病理组织切片裂隙补救方法的技术改良

1、DOC格式论文，方便您的复制修改删减病理组织切片裂隙补救方法的技术改良（作者：单位：邮编：）【摘要】目的?：寻求病理组织切片易产生裂隙补救的新方 法。方法：对易产生裂隙的组织蜡块用氨水涂抹后重新切片。结果： 用此类方法处理组织，切片平整，结构完好，组织染色无明显差异。 结论：氨水对病理组织切片裂隙的补救有明显的效果。【关键词】 石蜡切片；裂隙;氨水;软化在常规石蜡切片过程中，我们常常会把大小不等的标本进行混合固 定脱水处理，由此难免会出现标本处理不均的现象： 或大的组织处理 不足，或小的组织处理过度，使得部分组织变脆、变硬。组织切片常 常表现为有边缘不齐的“龟壳状”（见图1）和“百叶窗样”裂隙

2、。究 其原因往往与组织脆性增加有关，若将此蜡块再行低温冷冻后切片， 此种裂隙则更为明显和严重。为了补救这类问题蜡块，我们通过与兄 弟单位的技术交流及自身的实践探索，发现适当使用氨水能有效软化 组织，降低组织脆性，减少裂隙出现，且更有利于蜡块切出完好的蜡 片。现报告如下。1材料、方法和结果1.1?材料？?选取我院2008年行常规石蜡制片中组织蜡片出现 裂隙的蜡块358只，其中包括淋巴结、脾脏、肝脏、肾脏、子宫、乳 腺等手术切取标本，同时含有内镜、穿刺活检标本。试剂：纯氨水（上 海三鹰化学试剂有限公司生产）500 mL。1.2?方法？?将此类容易产生裂隙的组织蜡块放入冷水中（水温05 C）约10

3、min。将蜡块放上切片机小心粗修至暴露整个组 织切面，然后细切蜡片10余张（此蜡片弃之不用），再将粗切把手逆 时针转动1/41/2圈以退刀。用脱脂棉球蘸取足量的纯氨水，覆 盖在细切后的组织面上约 10 s，再行细切，直至有组织蜡片顺利切 出，取前面35张展于裱片机内。待蜡片充分展平后迅速裱于载 玻片上。常规烤片，染色，封固。1.3?结果？?用此类方法处理组织，切片平整，结构完好，除“龟 壳状”裂纹尚存外（但明显缩小）其余裂隙均消失，组织染色无明显差 异（见图2）。2?讨论常规制片中出现裂隙是我们常规技术工作中经常碰到的问题，此类问题切片不仅影响切片质量，有时还会导致病理诊断的困难，更有 甚者连

4、蜡片都很难切出。马恒辉等1提出导致切片裂隙有诸多原因， 在实际操作中，组织处理因素是首要因素，由于甲醛、乙醇、二甲苯 三者对组织均有不同程度的硬化作用，其过度处理必然导致组织弹性 降低，表现为各种间质成分（特别是胶原、网状纤维）张力下降，脆性 增加，发生断裂而呈“龟壳状”裂纹；或者尚未发生断裂，但组织过 度冷冻后切片，切出的蜡片在室温中迅速膨胀，而呈“百叶窗样”裂 隙。当然诸如子宫、乳腺等组织纤维含量极为丰富，过硬的组织蜡块 接触刀锋产生震动，也会出现波纹裂隙。鉴于此，传统病理技术的做法是在蜡块暴露面哈气或擦少量温水以求软化组织或降低组织与室内的温差， 结果往往是组织切 片过厚或难以切出蜡片。

5、马恒辉等3用5 mmol/L的盐酸（HCI）浸泡 来处理有裂隙的组织，此法虽能有效防止裂隙，但较费时且组织膨胀 较为明显，核着色困难，切片红染2。而本资料介绍的氨水分子式 为NH4OH能解离为NH3和H2O使之达到一种动态平衡。用氨水处 理与上述方法相比有以下优点：氨水是一种很好的软化剂，此法源 于工业上压缩木质技术用氨水来软化木材3，可软化组织间质的各 种纤维，增加弹性和张力。氨水解离出的NH3分子量小于HCI，更具穿透力，所以用时极短，10 s左右就深达2030卩m加之此法无 需取下蜡块，方便快捷。氨水解离时将吸收周围的热能，在不降低 蜡块表面温度的情况下，减少了蜡块切面与周围的温差，在防

6、止蜡块 膨胀的同时又能顺利切出蜡片。用氨水来处理蜡块表面时，NH3穿透组织表面，为了达到氨水的平衡，也会带进一定量的H2Q使得原本处理过度的组织得到一定的恢复。用氨水处理的蜡块，对硬化的 子宫和乳腺等组织也有明显的软化作用，故也能防止波纹裂隙的产 生。应用氨水时，也应注意以下几项：粗修蜡块后，宜细切蜡片 10余张并丢弃，以防后继细切蜡片产生空洞。因氨水处理后对蜡 块作用只有深达表面2030卩m所以在此步骤之前必须退刀，细切 出的蜡片也只能取前面35张。蜡片置入裱片机内，待充分展平 后方可裱贴于载玻片，以防产生褶皱。尽管此法用时极短，但蜡片 仍存留少量氨水，因此染色前建议用流水先进行冲洗。【参考文献】1 马恒辉,章如松.组织切片裂隙产生的原因与对策J.诊断 病理学杂志,2007,14(6)