯二醛反应 C. 坂口反

21、应 D. 硫色素反应 E. 二硝基氯苯反应 第二节第二节 吩噻嗪类药物的分析吩噻嗪类药物的分析 吩噻嗪类药物的基本结构 N S R R 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 N S CH2CHN(CH3)2 CH3 HCl 盐酸异丙嗪 N S CH2CH2CH2N(CH3)2 Cl HCl 盐酸氯丙嗪 N S Cl CH2CH2CH2NN CH2CH2OH 奋乃静奋乃静 N S CH2CH2CH2 CF3 NN(CH2)2OCO(CH2)8CH3 癸氟奋乃静癸氟奋乃静 HCl N S CH2CH2CH2 CF3 NN CH2CH2OH 2 盐酸氟奋乃静盐酸氟奋乃静 N S CH2CH2CH

22、2NN CH3 CF3 HCl2 盐酸三氟拉嗪盐酸三氟拉嗪 盐酸二氧丙嗪盐酸二氧丙嗪 HCl N S OO CH2CH(CH3)N(CH3)2 一、结构与性质一、结构与性质 （一）结构分析 1. 硫氮杂蒽母核 （1）含S、N的三环共轭的大体系， S、N与苯环形成p-共轭具有紫 外吸收光谱特征 10 9 8 7 6 5 4 3 2 1 N S （2）硫氮杂蒽环上硫原子为-2价， 具有还原性，易氧化呈色 （3）硫氮杂蒽环上硫原子有两对 孤对电子，易与金属离子络合呈色 2. 取代基 R：脂烃胺基、哌嗪基，具碱性 R：卤素 XXC 一定方法破坏 （二）性质 1. 紫外与红外吸收光谱紫外与红外吸收光谱

23、本类药本类药 物的紫外特征吸收，主要由物的紫外特征吸收，主要由母核三环母核三环 的的系统系统所产生，一般具有所产生，一般具有三个峰值三个峰值。 即在即在 204209nm（205nm附近）、附近）、 250265nm（254nm附近）和附近）和300 325nm（300nm附近）。附近）。最强峰多在最强峰多在 250265nm。 2位上的取代基（位上的取代基（R）不同，会）不同，会 引起吸收峰发生位移。引起吸收峰发生位移。 其结构中其结构中-2 价的硫，易氧化，氧价的硫，易氧化，氧 化产物砜及亚砜有四个吸收峰。化产物砜及亚砜有四个吸收峰。 吩噻嗪类药物随取代基吩噻嗪类药物随取代基 R 和和R的

24、的 不同，产生不同的红外吸收光谱。不同，产生不同的红外吸收光谱。 2. 易被氧化呈色易被氧化呈色 3. 易与金属离子络合呈色易与金属离子络合呈色 4. 碱性碱性 二、鉴别试验二、鉴别试验 （一）（一）UV和和IR 奋乃静奋乃静 ChP（2000） 鉴别鉴别 （2）取本品，加无水乙醇制）取本品，加无水乙醇制 成每成每1ml 中含中含 7 g 的的溶液，照分光光溶液，照分光光 度法（附录度法（附录A）测定，在）测定，在 258nm 的的 波长处有最大吸收，吸收度约为波长处有最大吸收，吸收度约为0.65。 （3）本品的红外吸收图谱应与对照）本品的红外吸收图谱应与对照 的图谱（光谱集的图谱（光谱集 2

25、43 图）一致图）一致 （二） 显色反应 1. 氧化剂氧化显色 氧化剂氧化剂 硫酸、硝酸、过氧化氢硫酸、硝酸、过氧化氢 奋乃静奋乃静 ChP（2000） 鉴别鉴别 （1）取本品）取本品 5mg，加盐酸与，加盐酸与 水各水各 1ml，加热至，加热至80，加入过氧化，加入过氧化 氢溶液数滴，即显深红色；放置后，氢溶液数滴，即显深红色；放置后， 红色渐褪去。红色渐褪去。 盐酸异丙嗪盐酸异丙嗪 ChP（2000） 鉴别鉴别 （1）取本品约）取本品约 5mg，加硫酸，加硫酸 5ml 溶解后，溶液显樱桃红色；放置溶解后，溶液显樱桃红色；放置 后，色渐变深。后，色渐变深。 （2）取本品约）取本品约 0.1g

26、，加水，加水 3ml 溶解溶解 后，加硝酸后，加硝酸 1ml，即生成红色沉淀；，即生成红色沉淀； 加热，沉淀即溶解，溶液由红色转变加热，沉淀即溶解，溶液由红色转变 为橙黄色。为橙黄色。 癸氟奋乃静癸氟奋乃静 ChP（2000） 鉴别鉴别 （2）取本品约）取本品约 5mg，加甲醇，加甲醇 2ml 溶解后，加溶解后，加 0.1% 氯化钯溶液氯化钯溶液 3ml，即有沉淀生成，并显红色，再，即有沉淀生成，并显红色，再 加过量的氯化钯溶液，颜色变深。加过量的氯化钯溶液，颜色变深。 2. 与钯离子络合显色 （三）分解产物的反应 癸氟奋乃静癸氟奋乃静 ChP（2000） 鉴别鉴别 （1）取本品）取本品 15

27、 20mg，加，加 碳酸钠与碳酸钾各约碳酸钠与碳酸钾各约0.1g，混匀，在，混匀，在 600 炽灼炽灼 1520分钟，放冷，加水分钟，放冷，加水 2ml 使溶解，加盐酸溶液（使溶解，加盐酸溶液（12）酸）酸 化，滤过，滤液加茜素锆试液化，滤过，滤液加茜素锆试液 0.5ml， 应显黄色。应显黄色。 溶液由红色变为黄色 茜素 癸氟奋乃静 酸性茜素锆 ， ZrF F 2 6 600COKCONa 3232 （四）氯化物的反应 盐酸氯丙嗪盐酸氯丙嗪 ChP（2000） 鉴别鉴别 （3）本品的水溶液显氯化物）本品的水溶液显氯化物 的鉴别反应（附录的鉴别反应（附录 ）。）。 三、有关物质检查三、有关物质检

28、查 1. 癸氟奋乃静及其注射液癸氟奋乃静及其注射液 TLC 参比杂质对照品法参比杂质对照品法 以盐酸氟奋乃静为对照品以盐酸氟奋乃静为对照品 2. 其他药物其他药物 TLC 高低浓度对比法高低浓度对比法 四、含量测定 （一）（一） 非水溶液滴定法非水溶液滴定法 原料药原料药 HClO4在冰醋酸溶液中，具强氧化在冰醋酸溶液中，具强氧化 性，可氧化吩噻嗪类药物产生红色的性，可氧化吩噻嗪类药物产生红色的 氧化物，干扰指示剂终点的观察。排氧化物，干扰指示剂终点的观察。排 除方法：除方法： （1）改用中性溶剂）改用中性溶剂 （2）加抗坏血酸）加抗坏血酸 （3）电位法指示终点）电位法指示终点 （二）紫外分光

29、光度法 1. 直接分光光度法直接分光光度法 盐酸异丙嗪盐酸异丙嗪：片剂测定波长为：片剂测定波长为 249nm（ 为为910）；注射液为了）；注射液为了 消除抗氧剂维生素消除抗氧剂维生素C（ max 243nm）对）对 测定的干扰，测定波长改为测定的干扰，测定波长改为299nm （ 为为108）。）。 1% 1cm E 1% 1cm E 同理，同理，盐酸氯丙嗪盐酸氯丙嗪片剂测定波长片剂测定波长 为为254nm（ 为为915）；注射液测定）；注射液测定 波长改为波长改为306nm（ 为为115）。 1% 1cm E 1% 1cm E 2. 萃取后分光光度法萃取后分光光度法 盐酸氯丙嗪注射液盐酸氯丙

30、嗪注射液 计算。为以 ，测定盐酸氯丙嗪 乙醚层 氯丙嗪盐酸氯丙嗪 盐酸萃取乙醚提取 氨水碱化 915 E 1254 1% 1cm max Anm 3. 二阶导数分光光度法二阶导数分光光度法 盐酸氯丙嗪注射液盐酸氯丙嗪注射液 抗氧剂维生素抗氧剂维生素C的二阶导数光谱近的二阶导数光谱近 似为接近基线的一条直线，不干扰盐似为接近基线的一条直线，不干扰盐 酸氯丙嗪的测定酸氯丙嗪的测定 因此盐酸氯丙嗪可从其二阶导数因此盐酸氯丙嗪可从其二阶导数 光谱量取峰光谱量取峰266nm谷谷254nm距离，标准距离，标准 曲线法定量曲线法定量 4. 萃取双波长分光光度法 （1）原理）原理 在待测组分（在待测组分（a）

31、的最大吸收波长）的最大吸收波长 （测定波长，（测定波长， 1）处测定待测组分和干）处测定待测组分和干 扰组分（扰组分（b）吸收度的总和；另选一适）吸收度的总和；另选一适 当波长（参比波长，当波长（参比波长， 2）测定吸收度，）测定吸收度， 并使干扰组分在测定波长和参比波长处并使干扰组分在测定波长和参比波长处 的吸收度相等，即的吸收度相等，即 ，而待测组，而待测组 分在这两个波长处吸收度的差值足够大。分在这两个波长处吸收度的差值足够大。 bb AA 21 （2）定量依据 样品在二波长下吸收度 差值（A）： a bb a aa babababa CA AA lCAA AAAAAAA )( )()(

32、 21 2121 221121 即，吸收度差值（A）仅与待测组分 的浓度有关，而与干扰组分无关，干 扰组分的干扰被消除。 （3）必要条件 干扰组分在两个波长处吸收度 相等 待测组分在两个波长处吸收度 相差足够大 （4）应用 萃取 除去抗氧剂的干扰 氧化产物盐酸盐盐酸氯丙嗪 乙醚层 氧化产物氯丙嗪 盐酸氯丙嗪注射液 盐酸萃取 乙醚提取 浓氨碱化 双波长分光光度法测定 排除氧化产物的干扰排除氧化产物的干扰 测定波长测定波长 254nm 参比波长参比波长 277nm 对照法定量对照法定量 （三） 铈量法 红色消褪红色 e2,)Ce(SO e,)Ce(SO sol H S 24 24 自身指示终点或电

33、位法、永停自身指示终点或电位法、永停 法指示终点法指示终点 优点：优点： 硫酸铈作滴定剂具有高的氧化硫酸铈作滴定剂具有高的氧化 电位，且为一价还原；不存在对环电位，且为一价还原；不存在对环 取代基的副反应，专属性高。取代基的副反应，专属性高。 本法既可用于原料，亦可用于本法既可用于原料，亦可用于 片剂的测定片剂的测定 （四）比色法 1. 钯离子比色法 ，对照法定量处测定在 红色络合物吩噻嗪类药物 A nm500 Pd max max 0.1pH22 反应在反应在 pH20.1 的缓冲液中进行的缓冲液中进行 优点：优点： 钯离子比色法可选择性地用于未钯离子比色法可选择性地用于未 被氧化的吩噻嗪类

34、药物的测定被氧化的吩噻嗪类药物的测定 2. 铁盐比色法铁盐比色法 95：131盐酸氯丙嗪的含量测定方法 有 A. 中和法 B. 非水滴定法 C. 紫外法 D. 旋光法 E. 铈量法 99x：87. 中国药典（1995年版）对盐 酸异丙嗪注射液的含量测定，选用 299nm波长处测定，其原因是 A. 299nm处是它的最大吸收波长 B. 为了排除其氧化产物的干扰 C. 为了排除抗氧剂的干扰 D在299nm处，它的吸收系数最大 E. 在其他波长处，因其无明显吸收 99x：78. 有氧化产物存在时，吩噻嗪 类药物的鉴别或含量测定方法为 A. 非水溶液滴定法 B. 紫外分光光度法 C. 荧光分光光度法

35、D. 钯离子比色法 E. pH指示剂吸收度比值法 例1. 中国药典(2000年版)中地西泮原 料药中2-甲氨基-5-氯二苯酮的检查法 为 A. TLC B. HPLC C. GC D. 沉淀法 E. 显色法 例2. 检查盐酸氯丙嗪中“有关物质” 时，采用的对照溶液为 A. 杂质的标准溶液 B. 标准“有关物质”溶液 C. 供试品溶液 D. 供试液的稀释溶液 E. 对照溶液 例3. 某药物于酸性溶液中，加硫酸铈试 液则产生红色，继续滴加硫酸铈试液， 红色由浅变深，继由深又变浅直至红色 消失，该药物应为 A. 雌二醇 B. 氯丙嗪 C. 诺氟沙星 D. 硫酸镁 E. 苯巴比妥钠 例4. 吩噻嗪类药

36、物与钯离子反应，需 在以下哪种酸性条件下进行 A. pH4 B. pH33.5 C. pH20.1 D. pH1 E. pH5 第三节第三节 苯并二氮杂卓苯并二氮杂卓 类药物的分析类药物的分析 1 2 3 4 5 6 7 + 环庚三烯环庚三烯 草草 卓卓 N N 1 2 3 4 5 6 7 1,4-二氮杂卓 N N 1 2 3 4 5 6 7 1,4-苯并二氮杂卓 8 9 N N N CH3 O Cl 氯氮卓 H N N Cl H3C O 地西泮 N N O2N O H 硝西泮硝西泮 N N O2N O Cl H 氯硝西泮氯硝西泮 奥沙西泮奥沙西泮 H N N O Cl OH N N O Cl

37、 OH F CH2CH2N(CH2CH3)2 2HCl 盐酸氟西泮盐酸氟西泮 N N N N Cl 艾司唑仑艾司唑仑 N N N N Cl H3C 阿普唑仑阿普唑仑 一、结构与性质一、结构与性质 1. 苯并二氮杂卓母核苯并二氮杂卓母核 弱碱性，弱碱性，UV 2. 结构中的环一般比较稳定，但在酸结构中的环一般比较稳定，但在酸 性溶液中可水解，形成相应的二苯甲酮性溶液中可水解，形成相应的二苯甲酮 衍生物。衍生物。 甘氨酸地西泮 、 OHH 2 （芳伯氨基） 二苯甲酮氯氨基氯氮卓 、 52 OHH 2 NH2 ClC O H+ N N Cl O NHCH3 XXC 氧瓶燃烧法破坏 3. 含卤素含卤素

38、 二、鉴别试验二、鉴别试验 （一）化学反应 1. 沉淀反应沉淀反应 橙红色氯氮卓、地西泮 HCl 4 KBiI 氯氮卓氯氮卓 ChP（2000） 【鉴别】【鉴别】（2）取本品约）取本品约 10mg，加盐，加盐 酸溶液（酸溶液（91000）10ml 溶解后，加溶解后，加 碘化铋钾试液碘化铋钾试液 1 滴，即生成橙红色沉滴，即生成橙红色沉 淀。淀。 阿普唑仑阿普唑仑 ChP（2000） 鉴别鉴别 （1）取本品约）取本品约 5mg，加盐酸，加盐酸 溶液（溶液（91000）2ml 溶解后，分为溶解后，分为 两份：一份加硅钨酸试液两份：一份加硅钨酸试液 1 滴，即生滴，即生 成白色沉淀；另一份加碘化铋钾

39、试液成白色沉淀；另一份加碘化铋钾试液 1 滴，即生成橙红色沉淀。滴，即生成橙红色沉淀。 白色硅钨酸阿普唑仑 HCl 2. 水解后重氮化水解后重氮化偶合反应偶合反应 氯氮卓、艾司唑仑、奥沙西泮氯氮卓、艾司唑仑、奥沙西泮 氯氮卓氯氮卓 ChP（2000） 鉴别鉴别 （1）取本品约）取本品约 10mg，加盐酸，加盐酸 溶液（溶液（12）15ml，缓缓煮沸，缓缓煮沸 15 分分 钟，放冷，溶液显芳香第一胺类的鉴钟，放冷，溶液显芳香第一胺类的鉴 别反应（附录别反应（附录）。）。 3. 水解后呈茚三酮反应水解后呈茚三酮反应 地西泮地西泮 4. 硫酸硫酸荧光反应荧光反应 地西泮地西泮 ChP（2000） 鉴

40、别鉴别 （1）取本品约）取本品约 10mg，加硫酸，加硫酸 3ml，振摇使溶解，在紫外灯，振摇使溶解，在紫外灯 （365nm）下检视，显黄绿色荧光。）下检视，显黄绿色荧光。 氯氮卓氯氮卓黄色黄色 艾司唑仑艾司唑仑亮绿色亮绿色 硝西泮硝西泮淡蓝色淡蓝色 5. 分解产物的反应分解产物的反应 地西泮地西泮 ChP（2000） 鉴别鉴别 （2）取本品）取本品 20mg，用氧瓶燃，用氧瓶燃 烧法（附录烧法（附录 C）进行有机破坏，）进行有机破坏， 以以 5% 氢氧化钠溶液氢氧化钠溶液 5ml 为吸收液，为吸收液， 燃烧完全后，用稀硝酸酸化，并缓缓燃烧完全后，用稀硝酸酸化，并缓缓 煮沸煮沸 2 分钟，溶液

41、显氯化物的鉴别反分钟，溶液显氯化物的鉴别反 应（附录应（附录 ）。）。 （二）（二）UV 和和 IR （三）（三）TLC 三、特殊杂质的检查 （一）（一） 有关物质的检查有关物质的检查 1. 地西泮中有关物质的检查地西泮中有关物质的检查 地西泮的原料及片剂地西泮的原料及片剂 TLC 高低浓度对比法高低浓度对比法 2. 氯氮卓中有关物质的检查氯氮卓中有关物质的检查 USP（24） TLC 氧化物、氨基物氧化物、氨基物 杂质对照品法杂质对照品法 有关物质有关物质 参比杂质对照品法参比杂质对照品法 BP（1998）TLC 高低浓度对比法高低浓度对比法 3. 氯氮卓中有关物质的反相高效液相氯氮卓中有关物质的反相高效液相 色谱法色谱法 （二）降解产物的检查（二）降解产物的检查 地西泮注射液地西泮注射液 分解产生分解产生2-甲氨基甲氨基-5-氯二苯甲酮氯二苯甲酮 HPLC 主成分自身对照法主成分自身对照法 1. 峰面积归一化法 取一定量供试品溶液进样，测定各 杂质及药物的峰面积，计算各杂质峰面 积及其总和占总峰面积的百分率，不能 超过限量。注意溶剂峰不应计算在总峰 面积内。 优点：不需杂质对照品，简便易 行。 缺点：检测波长处，各杂质和药 物的吸收强度可能有差异，控制杂质 峰面积百分率不一定就是杂质限量， 准确度差。 2