超声波提取紫露草总黄酮及其鉴别-论文网

1、超声波提取紫露草总黄酮及其鉴别-论文网论文摘要：目的 为充分利用紫露草植物资源，避免资源的浪费，探讨紫露草总黄酮的提取及鉴别方法。方法 采用超声波乙醇浸提法从紫露草中提取黄酮类物质，对所提取的黄酮类物质进行验证，并用分光光度法测定含量。结果 测得样品中总黄酮的含量C=0.1562mg/ml，回收率为97.4%，其纯度和产率均较高。结论 该方法采用全物理过程，无任何污染，是提取紫露草黄酮类物质的有效途径。论文关键词：超声波提取,紫露草,总黄酮,鉴别*通讯作者：黄锁义，教授，硕士研究生导师.紫露草（Tradescantiareflexa）别名紫花鸭草，为鸭跖草科多年生宿根草本，原产于北美，我国引种

2、栽培。紫露草茎通常簇生，紫露草性喜凉爽，湿润气候，耐寒性较强，适应性广，耐旱、耐贫瘠、耐盐碱，几乎没有病虫害。最常见的是适应性非常强的开蓝紫色花的品种。我国各地均有栽培。紫露草性味淡、甘、凉，可以活血、利水、消肿、散结、解毒。能治疗痈疽肿毒、结核、淋病等疾病。近年来，超声技术应用于提取植物中的生物碱、苷类、生物活性物质、动物组织浆的毒质等研究已有报道，表明其具有能耗低、效率高、不破坏有效成分的特点。很多研究表明，利用超声波产生的强烈振动、高的加速度、强烈的空化效应、搅拌作用等，可加速植物材料中的有效成分进入溶剂，从而增加有效成分的提取率，缩短提取时间，并且还可避免高温对提取成分的影响。但超声技

3、术应用于提取紫露草叶中黄酮类物质的研究尚未见报道，本文报道用超声波提取紫露草总黄酮及鉴别。1仪器与试剂1.1仪器KQ5200DB型数控超声波清洗器（超声工作频率40KHz，昆山市超声仪器有限公司）；UV-755B紫外可见分光光度计（上海分析仪器总厂）；ZF-I型三用紫外分析仪(上海顾村光电仪器厂)；SHB-III循环水式多用真空泵（郑州长城科工贸有限公司）。1.2试剂95%乙醇AR；亚硝酸钠AR；硝酸铝AR；氢氧化钠AR；三氯化铝AR；盐酸AR；氨水AR；冰醋酸AR；乙酸乙酯AR；芦丁标准品（中国药品生物制品检定所）；新鲜紫露草采自右江民族医学院校园内。2方法与结果2.1总黄酮成分提取取新鲜紫

4、露草，烘干，粉碎。称取紫露草粉末6g，加80ml95%乙醇，超声波提取2.5h，抽滤。滤渣再加80ml95%乙醇，超声波提取2.5h，抽滤，合并两次滤液，减压回收乙醇至滤液仅剩57ml为止，放置100ml容量瓶中，用60%乙醇稀释至刻度，得样品液。2.2测定方法依据以芦丁为对照品测定木瓜叶中总黄酮的含量，加入铝离子试剂，同时控制适宜pH值，使黄酮化合物与铝盐形成络合物，在可见光区能获得稳定的特征吸收峰。2.3定量实验总黄酮的含量测定2.3.1波长的选择取样品液适量，在0.30ml5%亚硝酸钠溶液存在的碱性条件下，经硝酸铝显色后，以试剂为空白参比液在420700nm波长范围测定螯合物的吸光度，螯

5、合物于510nm波长处有最大吸收，故测定时选用此波长。2.3.2标准曲线的绘制分别精密吸取芦丁对照液（0.10mg/ml）0.00，0.50，1.00，2.00，3.00，4.00，5.00ml于10.00ml容量瓶中，分别加入5%亚硝酸钠溶液0.30ml，摇匀，静置6min；再加10%硝酸铝溶液0.30ml，摇匀，静置6min；再加4%氢氧化钠溶液4.00ml，用60%乙醇稀释至刻度，摇匀，静置12min，以试剂作空白，于510nm处测定吸光度，见表1表1紫外可见分光光度计测定吸光度 C（mg/ml）0.00 0.005 0.01 0.02 0.03 0.04 0.05 吸光度 0.000

6、0.060 0.122 0.250 0.365 0.485 0.603 根据上表得回归方程：A=-2.906910+12.05C，r=0.9999。2.3.3提取物含量的测定精密吸取样品液0.50ml，置10.00ml容量瓶，按标准曲线的制备方法测定其吸光度A=0.097，根据回归方程：A=-2.906910+12.05C，计算样品中总黄酮的含量C=0.1562mg/ml。2.3.4回收实验精密量取样品液1.00ml，加入标准芦丁对照品1.00ml（0.10mg/ml），同前样品测定方法操作测定吸光度，求出回收率为97.4%。2.4定性实验总黄酮的鉴别2.4.1颜色反应紫外光下呈色反应：取该样

7、品溶液点在滤纸上，在可见光下呈灰黄色，在紫外光下呈灰褐色并有荧光斑点。浓氨水反应：取该样品溶液点在滤纸上，将滤纸在氨水上方熏0.5min，立即在紫外光下观察，呈极明显的黄褐色荧光斑点。三氯化铝反应：取样品溶液点在滤纸上，滴加三氯化铝乙醇溶液，吹干。在可见光下呈灰黄色，在紫外光下呈黄色荧光斑点。乙酸镁反应：取样品溶液点在滤纸上，滴加1%乙酸镁甲醇溶液，吹干，紫外光下呈黄色斑点。盐酸-镁粉反应：取乙醇提取液1ml于试管中加镁粉，再加入浓盐酸数滴（1次加入），在泡沫处呈紫红色。2.4.2纸层析取样品溶液10l点在滤纸上。用正丁醇：醋酸：水=4：1：5（体积比）为展开剂，上行展开5h，取出晾干。喷1%氯化铝乙醇溶液。吹干后于紫外光下，可见荧光斑点。3讨论3.1实验结果表明，本实验方法工艺简单，回