清洁验证检验方法验证

1、生产设备清洁后取样方法和检验方法验证方案目录1 概述2 目的3 验证小组成员与职责3.1 验证小组成员3.2 验证小组职责4. 验证正文 验证前确认 验证方法描述 验证内容4.3.1 检测方法验证局部4.3.2 综合回收率验证5. 偏差总结6. 再验证情况7. 补充与修定8. 评价与结论9. 附录1. 概述生产过程中所用的生产设备均可能有残留物遗留，为了最大程度的防止由于上一批 次生产产品的残留影响下一批次或其他品种，故必须对生产所用的设备进行清洁。 清洁后要对该清洗方法进行取样检测残留量。一般通常的取样方法为棉签擦拭法和 淋洗法。2. 目的本验证方案的目的是考察清洗验证涉及取样过程和所用检测

2、方法的过程，是对 人员取样操作、残留物转移、测试过程的考察，考察工程最低定量限、线性、 综合回收率等。3. 验证小组成员与职责验证小组成员组长：XXX组员：XXX、XXX验证小组职责组长：质量副总经理XXX，负责批准验证方案和验证报告。组员：XXX，参与验证方案的制定，对验证操作过程监督检查，收集验证资料和 数据，参与起草验证方案和验证报告。组员：XXX，负责参与验证方案的制定，对所取样品进行化验，收集数据并报告 结果，审核验证报告。组员：XXX，负责审核验证方案，审核清洁验证方案和报告，协助验证方案的实 施，并审核验证报告。4. 验证正文验证前确认棉花/棉签材质：棉签紫外分光光度计天平编号：

3、编号：校验有效期校验有效期接受 不接受接受 不接检测方法描述421检测过程结构中含有很强的紫外吸收官能团，如双键的苯环等，故可采用紫外分光光 度法。1cm比色皿，在适宜的最大的吸收波长处，以甲醇为空白，测定样品溶液的 吸收度。根据测得的吸收度来计算样品残留的量。贮备液的配制取对照品约10mg,精密称定，置于200ml容量瓶中，用甲醇溶解并稀释至 刻度，混匀，得贮备液50卩g/m。计算测定时同时进行对照品的测定，根据朗伯比尔定律，按以下公式计算：A样C样=X C对A对A:分别为样品和贮备液的吸收度C:分别为样品和贮备液的溶液浓度验证内容检测方法验证局部为了保证清洗验证和日常清洗结果的可靠性，故对

4、本方案采用的紫外分析 方法考察了最大吸收波长确定、最低检测限/定量限、线性和范围、精密度、回收率。其中线性和范围、精密度和回收率工程考察合并在综合回收率考 察中，见章节。431.1最大吸收波长确实定取贮备液，以甲醇为空白，采用紫外分光光度仪，在400nm到190nm范围 内进行扫描，找出最适宜的最大吸收波长，并考察溶剂是否干扰。结果：最适宜的最大吸收波长为： nm，吸收图谱见附录3最低检测限/定量限采用50卩g/ml的贮备液逐级稀释成不同浓度的溶液测定吸收度，如25卩g/mk10卩g/ml卩g/ml卩g/ml等，直至最低定量限。检测限以1/3的最低定量限计算。浓度卩g/m吸收度50浓度卩g/m

5、吸收度2510最低定量限LOQ最低检测限LOD431.3线性和范围精密称取适量对照品，用甲醇制成 5个不同浓度溶液，作为研究溶液。5个不同 浓度的溶液及其确定依据见附录 1描述。并以浓度卩g/ml为横坐标，吸收度为纵坐标的线性关系曲线， 得到的R2应弓线 性曲线见附录4。浓度卩g/m吸收度吸收曲线方程R2422.4 结论：综合回收率验证棉签擦拭法综合回收率验证A. 试验溶液配制精密称取适量对照品，用甲醇制成 5个不同浓度溶液，作为研究溶液。5个不同浓度的溶液及其确定依据见附录2描述。B. 验证过程B1.准备一块平整光滑的不锈钢板材，尺寸为30cmX 30cm在钢板上划出 20cmX 20cm

6、的区域。将此区域分割成 5cmX 5cm的16个小块。分别 将约10ml试验溶液定量装入喷雾器，尽量均匀地喷在 20cmX 20cm的 区域内，根据实际喷出的溶液量计算单位面积上产品的量。B2.自然晾干不锈钢板。B3.将棉签用无水甲醇润湿，除去棉签上多余的溶液，按照擦拭法和淋洗法取样程序进行。擦拭区域选择整个喷涂面的中心区域单位面积 (5cm x 5cm,)整个擦拭采用同一根棉签。每个浓度平行试验3次。B4.取样结束后，将棉签分别放入 25ml的试管中，用10ml无水甲醇稀释 至刻度，并标注相关取样信息。B5.将上述15份样品溶液和试验溶液依次按照本方案中描述检测方法进行测定。B6.回收率计算

7、公式回收率()=实际测得值寻理论测得值X 10%C. 接受标准综合回收率： 70%综合回收率 RSD 70%回收率RSD%15%备注：1.检测溶液实际测得值为经喷洒、稀释后得到的检测样品；2.对应试验浓度实际测得值为由检测得到的数值转换至喷洒 至外表上未擦拭前的浓度。E. 结论4.321淋洗法综合回收率验证A. 试验溶液配制精密称取适量对照品，用甲醇制成 5个不同浓度溶液，作为研究溶液。5个不同浓度的溶液及其确定依据见附录2描述。B. 验证过程B1.精密吸取1ml试验溶液置于50ml圆底烧瓶中，并旋转烧瓶使试验溶液 均匀地分布在烧瓶下部内外表上。自然枯燥或在30 r下温和枯燥。B2.向烧瓶中参

8、加50ml甲醇，使之延壁快速留下，同时不断转动烧瓶。轻 微摇晃烧瓶使溶液均匀。作为测试溶液。每个浓度平行试验3次。B3.将上述15份样品溶液和试验溶液依次按照 检测方法进行测定。B4.回收率计算公式回收率=实际测得值寻理论测得值X 10%C. 接受标准综合回收率： 70%综合回收率RSD 70%回收率RSD%c 15%E. 结论6.偏差总结如果出现偏差请详细记录，假设没有以 N/A表示。7 .再验证情况如果存在以下情形之一时，须进行设备清洁程序的再验证。清洗方法发生本质性的改变时；设备体积、材质等参数发生改变会影响清洁效果时；8修改与补充如果出现修订于补充，请详细记录，假设没有以N/A表示。9

9、. 评价与结论根据获得的验证数据情况进行评价。10. 附录附录1线性范围测试溶液浓度确实定附录2回收率验证测试溶液浓度确实定附录3最大吸收波长扫描图附录4线性和范围关系曲线附录1线性范围测试溶液浓度确实定本次研究线性范围浓度点确定依据以LOQ浓度点为最低浓度点，最大允许残留量Ld为最高浓度点来设定线 性范围的浓度点。最低浓度点确定由于LOQ即为在检测时该方法能检测到的最低浓度，故直接将LOQ浓度最为 最低浓度点。最高浓度点确定采用擦拭法和淋洗法两种方式下最大允许残留量相对应于可供检测时的最高 浓度点作为线性研究时的最高浓度。1擦拭法方式下最高浓度点确定根据“产品生产设备清洁程序验证方案中计算得

10、到的擦拭法下的最大允许 残留量，Ld为卩g /cm2;在清洗后取样检测时溶液中浓度为 卩g/m。说明：在按25cm2擦拭后取样后，需要用10ml甲醇溶解后才能测 定，在假定DOND3回收率在100%的情况下即被甲醇100% 提取，此时擦拭前的浓度至少到达 卩g/ml时方能保证置于 最大允许残留量的限度Ld为卩g /cm;故在擦拭法方式下最大允许残留量对应的检测时浓度为卩g/m。2. 淋洗法方式下最高浓度点确定根据“产品生产设备清洁程序验证方案中计算得到的淋洗法下的最大允许 残留量，最大Ld为卩g ml，最小Ld为卩g mi;该浓度即为在清洗后取样检 测时的浓度。故在淋洗法方式下最大允许残留量对

11、应的检测时浓度为卩g/m。本次研究线性范围浓度点最高浓度点：卩g/ml最低浓度点：LOQ 如LOQ小于卩g ml时，以卩g ml为最低浓度 另外中间3个浓度点在范围内最高和最低浓度范围内合理均衡布置附录2回收率验证测试溶液浓度确实定本次研究回收率浓度点确定依据以LOQ浓度点为最低浓度点，最大允许残留量(Ld)为最高浓度点来设定回 收率的浓度点。擦拭法回收率测试溶液浓度确实定1. 最高浓度点最大允许残留量(Ld)来设定根据“产品生产设备清洁程序验证方案中计算得到的擦拭法下的最大允许 残留量，Ld为卩g /cn2;在清洗后取样检测时溶液中浓度为卩g/m。说明：在按25cm2擦拭后取样后，需要用10

12、ml甲醇溶解后才能测 定,在假定3回收率在100%的情况下(即被甲醇100%提取)， 此时擦拭前的浓度至少到达卩g/ml时方能保证置于最大允许 残留量的限度(Ld为卩g /cnfi);由于在按本方案进行模拟擦拭法回收率研究时，需要将取研究溶液10ml喷在20cmX 20cm的区域内，然后在5cmX 5cm区域内棉签擦拭取样，取样后需 要用10ml甲醇溶解后才能测定，考虑到棉签转移和检测方法的综合回收率 最低限为70%,故此时研究的溶液浓度须到达 4074卩g/m时方能保证在检测 时检测浓度到达最大允许残留量的限度(Ld为卩g/cm2;擦拭后检测时浓度 卩 g/m);计算如下：卩 g/mlx(

13、20cm x 20cm)x 10ml/ (5cm x 5cm)x 10ml x 70%) =4074 卩 g/ml2. 最低浓度点以LOQ浓度来设定：由于在检测时该方法能检测到的最低浓度为 LOQ由于在按本方案进行模拟 擦拭法回收率研究时，需要将取研究溶液 10ml喷在20cmX 20cm的区域内， 然后在5cmx 5cm区域内棉签擦拭取样，取样后需要用10ml甲醇溶解后才能 测定，考虑到棉签转移和检测方法的综合回收率最低限为 70%,故此时研究 的溶液浓度须到达23LOQ时方能保证在检测时检测浓度到达最低浓度点以LOQ计算如下：LOQX( 20cm x 20cm)x 10ml/ (5cm x

14、 5cm)x 10ml x 70%)=23 LOQ3. 故设定的浓度点为即需要配制的取样方法和检验方法回收率研究溶液浓度：最高浓度点：4074卩g/ml最低浓度点：23 LOQ另外中间3个浓度点在范围内最高和最低浓度范围内合理均衡布置淋洗法回收率测试溶液浓度确实定1. 最高浓度点最大允许残留量Ld来设定根据“产品生产设备清洁程序验证方案中计算得到的淋洗法下的最大允许残留量，Ld为最小卩gml;最大卩gml。该浓度即为在清洗后取样检测时的 浓度。由于在按本方案进行模拟擦拭法回收率研究时，需要将取研究溶液1ml置于50ml圆底烧瓶中，待干后参加 50ml甲醇溶解提取后得到的溶液才能测定，考虑到棉签转移和检测方法的综合回收率最低限为 70%，故此时研究的溶液 浓度须分别到达2350卩g/m和7786卩g/ml时方能保证在检测时检测浓度到达 最大允许残留量的限度Ld为最小卩g ml;最大卩g ml；计算如下：卩 g/mlx 50ml / 70%=2350 卩 g/ml卩 g/mX 50ml / 70%=7786 卩 g/ml2. 最低浓度点以LOQ浓度来设定由于在检测时该方法能检测到的最低浓度为LOQ,由于在按本方案进行模拟擦拭法回收率研究时，需要将取研究溶液 1ml置于50ml圆底烧瓶中，待干后加 入50ml甲醇溶解提取后得到的溶液