人教版教学福建省16次年会报告基因工程和细胞工程课件

1、人教版教学福建省16次年会报告基因工程和细胞工程人教版教学福建省16次年会报告基因工程和细胞工程 生物材料生物材料DNAmRNA一定大小范围一定大小范围DNAPCRcDNA（互补（互补DNA）反转录基因组文库基因组文库 cDNA文库文库 基因文库基因文库包括人工合成人工合成限制酶切割获取目的基因获取目的基因构建表达载体构建表达载体导入受体细胞导入受体细胞得到转基因生物得到转基因生物目的基因检测与鉴定目的基因检测与鉴定第一步第一步第二步第二步第三步第三步第四步第四步人教版教学福建省16次年会报告基因工程和细胞工程获取目的基因获取目的基因生物材料生物材料PCRcDNAmRNADNA基因组文库基因组

2、文库cDNA文库文库一定大小范围一定大小范围DNA人工合成人工合成逆转录逆转录限制酶切割限制酶切割人教版教学福建省16次年会报告基因工程和细胞工程获取目的基因获取目的基因构建表达载体构建表达载体导入受体细胞导入受体细胞得到转基因生物得到转基因生物目的基因检测与鉴定目的基因检测与鉴定人教版教学福建省16次年会报告基因工程和细胞工程人教版教学福建省16次年会报告基因工程和细胞工程人教版教学福建省16次年会报告基因工程和细胞工程基因组文库基因组文库人教版教学福建省16次年会报告基因工程和细胞工程人教版教学福建省16次年会报告基因工程和细胞工程结构基因结构基因外显子外显子内含子内含子转录、加工修饰转录

3、、加工修饰mRNA反转录酶反转录酶cDNA人教版教学福建省16次年会报告基因工程和细胞工程人教版教学福建省16次年会报告基因工程和细胞工程基因组基因组DNADNA文库文库cDNAcDNA文库文库人教版教学福建省16次年会报告基因工程和细胞工程人教版教学福建省16次年会报告基因工程和细胞工程为什么要建为什么要建基因文库？基因文库？人教版教学福建省16次年会报告基因工程和细胞工程人教版教学福建省16次年会报告基因工程和细胞工程人教版教学福建省16次年会报告基因工程和细胞工程人教版教学福建省16次年会报告基因工程和细胞工程对应的菌斑或噬菌斑位置不变，对应的菌斑或噬菌斑位置不变，可以直接找出阳性菌落。

4、可以直接找出阳性菌落。特点：特点：人教版教学福建省16次年会报告基因工程和细胞工程免疫筛选法（一）免疫筛选法（一）放射性抗体检测法放射性抗体检测法滤膜（固定抗体）滤膜（固定抗体）+人教版教学福建省16次年会报告基因工程和细胞工程免疫沉淀检测法免疫沉淀检测法菌落菌落沉淀素沉淀素免疫筛选法（二）免疫筛选法（二）人教版教学福建省16次年会报告基因工程和细胞工程人教版教学福建省16次年会报告基因工程和细胞工程人教版教学福建省16次年会报告基因工程和细胞工程人教版教学福建省16次年会报告基因工程和细胞工程人教版教学福建省16次年会报告基因工程和细胞工程人教版教学福建省16次年会报告基因工程和细胞工程人教

5、版教学福建省16次年会报告基因工程和细胞工程人教版教学福建省16次年会报告基因工程和细胞工程人教版教学福建省16次年会报告基因工程和细胞工程放射自显影放射自显影DNA印迹转移印迹转移探针杂交探针杂交人教版教学福建省16次年会报告基因工程和细胞工程人教版教学福建省16次年会报告基因工程和细胞工程人教版教学福建省16次年会报告基因工程和细胞工程Southern杂交和杂交和Northern杂交过程示意图杂交过程示意图 人教版教学福建省16次年会报告基因工程和细胞工程人教版教学福建省16次年会报告基因工程和细胞工程人教版教学福建省16次年会报告基因工程和细胞工程人教版教学福建省16次年会报告基因工程和

6、细胞工程人教版教学福建省16次年会报告基因工程和细胞工程人教版教学福建省16次年会报告基因工程和细胞工程人教版教学福建省16次年会报告基因工程和细胞工程细胞融合（细胞融合（cell fusion)，又称体细胞杂交，是指两个或更多个相同或不同细胞通过膜融合，形成单个细胞的过程。人教版教学福建省16次年会报告基因工程和细胞工程细胞融合的常用方法细胞融合的常用方法一、灭活病毒法：一、灭活病毒法：二、聚乙二醇（PEG）法：三、电融合法：三、电融合法：人教版教学福建省16次年会报告基因工程和细胞工程一、灭活病毒法一、灭活病毒法 两个原生质体或细胞在病毒黏结作用下彼此靠近； 通过病毒与细胞膜的作用使两个细

7、胞膜互相渗透，胞质互相渗透； 两个细胞的细胞核互相融合，两个细胞融为一体； 进入正常的细胞分裂途径，分裂成含有两种染色体的杂种细胞。人教版教学福建省16次年会报告基因工程和细胞工程人教版教学福建省16次年会报告基因工程和细胞工程人教版教学福建省16次年会报告基因工程和细胞工程PEG诱导融合的特点诱导融合的特点：其优点是融合成本低，其优点是融合成本低，不需特殊设备；融合子异核率较高；融合过程不不需特殊设备；融合子异核率较高；融合过程不受物种限制。其缺点是操作过程繁琐，受物种限制。其缺点是操作过程繁琐，PEG可能可能对细胞有毒害。对细胞有毒害。人教版教学福建省16次年会报告基因工程和细胞工程三、电

8、融合法三、电融合法 细胞首先在交流电场中极化并沿电力线排列成串，形成细胞间的紧密接触；然后在高强度的直流电脉冲作用下，相互连接的细胞质膜被击穿而导致细胞融合。电融合法的优点：电融合法的优点：u融合率高，重复性强，对细胞伤害小；u装置精巧，方法简单，可在显微镜下观察或录像观察融合过程；u免去PEG诱导后的洗涤过程，诱导过程可控性强。人教版教学福建省16次年会报告基因工程和细胞工程人教版教学福建省16次年会报告基因工程和细胞工程人教版教学福建省16次年会报告基因工程和细胞工程u基于酶缺陷型细胞和药物抗性所建立的杂种筛选u基于营养缺陷型细胞所建立的杂种筛选u由温度敏感型细胞组成的杂种细胞的筛选u具有

9、所需性状杂种细胞的筛选常用的杂种细胞筛选方法常用的杂种细胞筛选方法人教版教学福建省16次年会报告基因工程和细胞工程 杂交瘤技术与单克隆抗体杂交瘤技术与单克隆抗体人教版教学福建省16次年会报告基因工程和细胞工程人教版教学福建省16次年会报告基因工程和细胞工程人教版教学福建省16次年会报告基因工程和细胞工程人教版教学福建省16次年会报告基因工程和细胞工程人教版教学福建省16次年会报告基因工程和细胞工程人教版教学福建省16次年会报告基因工程和细胞工程人教版教学福建省16次年会报告基因工程和细胞工程人教版教学福建省16次年会报告基因工程和细胞工程人教版教学福建省16次年会报告基因工程和细胞工程人教版教

10、学福建省16次年会报告基因工程和细胞工程人教版教学福建省16次年会报告基因工程和细胞工程 单克隆抗体技术的核心是用骨髓瘤细胞与经特定单克隆抗体技术的核心是用骨髓瘤细胞与经特定抗原免疫刺激的抗原免疫刺激的B淋巴细胞融合得到杂交瘤细胞，杂淋巴细胞融合得到杂交瘤细胞，杂交瘤细胞既能象骨髓瘤细胞那样在体外无限增殖，交瘤细胞既能象骨髓瘤细胞那样在体外无限增殖，又具有又具有B淋巴细胞产生特异性抗体的能力。因此，单淋巴细胞产生特异性抗体的能力。因此，单克隆抗体技术又称为杂交瘤技术。克隆抗体技术又称为杂交瘤技术。人教版教学福建省16次年会报告基因工程和细胞工程人教版教学福建省16次年会报告基因工程和细胞工程人教版教学福建省16次年会报告基因工程和细胞工程人教版教学福建省16次年会报告基因工程和细胞工程人教版教学福建省16次年会报告基因工程和细胞工程人教版教学福建省16次年会报告基因工程和细胞工程人教版教学福建省16次年会报告基因工程和细胞工程人教版教学福建省16次年会报告基因工程和细胞工程人教版教学福建省16次年会报告基因工程和细胞工程人教版教学福建省16次年会报告基因工程和细胞工程人教版教学福建省16次年会报告基因工程和细胞工程人教版教学福建省16次年会报告基因工程和细胞工程人教版教学福建省16次年会报告基因工程和细