标本的正确采集

1、标本类型 血液血液 尿液尿液 粪便粪便 痰及上呼吸道标本痰及上呼吸道标本 脑脊液脑脊液 浆膜腔积液浆膜腔积液 胆汁胆汁 脓性分泌物脓性分泌物血液标本血液标本采血指征采血指征患者出现一下体征时可作为采血的重要指征：患者出现一下体征时可作为采血的重要指征： 发热（发热（ 38 38 ）或低温（）或低温（ 36 36 ），寒战），寒战 白细胞增多（计数大于白细胞增多（计数大于1010，00000010109 9/L,/L,特别有特别有“核左核左移移”未成熟的或杆状的白细胞），粒细胞减少（成熟未成熟的或杆状的白细胞），粒细胞减少（成熟的多核白细胞小于的多核白细胞小于1000 1000 10109 9/

2、L /L ），血小板减少，），血小板减少， 皮肤粘膜出血，昏迷，多器官衰竭，血压降低，皮肤粘膜出血，昏迷，多器官衰竭，血压降低，CRPCRP升高及呼吸加快升高及呼吸加快 或同时具备上述几种体征应采血培养或同时具备上述几种体征应采血培养 对入院危重患者未进行系统性抗生素治疗之前，应及对入院危重患者未进行系统性抗生素治疗之前，应及时采集血培养时采集血培养皮肤消毒程序皮肤消毒程序 70%70%酒精檫拭静脉穿刺部位待酒精檫拭静脉穿刺部位待3030秒以上秒以上 1%-2%1%-2%碘酊作用碘酊作用3030秒或秒或10%10%碘伏作用碘伏作用6060秒，从穿秒，从穿刺向外以刺向外以1.5cm-2cm1.5

3、cm-2cm直径画圈进行消毒直径画圈进行消毒 70%70%酒精脱碘酒精脱碘 （对碘过敏的患者，用（对碘过敏的患者，用70%70%酒精酒精消毒消毒6060秒，带酒精挥发干燥后采血）秒，带酒精挥发干燥后采血）培养瓶消毒程序培养瓶消毒程序 用用70%70%酒精消毒血培养瓶橡皮塞，作用酒精消毒血培养瓶橡皮塞，作用6060秒秒 用无菌纱布或棉签清除橡皮塞表面酒精，然用无菌纱布或棉签清除橡皮塞表面酒精，然后把血液注入培养瓶。后把血液注入培养瓶。静脉穿刺和培养瓶接种程静脉穿刺和培养瓶接种程序序 在穿刺前或穿刺期间，防止静脉滑动，带无菌乳胶手在穿刺前或穿刺期间，防止静脉滑动，带无菌乳胶手套固定静脉，如行第二次

4、穿刺，应换针头。套固定静脉，如行第二次穿刺，应换针头。 用注射器对成人不同部位穿刺取血，勿换针头直接注用注射器对成人不同部位穿刺取血，勿换针头直接注入血培养瓶，或严格按厂商推荐方法采血。入血培养瓶，或严格按厂商推荐方法采血。 血样接种到培养瓶后，轻轻颠倒混匀防止血液凝固。血样接种到培养瓶后，轻轻颠倒混匀防止血液凝固。 用用70%70%酒精清洁皮肤穿刺部位去除残留碘。在皮肤上酒精清洁皮肤穿刺部位去除残留碘。在皮肤上避免使用胶粘剂或不透气的敷料。避免使用胶粘剂或不透气的敷料。 立即送检，勿冷藏。立即送检，勿冷藏。采血量 成人：成人：8-10ml8-10ml 儿童：儿童：1-5ml1-5ml 一般血

5、液标本与培养基比例为一般血液标本与培养基比例为1 1：1010为宜为宜血培养份数和采血时间血培养份数和采血时间 采血培养应该尽量在使用抗菌药之前进行，在采血培养应该尽量在使用抗菌药之前进行，在24h24h内采集内采集2-32-3份血培养。份血培养。 对间歇性寒战或发热应在寒战或体温高峰到来对间歇性寒战或发热应在寒战或体温高峰到来之前之前0.5-1h0.5-1h采集，或在寒战或发热后采集，或在寒战或发热后1h1h进行。进行。对特殊的全身性和局部感染患者采集血培养的建议对特殊的全身性和局部感染患者采集血培养的建议 怀疑急性原发性菌血症、脑膜炎、骨髓炎、关节炎及怀疑急性原发性菌血症、脑膜炎、骨髓炎、

6、关节炎及肺炎的患者，应立即采集肺炎的患者，应立即采集2或或3份进行血培养。份进行血培养。 不明病原的发热，如隐形脓肿、伤寒热和波浪热，先不明病原的发热，如隐形脓肿、伤寒热和波浪热，先采集采集2或或3份以上。份以上。 怀疑菌血症或真菌菌血症，但血培养持续阴性，应改怀疑菌血症或真菌菌血症，但血培养持续阴性，应改变血培养方法，以获得罕见的（或苛氧的）微生物。变血培养方法，以获得罕见的（或苛氧的）微生物。 对急性心内膜炎对急性心内膜炎患者患者，在，在1-2h内采集内采集3份血培养，如份血培养，如果果24h后阴性，在采集后阴性，在采集3份以上的血培养。入院前两周份以上的血培养。入院前两周内接受抗生素治疗

7、的患者，连续三天，每天采集内接受抗生素治疗的患者，连续三天，每天采集2份。份。标本运送标本运送 采血后应立即送检，如不能立即送检，需室温采血后应立即送检，如不能立即送检，需室温保存或置保存或置35373537孵箱中，切勿冷藏。孵箱中，切勿冷藏。 自动连续监测系统虽有允许延迟上机监测微生自动连续监测系统虽有允许延迟上机监测微生物生长的原理，还是应该尽量减少延迟上机时物生长的原理，还是应该尽量减少延迟上机时间。间。尿液标本尿液标本采集时间及送检采集时间及送检 通常应采集通常应采集晨起第一次尿液晨起第一次尿液送检，原则上应选择在送检，原则上应选择在抗菌药物应用之前采集抗菌药物应用之前采集。 尽量采集

8、晨尿，因为经过膀胱的夜间孵育，细菌尽量采集晨尿，因为经过膀胱的夜间孵育，细菌量会增加。对于无症状的病人应连续三天晨尿送检。量会增加。对于无症状的病人应连续三天晨尿送检。 不要因想得到病人的自排尿而强迫他们摄入过多不要因想得到病人的自排尿而强迫他们摄入过多的水分，额外的摄入会稀释尿液并有可能使细菌计数的水分，额外的摄入会稀释尿液并有可能使细菌计数降至降至105CFU/ml以下以下 尿液标本采集后应在尿液标本采集后应在2h内进行培养，否则应置内进行培养，否则应置4-8 冰箱冷藏保存，经冷藏的标本尽量在冰箱冷藏保存，经冷藏的标本尽量在8h8h内进行接种。内进行接种。标本采集标本采集 Midstrea

9、m voided urine (Midstream voided urine (中段尿中段尿) ) 肾盂尿采集法肾盂尿采集法 膀胱穿刺术膀胱穿刺术 中段尿中段尿 临床上最多采用的方法临床上最多采用的方法 简单易行，无感染的危险简单易行，无感染的危险 这种方法不适合厌氧培养，因在尿道及周围有这种方法不适合厌氧培养，因在尿道及周围有许多厌氧菌存在，有污染可能许多厌氧菌存在，有污染可能 女性患者女性患者 先以肥皂水或以先以肥皂水或以1 1：10001000高锰酸钾水溶液冲洗外高锰酸钾水溶液冲洗外阴部及尿道口阴部及尿道口 再用灭菌水清洗再用灭菌水清洗 最后用灭菌纱布擦拭最后用灭菌纱布擦拭 排尿弃去前段

10、尿，留取中段尿排尿弃去前段尿，留取中段尿10ml10ml左右于无菌容左右于无菌容器内加盖送验器内加盖送验 采集中段尿最好由专门护士采集，以减少污染。采集中段尿最好由专门护士采集，以减少污染。 男性患者男性患者 先用肥皂水清洗尿道口先用肥皂水清洗尿道口 再用清水冲洗后留取中段尿再用清水冲洗后留取中段尿 包皮过长者为防止包皮内细菌的污染，包皮过长者为防止包皮内细菌的污染，将包皮翻开冲洗后再留取中段尿。将包皮翻开冲洗后再留取中段尿。 儿童患者儿童患者 采集中段尿较困难采集中段尿较困难 如尿中细菌明显增多，可高度怀疑如尿中细菌明显增多，可高度怀疑urinary tract infection(urin

11、ary tract infection(尿路感染尿路感染) )， 无细菌则可否定无细菌则可否定 细菌数居中时，有必要用导尿或膀胱穿刺细菌数居中时，有必要用导尿或膀胱穿刺术采集尿液。术采集尿液。 肾盂尿采集法肾盂尿采集法 确定确定bacteriuria(bacteriuria(菌尿菌尿) )是否来自肾脏，可通过是否来自肾脏，可通过膀胱镜，输尿管插管采集左、右肾盂尿。膀胱镜，输尿管插管采集左、右肾盂尿。 膀胱穿刺术 采用耻骨上膀胱穿刺术取尿采用耻骨上膀胱穿刺术取尿 一般用于一般用于anaerobeanaerobe培养，故在取得尿液后，培养，故在取得尿液后，针头插于无菌橡皮塞上立即送检针头插于无菌橡

12、皮塞上立即送检 一般应用于新生儿、幼儿以及中段尿培养一般应用于新生儿、幼儿以及中段尿培养阴性又怀疑泌尿系感染的患者。阴性又怀疑泌尿系感染的患者。 便标本便标本临床问题临床问题 人体肠道中的细菌种类和数量繁多，健康人体肠道中的细菌种类和数量繁多，健康人肠道内常见细菌有无芽孢厌氧杆菌（如拟杆人肠道内常见细菌有无芽孢厌氧杆菌（如拟杆菌等）、大肠埃希菌、产气肠杆菌、变形杆菌、菌等）、大肠埃希菌、产气肠杆菌、变形杆菌、铜绿假单胞菌、粪产碱杆菌、枯草杆菌、棒状铜绿假单胞菌、粪产碱杆菌、枯草杆菌、棒状杆菌、葡萄球菌、肠球菌及酵母菌、念珠菌属杆菌、葡萄球菌、肠球菌及酵母菌、念珠菌属等，这些细菌在肠腔内通常是不

13、致病的。引起等，这些细菌在肠腔内通常是不致病的。引起腹泻的病原菌有致病性大肠埃希菌、志贺菌属、腹泻的病原菌有致病性大肠埃希菌、志贺菌属、沙门菌属、耶尔森菌属、爱德华菌属、弧菌属、沙门菌属、耶尔森菌属、爱德华菌属、弧菌属、弯曲菌属、厌氧芽孢杆菌属等。弯曲菌属、厌氧芽孢杆菌属等。 临床问题临床问题 腹泻是我国的常见病、多发病，其中多数腹泻是我国的常见病、多发病，其中多数是属于感染性腹泻。感染性腹泻是一大类发病是属于感染性腹泻。感染性腹泻是一大类发病急、传播快、危害广的常见感染性疾病，轻者急、传播快、危害广的常见感染性疾病，轻者表现为轻度腹泻，重者可造成患者脱水、败血表现为轻度腹泻，重者可造成患者脱

14、水、败血症甚至死亡。因此及时、准确地检出致病微生症甚至死亡。因此及时、准确地检出致病微生物，对于发现传染源、控制疾病流行及有效治物，对于发现传染源、控制疾病流行及有效治疗腹泻病患者都有着重要的意义。疗腹泻病患者都有着重要的意义。 临床问题临床问题 不同地区、不同年龄的患者感染性腹泻的不同地区、不同年龄的患者感染性腹泻的病因存在着一定的差异。腹泻病原菌监测结果病因存在着一定的差异。腹泻病原菌监测结果显示非沙门菌、志贺菌性腹泻日益增加。目前显示非沙门菌、志贺菌性腹泻日益增加。目前随着抗生素的广泛应用，影响到了肠内细菌微随着抗生素的广泛应用，影响到了肠内细菌微生态平衡，出现抗生素相关性结肠炎等。不同

15、生态平衡，出现抗生素相关性结肠炎等。不同的致病细菌引起患者的临床症状不尽相同，患的致病细菌引起患者的临床症状不尽相同，患者的治疗方案也存在着差异，因此粪便细菌培者的治疗方案也存在着差异，因此粪便细菌培养结果对于提高临床治疗针对性，促进抗菌药养结果对于提高临床治疗针对性，促进抗菌药物的合理应用起着重要作用。物的合理应用起着重要作用。 送检指征送检指征 当腹泻患者出现以下任何一种情况时建议送检当腹泻患者出现以下任何一种情况时建议送检粪便细菌培养，粪便细菌培养，粪便涂片镜检白细胞粪便涂片镜检白细胞5/HP5/HP存在，提示患者为存在，提示患者为志贺菌、志贺菌、EIECEIEC等细菌引起的侵袭性腹泻等

16、细菌引起的侵袭性腹泻重症腹泻重症腹泻体温大于体温大于38.538.5血便血便便中有脓液便中有脓液未经抗生素治疗的持续性腹泻患者未经抗生素治疗的持续性腹泻患者来自疫区的患者。来自疫区的患者。 标本的采集标本的采集 标本采集应争取在发病早期和使用抗菌药物治疗标本采集应争取在发病早期和使用抗菌药物治疗之前之前 自然排便采集自然排便采集粪便标本时，取有脓血、粘液、组粪便标本时，取有脓血、粘液、组织碎片部分的粪便（织碎片部分的粪便（2-3g）。液体粪便则取絮状）。液体粪便则取絮状物，一般取物，一般取1-2ml，直接装入无菌便盒或保存液，直接装入无菌便盒或保存液或转运培养基中送检或转运培养基中送检 直肠拭

17、子采集直肠拭子采集粪便标本，常适于排便困难患者或粪便标本，常适于排便困难患者或婴幼儿。常用肥皂水将肛门周围洗净，用无菌盐婴幼儿。常用肥皂水将肛门周围洗净，用无菌盐水、保存液或增菌液湿润的棉拭子插入肛门，成水、保存液或增菌液湿润的棉拭子插入肛门，成人约人约4-5cm,儿童约儿童约2-3cm, 与直肠粘膜表面接触，与直肠粘膜表面接触，轻轻旋转，必须将拭子植于适当的运送培养基内。轻轻旋转，必须将拭子植于适当的运送培养基内。 标本的采集标本的采集 直肠指诊直肠指诊时，亦可从手套上获得标本，及时送检时，亦可从手套上获得标本，及时送检 容器应是无菌、带盖、广口的（不宜使用纸盒）、送容器应是无菌、带盖、广口

18、的（不宜使用纸盒）、送检的标本中不应加入防腐剂检的标本中不应加入防腐剂 粪便细菌培养标本验收标准及粪便细菌培养标本验收标准及处理方法处理方法标标本本不不合合格格原原因因 处处理理方方法法 粪便标本留取时间超过2小时 拒绝接收，在化验单上注明“样本留取时间过长，请重留标本” 直肠拭子未植于运送培养基内 拒绝接受， 在化验单上注明 “样本送检不合格，请将拭子置于运送培养基内” 送检的便标本中混有尿液 拒绝接受，在化验单上注明“送检样本中混有尿液，不合格，请重新送检” 标本运送标本运送 粪便标本应于粪便标本应于1h1h内送检，如不能及时送检可加内送检，如不能及时送检可加入入pH7.0pH7.0的磷酸

19、盐甘油或转运培养基中，但不的磷酸盐甘油或转运培养基中，但不宜超过宜超过24h24h。 直肠拭子采集的标本必须插入合适的转送培养直肠拭子采集的标本必须插入合适的转送培养基中送检，转运时间不宜超过基中送检，转运时间不宜超过2h2h。 高度怀疑霍乱弧菌感染时，标本送至专门实验高度怀疑霍乱弧菌感染时，标本送至专门实验室复检时，必须妥善包装，防止溢漏，由专人室复检时，必须妥善包装，防止溢漏，由专人负责，送检容器用后必须经过消毒处理。负责，送检容器用后必须经过消毒处理。 呼吸道标本呼吸道标本标本采集标本采集 自然咳痰法自然咳痰法 支气管镜采集法支气管镜采集法 胃内采痰法胃内采痰法 气管穿刺法气管穿刺法 小

20、儿取痰法小儿取痰法 上呼吸道标本上呼吸道标本 自然咳痰法自然咳痰法 患者患者清晨起床清晨起床后，为减少口腔正常菌群的污染，用后，为减少口腔正常菌群的污染，用清水反复嗽口后清水反复嗽口后用力咳出第一口痰用力咳出第一口痰于无菌容器内于无菌容器内 对于痰量少或无痰的患者可采用雾化吸入加温至对于痰量少或无痰的患者可采用雾化吸入加温至4545的的10%NaCl10%NaCl水溶液，使痰易于排出水溶液，使痰易于排出 对痰量较少的小儿，可轻轻压迫胸骨上部的气管，对痰量较少的小儿，可轻轻压迫胸骨上部的气管，使其咳嗽使其咳嗽 收集痰后立即送检，以防某些细菌在外环境中死亡收集痰后立即送检，以防某些细菌在外环境中死

21、亡 支气管镜采集法支气管镜采集法 用支气管镜采集法在肺内病灶附近用导管吸引用支气管镜采集法在肺内病灶附近用导管吸引或用支气管刷直接取得标本或用支气管刷直接取得标本 该方法对患者有一定痛苦，不易被接受该方法对患者有一定痛苦，不易被接受 胃内采痰法胃内采痰法 无自觉症状的慢性结核病人无自觉症状的慢性结核病人, , 尤其婴幼儿尤其婴幼儿有时将痰误咽入胃内有时将痰误咽入胃内 可采集胃内容物，做结核杆菌培养，其阳可采集胃内容物，做结核杆菌培养，其阳性率比咳痰高性率比咳痰高10%10%左右左右 以清晨空腹采集胃液为好以清晨空腹采集胃液为好 气管穿刺法气管穿刺法 通过气管穿刺取得痰，此方法主要用通过气管穿刺

22、取得痰，此方法主要用于于厌氧菌培养厌氧菌培养 小儿取痰法小儿取痰法 用弯压舌板伸向舌根部压舌，用棉拭子伸用弯压舌板伸向舌根部压舌，用棉拭子伸入咽部，小儿经压舌刺激咳嗽时，可喷出入咽部，小儿经压舌刺激咳嗽时，可喷出肺部或气管分泌物，粘在拭子上肺部或气管分泌物，粘在拭子上 立即送检立即送检 上呼吸道标本上呼吸道标本 通常用无菌棉拭子，取咽后壁或腭通常用无菌棉拭子，取咽后壁或腭垂的后侧垂的后侧 注意事项注意事项 采集后应立即送检，以防某些细菌在外环境中死亡。采集后应立即送检，以防某些细菌在外环境中死亡。 作结核杆菌检查，痰量要多或留取作结核杆菌检查，痰量要多或留取2424小时痰液，婴儿小时痰液，婴儿

23、肺结核要用胃管取痰肺结核要用胃管取痰 约有约有1/4-1/21/4-1/2肺部感染患者肺部感染患者可能发生可能发生菌血症菌血症，应同时，应同时作作血培养血培养。 脑脊髓液标本脑脊髓液标本 正常人体中，均为正常人体中，均为无菌的无菌的，细菌侵入该部位，细菌侵入该部位，会引起这些部位的感染。会引起这些部位的感染。标本采集标本采集 通过通过腰椎穿刺术腰椎穿刺术以无菌手续收集以无菌手续收集CSF 3-5CSF 3-5毫升于毫升于无菌小瓶或无菌试管中无菌小瓶或无菌试管中 一般采用第二管一般采用第二管CSFCSF用于微生物的培养。收集用于微生物的培养。收集CSFCSF后在常温下后在常温下1515分钟内必须

24、送到实验室分钟内必须送到实验室 如果如果CSFCSF量足够的话，可以量足够的话，可以3000 rpm3000 rpm离心离心1515分钟分钟取沉淀物进行接种取沉淀物进行接种 注意事项注意事项 CSFCSF切勿放入冰箱，否则会使致病菌死亡。尤其是切勿放入冰箱，否则会使致病菌死亡。尤其是肺炎链球菌、脑膜炎奈瑟菌、嗜血杆菌肺炎链球菌、脑膜炎奈瑟菌、嗜血杆菌 当当CSFCSF收集量较少时，应首先做微生物学检查，再收集量较少时，应首先做微生物学检查，再做其他检查，以免标本被污染。做其他检查，以免标本被污染。 应在用抗菌药物之前采集应在用抗菌药物之前采集CSF CSF 浆膜腔积液标本浆膜腔积液标本 浆膜腔

25、通常是浆膜腔通常是无菌的无菌的 多因浆膜腔发生循环障碍、炎症、癌侵润多因浆膜腔发生循环障碍、炎症、癌侵润等病变，腔内液体渗漏增加所致等病变，腔内液体渗漏增加所致 标本采集标本采集 临床医师在无菌操作下穿刺抽取，取临床医师在无菌操作下穿刺抽取，取5-10ml5-10ml于无于无菌小瓶中，同时加入菌小瓶中，同时加入109mmol/L 109mmol/L 枸橼酸钠枸橼酸钠1 1：1010体积，充分混匀后立即送检。体积，充分混匀后立即送检。 胆汁标本胆汁标本标本采集标本采集 十二指肠引流法十二指肠引流法 胆囊穿刺法胆囊穿刺法 手术采集法手术采集法 十二指肠引流法十二指肠引流法 在无菌操作下用引流管作十

26、二指肠引流采集胆汁，在无菌操作下用引流管作十二指肠引流采集胆汁，所采集的胆汁分所采集的胆汁分A A、B B、C C三部分三部分 A A液来自胆总管，为橙黄色或金黄色液来自胆总管，为橙黄色或金黄色 B B液来自胆囊，为棕黄绿色液来自胆囊，为棕黄绿色 C C液来自肝胆管，为柠檬色液来自肝胆管，为柠檬色 因插管时通过口腔，可混入口腔的正常菌群。一因插管时通过口腔，可混入口腔的正常菌群。一般以般以B B液作菌培养的意义较大液作菌培养的意义较大 胆囊穿刺法胆囊穿刺法 行胆囊照影术时，可同时采集胆汁，此法行胆囊照影术时，可同时采集胆汁，此法采集的胆汁不易被污染适宜作细菌培养。采集的胆汁不易被污染适宜作细菌

27、培养。 手术采集法手术采集法 在进行胆囊或胆管手术时可直接穿刺采集胆在进行胆囊或胆管手术时可直接穿刺采集胆汁汁 注意事项注意事项 由于厌氧菌在感染中占有较大比例，在作由于厌氧菌在感染中占有较大比例，在作需氧培养的同时应考虑到作厌氧培养需氧培养的同时应考虑到作厌氧培养 标本采集后应立即送检标本采集后应立即送检 标本采集标本采集 开放性感染和已破溃的化脓灶开放性感染和已破溃的化脓灶 感染与体腔或外界相通的部位感染与体腔或外界相通的部位 闭索性脓肿闭索性脓肿 开放性感染和已破溃的化开放性感染和已破溃的化脓灶脓灶 标本采集前先用灭菌生理盐水冲洗表面污染菌，再标本采集前先用灭菌生理盐水冲洗表面污染菌，再用无菌针管或注射器吸取脓性分泌物用无菌针管或注射器吸取脓性分泌物 慢性感染慢性感染 如污染严重，很难分离到致病菌，可取如污染严重，很难分离到致病菌，可取感染部位下层的组织，经研磨匀浆后分离培养感染部位下层的组织，经研磨匀浆后分离培养 瘘管内脓液瘘管内脓液 用灭菌棉拭子挤压瘘管弃取前端脓液用灭菌棉拭子挤压瘘