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文档简介
1、一、牛肉膏蛋白胨培养基(培养细菌用)牛肉膏 3g蛋白胨 10gNaCl 5g琼脂 1520g水 1000mlpH 7072105kg/cm2,1213灭菌20分钟。二、淀粉琼脂培养基(高氏1号培养基,培养放线菌用)可溶性淀粉 20gKNO3 1gNaCl 05gK2HPO4 05gMgSO4 05gFeSO4 001g琼脂 20g水 1000mlpH 7274配制时,先用少量冷水,将淀粉调成糊状,在火上加热,边搅拌边加水及其他成分,溶化后,补足水分至1000ml。105kg/cm2,1213灭菌20分钟。三、查氏培养基(培养霉菌用,实验16)NaNO3 2gK2HPO4 1gKCl 05gMg
2、SO4 05gFeSO4 001g蔗糖 30g琼脂 1520g水 1000mlpH 自然105kg/cm2,1213灭菌20分钟。四、马丁氏(Martin)琼脂培养基(分离真菌用)葡萄糖 10g蛋白胨 5gKH2PO4 1gMgSO47H2O 05g1/3000孟加拉红(rose bengal,玫瑰红水溶液)100ml琼脂 1520gpH 自然蒸馏水 800ml056kg/cm2(8磅/英寸2),1126灭菌30分钟。临用前加入003%链霉素稀释液100ml,使每毫升培养基中含链霉素30g。五、马铃薯培养基 (实验16)马铃薯 200g蔗糖(或葡萄糖) 20g琼脂 1520g水 1000mlp
3、H 自然马铃薯去皮,切成块煮沸半小时,然后用纱布过滤,再加糖及琼脂,溶化后补足水至1000ml。105kg/cm2,1213灭菌20分钟。六、麦芽汁琼脂培养基 (实验15)1取大麦或小麦若干,用水洗净,浸水612小时,置15阴暗处发芽,上盖纱布一块,每日早、中、晚淋水一次,麦根伸长至麦粒的两倍时,即停止发芽,摊开晒干或烘干,贮存备用。2将干麦芽磨碎,一份麦芽加四份水,在65水浴锅中糖化34小时,糖化程度可用碘滴定之。3将糖化液用46层纱布过滤,滤液如混浊不清,可用鸡蛋白澄清,方法是将一个鸡蛋白加水约20ml,调匀至生泡沫时为止,然后倒在糖化液中搅拌煮沸后再过滤。4将滤液稀释到56波美度,pH约
4、64,加入2%琼脂即成。105kg/cm2,1213灭菌20分钟。七、葡萄糖-醋酸盐培养基 (实验15)葡萄糖 1g酵母浸膏 25g醋酸钠 82g琼脂 15g蒸馏水 1000mlpH 48分装试管,070kg/cm2(10磅/英寸2),1152灭菌20分钟后制成斜面。八、半固体肉膏蛋白胨培养基 (实验26)肉膏蛋白胨液体培养基 100ml琼脂 03504gpH 76105kg/cm2,1213灭菌20分钟。九、合成培养基 (实验36,39)(NH4)2PO4 1gKCl 02gMgSO47H2O 02g豆芽汁 10ml琼脂 20g蒸馏水 1000mlpH 70加12ml004%的溴甲酚紫(pH
5、5268,颜色由黄色变紫色,作指示剂)。105kg/cm2,1213灭菌20分钟。十、豆芽汁蔗糖(或葡萄糖)培养基 (实验37,38)黄豆芽 100g蔗糖(或葡萄糖) 50g水 1000mlpH 自然称新鲜豆芽100g,放入烧杯中,加水1000ml,煮沸约半小时,用纱布过滤。用水补足原量,再加入蔗糖(或葡萄糖)50g,煮沸溶化。105kg/cm2,1213灭菌20分钟。十一、油脂培养基 (实验40)蛋白胨 10g牛肉膏 5gNaCl 5g香油或花生油 10g16%中性红水溶液 1ml琼脂 1520g蒸馏水 1000mlpH 72105kg/cm2,1213灭菌20分钟。注:1不能使用变质油。2
6、油和琼脂及水先加热。3调好pH后,再加入中性红。4分装时,需不断搅拌,使油均匀分布于培养基中。十二、淀粉培养基 (实验40,45)蛋白胨 10gNaCl 5克牛肉膏 5克可溶性淀粉 2g蒸馏水 1000ml琼脂 1520g105kg/cm2,1213灭菌20分钟。十三、明胶培养基 (实验40)牛肉膏蛋白胨液 100ml明胶 1218gpH 7274在水浴锅中将上述成分溶化,不断搅拌。溶化后调pH7274。056kg/cm2(8磅/英寸2),1126灭菌30分钟。十四、蛋白胨水培养基 (实验42)蛋白胨 10gNaCl 5克水 1000mlpH 76105kg/cm2,1213灭菌20分钟。十五
7、、糖发酵培养基 (实验41)蛋白胨水培养基 1000ml酸性复红水溶液 25mlpH 76另配20%糖溶液(葡萄糖、乳糖、蔗糖等)各10ml。制法:1将上述含指示剂的蛋白胨水培养基(pH76)分装于试管中,在每管内放一倒置的小玻璃管,使充满培养液。2将已分装好的蛋白胨水和20%的各种糖溶液分别灭菌,蛋白胨水105kg/cm2,1213灭菌20分钟;糖溶液056kg/cm2(8磅/英寸2),1126灭菌30分钟。3灭菌后,每管以无菌*作分别加入20%的无菌糖溶液05ml(按每10ml培养基中加入20%的糖液05ml,则成1%的浓度)。配制用的试管必须洗干净,避免结果混乱。05%酸性复红水溶液10
8、0ml加1mol/LNaOH16ml即成。十六、葡萄糖蛋白胨水培养基 (实验42)蛋白胨 5g葡萄糖 5gK2HPO4 2g蒸馏水 1000ml将上述各成分溶于1000ml水中,调pH7072,过滤。分装试管,每管10ml,056kg/cm2(8磅/英寸2),1126灭菌30分钟。十七、H2S试验用培养基 (实验42)蛋白胨 20gNaCl 5g柠檬酸铁铵 05gNa2S2O3 05g琼脂 1520g蒸馏水 1000mlpH 72先将琼脂、蛋白胨溶化,冷至60加入其他成分。分装试管,056kg/cm2(8磅/英寸2),1126灭菌15分钟,备用。十八、柠檬酸盐培养基 (实验42)NH4H2PO
9、4 1gK2HPO4 1gNaCl 5gMgSO4 02g柠檬酸钠 2g琼脂 1520g蒸馏水 1000ml1%溴麝香草酚蓝酒精液 10ml将上述各成分加热溶解后,调pH68,然后加入指示剂,摇匀,用脱脂棉过滤。制成后为黄绿色,分装试管,105kg/cm2,1213灭菌20分钟后制成斜面。十九、土霉素效价测定用培养基 (实验44)培养基(供培养试验菌用)蛋白胨 5g酵母膏 3g牛肉膏 15gNaCl 35g葡萄糖 1gK2HPO4 368gKH2PO4 132g琼脂 2025g蒸馏水 1000mlpH 72105kg/cm2,1213灭菌20分钟。培养基(供摊布双碟的上,下层用)蛋白胨 6g酵
10、母膏 6g牛肉膏 15g葡萄糖 1g琼脂 1518g蒸馏水 1000mlpH 68105kg/cm2,1213灭菌20分钟。二十、酪蛋白培养基 (实验46)KH2PO4 036gNa2HPO412H2O 13gNaCl 01gZnSO47H2O 002gCaCl22H2O 0002g酪素 4g酪素水解氨基酸 005g琼脂 1520g蒸馏水 1000mlpH 7072先称取4g酪素,再加入05mol/LNaOH约2ml,将酪素溶解;然后依次加入其他药品,最后调pH7072。056kg/cm2(8磅/英寸2),1126灭菌30分钟。二十一、完全培养基(TYEG培养基) (实验47)胰蛋白胨 10g
11、酵母浸膏 5gK2HPO4 3g葡萄糖 1g琼脂 1520g蒸馏水 1000mlpH 70105kg/cm2,1213灭菌20分钟。二十二、基本培养基(MM培养基) (实验47)(NH4)2SO4 1gK2HPO4 7gKH2PO4 3g柠檬酸钠 05gMgSO47H2O 01g葡萄糖 5g琼脂 1520g蒸馏水 1000ml105kg/cm2,1213灭菌20分钟。二十三、复红亚硫酸钠培养基(远藤氏培养基) (实验60,61)蛋白胨 10g乳糖 10gK2HPO4 35g琼脂 2030g蒸馏水 1000ml无水亚硫酸钠 5g左右5%碱性复红乙醇溶液 20ml先将琼脂加入900ml蒸馏水中,加
12、热溶解,再加入磷酸氢二钾及蛋白胨,使溶解,补足蒸馏水至1000ml,调pH至7274。加入乳糖,混匀溶解后,070kg/cm2(10磅/英寸2),1152灭菌20分钟。称取亚硫酸钠置一无菌空试管中,加入无菌水少许使溶解,再在水浴中煮沸10分钟后,立刻滴加于20ml5%碱性复红乙醇溶液中,直至深红色褪成淡粉红色为止。将此亚硫酸钠与碱性复红的混合液全部加至上述已灭菌的并仍保持溶化状态的培养基中,充分混匀,倒平皿,放冰箱备用。贮存时间不宜超过2周。二十四、伊红美蓝培养基(EMB培养基) (实验60,61)蛋白胨水琼脂培养基 100ml20%乳糖溶液 2ml2%伊红水溶液 2ml05%美蓝水溶液 1ml将已灭菌的蛋白胨水琼脂培养基(pH76)加热溶化,冷却至60左右时,再把已灭菌的乳糖溶液、伊红水溶液及美蓝水溶液按上述量以无菌*作加入。摇匀后,立即倒平板。乳糖在高温灭菌易被破坏必须严格控制灭菌温度,一般是070kg/cm2(10磅/英寸2),1152
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