实验5 乳酸脱氢酶的活性测定_第1页
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文档简介

1、实验5 唾液淀粉酶特性实验 1、任务背景、任务背景 淀粉是葡萄糖以-1，4糖苷键及-1，6糖苷键联结的高分子多糖，是人类和动物的重要食物，也是动物饲料中的重要成分。淀粉酶是催化分解淀粉的酶的总称，它存在于动物的唾液和小肠中，催化淀粉水解为麦芽糖，是淀粉进入能量代谢的初级反应，淀粉酶对淀粉的分解作用是人和动物利用淀粉的依据，淀粉酶活性的观察与测定，具有重要的理论和应用研究的意义。 2、任务目标、任务目标 理解酶的作用条件。 3、工作原理、工作原理 酶的特点之一对环境酸碱度敏感。酶表现最大活力时的pH值称为酶的最适pH值。一般酶的最适pH值在48之间。 酶的催化作用受温度的影响很大，反应速度达到最

2、大值时的温度称为酶的最适温度。大多数动物酶的最适温度为3740，大多数植物酶的最适温度为5060。 低浓度的氯离子能增加淀粉酶的活性，是它的激活剂。铜离子能降低该酶的活性，是它的抑制剂。 淀粉与各级糊精遇碘呈现不同的颜色。在不同pH、温度以及激活剂、抑制剂存在下，唾液淀粉酶对淀粉水解活力的高低可通过水解混合物遇碘呈现颜色的不同来判断。实验步骤实验步骤1 10稀释唾液：取离心管 收集唾液0.51ml，3000r/min离心5min取0.5ml唾液，置新离心管中，加水4.5ml，充分混匀。实验步骤实验步骤1）温度对酶活性的影响 取三支离心管按下表操作：加入物加入物1231% 淀粉溶液淀粉溶液0.5

3、0.50.5PH6.8缓冲液缓冲液0.50.50.5平衡平衡5mim37沸水冰浴冰浴稀唾液稀唾液0.10.10.1反应温度反应温度（计时）（计时）37沸水沸水冰浴冰浴 每反应1min，取1号管反应液1滴，加含有碘液的反应板上观察颜色变化。当颜色为黄色时候，取出三管，冷却到室温，各加入1滴碘液。 记录反应结束时间t，及各管颜色。实验步骤实验步骤2）pH对酶活性的影响取三支离心管按下表操作：反应t分钟后，取三管各加入碘液一滴，记录反应颜色。加入加入物物ml4561%淀粉溶液淀粉溶液0.50.50.5P5.7缓冲液缓冲液0.5-PH6.8缓冲液缓冲液-0.5-PH8.0缓冲液缓冲液0.5摇匀后摇匀后37恒温水浴中保温恒温水浴中保温5分钟分钟稀唾液稀唾液0.1 0.1 0.1上面各管摇匀后放入上面各管摇匀后放入37恒温水浴中保温恒温水浴中保温实验步骤实验步骤3）激活剂与抑制剂：反应t分钟后，取三管各加入碘液一滴，记录反应颜色。加入加入物物ml7891%淀粉溶液淀粉溶液0.50.50.5P6.8缓冲缓冲液液0.50.50.5蒸馏水蒸馏水0.51%NaCl-0.5-1%CuSO40.5摇匀后摇匀后37恒温水浴中保温恒温水浴中

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