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1、会计学1张玉梅医学微生物学革兰染色实验张玉梅医学微生物学革兰染色实验一、原理一、原理1 1、原理、原理鉴别染色法,于1884年由丹麦医师Gram创立 G:肽聚糖层较薄,交联度低,含较多肽聚糖层较薄,交联度低,含较多脂质,用乙醇等有机溶剂脱色时类脂质脂质,用乙醇等有机溶剂脱色时类脂质融解,增加了细胞的通透性,薄而松散融解,增加了细胞的通透性,薄而松散的肽聚糖网不能阻挡结晶紫和碘复合物的肽聚糖网不能阻挡结晶紫和碘复合物溶出,呈复染后的红色。溶出,呈复染后的红色。G:细胞壁厚且结构交联致密,用脱色细胞壁厚且结构交联致密,用脱色剂处理时,肽聚糖层孔径缩小,且不含剂处理时,肽聚糖层孔径缩小,且不含类脂,
2、通透性降低,结晶紫和碘复合物类脂,通透性降低,结晶紫和碘复合物牢固结合在细胞壁上,呈初染时的紫色。牢固结合在细胞壁上,呈初染时的紫色。初染初染-媒染媒染-脱色脱色-复染复染 G- G+第1页/共6页3初染:初染:结晶紫结晶紫1 1分钟,水冲甩干;分钟,水冲甩干;媒染:媒染:卢戈氏碘液卢戈氏碘液1 1分钟,水冲甩干;分钟,水冲甩干;脱色脱色:95%酒精酒精30秒钟,水冲甩干;秒钟,水冲甩干;复染复染:稀释复红稀释复红1 1分钟,水冲甩干;分钟,水冲甩干;涂片涂片干燥干燥固定固定染色染色镜检镜检 取菌取菌NS 二、步骤二、步骤第2页/共6页4柠檬色葡萄球菌:蓝紫色柠檬色葡萄球菌:蓝紫色G+ 变变 形形 杆杆 菌:菌: 红色红色G 柠檬色葡萄球菌柠檬色葡萄球菌 变形杆菌变形杆菌革兰染色 X1000革兰染色革兰染色 X1000X1000三、结果三、结果第3页/共6页u鉴别细菌u指导临床用药指导临床用药u研究细菌的致病性研究细菌的致病性G+:青霉素、头孢类等G G- -: :链霉素、卡那霉素等链霉素、卡那霉素等G G+ +:外毒素外毒素G G- -:内毒素内毒素四、意义四、意义第4页/共6页6注意事项注意事项革兰氏染色成败与否与许多因素有关革兰氏染色成败与否与许多因素有关1 1、菌龄、菌龄2
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